HSP27在人卵巢周期中的表达

目的通过研究热休克蛋白27（HSP27）在正常人卵巢周期中的不同发育阶段卵泡中的表达,探讨其在卵泡发育中的可能调控机理。方法收集18例月经规则的生育年龄妇女不同周期阶段的卵巢组织和6例PCOS患者的卵巢组织,采用免疫组织化学方法观察HSP27蛋白在人卵巢中的定位及表达情况。结果HSP27定位表达于人原始卵泡的卵母细胞,各期卵泡的颗粒细胞、卵泡膜细胞、黄体细胞及间质细胞均未见表达。PCOS组卵母细胞阴性表达。结论HSP27可能和原始卵泡的卵母细胞发育与凋亡有关。     

CD105在子宫腺肌病中的表达及其临床意义

目的探讨子宫腺肌病在位内膜、异位内膜中CD105的表达与发病机制、临床表现的关系。方法采用免疫组织化学法(Envision二步法)检测41例子宫腺肌病在位内膜、异位内膜中CD105的表达,并应用计算机图象分析系统分析 CD105表达的积分灰度。结果子宫腺肌病异位内膜中CD105的表达明显高于在位内膜(P<0．01),黄体期异位内膜CD105的表达略强于卵泡期,不具有显著性差异(P>0．05),具有痛经症状者异位内膜CD105的表达明显强于无痛经症状者(P<0．01)。结论子宫腺肌病异位内膜中CD105的表达明显强于在位内膜,且与痛经症状具有相关性,CD105的过度表达提示血管生成在子宫腺肌病的发生发展中发挥作用。     

ABCG2蛋白及其在干细胞与肿瘤化疗耐药中的作用

三磷酸腺苷结合盒超家族G成员2(ABCG2)基因定位于4q22,以同源二聚体形式执行完整转运功能,在保护细胞及机体免受各种内外源物质伤害等方面起着重要作用,其功能发挥受自身结构、机体微环境及性激素等多种因素的影响.它参与了侧群(SP)干细胞表型形成,还与肿瘤的化疗耐药及肿瘤的发生密切相关.     

人IL-1RⅡ基因腺病毒载体的构建及在子宫内膜异位症细胞中的表达

目的：利用AdEasy XL系统，构建并鉴定IL-1RⅡ基因重组腺病毒载体，并在子宫内膜异位症（EM）细胞中表达。方法-PCR扩增含有IL-1RⅡ全长cDNA的片段，亚克隆到pShuttle—CMV穿梭质粒，经酶切和测序验证无误后，再经电转化与pAdEasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组产生腺病毒载体质粒。经过抗性筛选、酶切鉴定以及再次测序验证无误后得到阳性的重组质粒，经PacⅠ酶切线性化再在293细胞中进行包装扩增，用ELISA检测IL-1RⅡ蛋白的表达。利用Adeasy XL系统的对照载体pShuttle-CMV-LacZ同上操作作为对照。收集的重组腺病毒感染原代培养的EM基质细胞，并以免疫组化法鉴定IL-1RⅡ表达。结果：测序证实连接后IL-1RⅡ序列完全正确；抗性筛选及酶切鉴定均表明重组腺病毒载体构建成功；pShuttle-CMV-LacZ转染293细胞3d后x-gal染色阳性，回收病毒可以重复感染293细胞，ELISA鉴定表达IL-1RⅡ可溶性蛋白，证明病毒包装成功。重组的腺病毒感染EM基质细胞后，免疫组化法证实IL-1RⅡ表达。结论：成功地构建了IL-1RⅡ基因重组腺病毒载体，并且在EM基质细胞中表达，为进一步研究IL-1RⅡ基因在EM中的作用乃至生物治疗都奠定了基础。     

促性腺激素对宫颈粘液白细胞介素1β水平的影响

卵巢中白细胞介素1β(IL-1β)可能参与卵泡发育、卵子成熟、排卵等生殖过程,同时IL-1β的活性也受到甾体激素、促性腺激素的调节。本文通过对体外授精胚胎移植(IVF-ET)周期和正常月经周期宫颈粘液中IL-1β水平的比较,来探讨促性腺激素对IL-1β的调节作用。     

促性腺激素释放素拮抗剂联合人重组促黄体激素对卵巢功能减退患者妊娠结局的影响

目的:研究重组人促黄体激素(r-hLH)在促性腺激素释放素(GnRH)拮抗剂促排卵方案中的应用指征?方法:回顾性分析2007年8月至2010年8月在本中心以GnRH拮抗剂方案促排卵的体外受精(IVF/ICSI)患者?卵巢功能减退纳入标准为卵泡刺激数(FSH)≥10U/L或窦卵泡数≤6个?研究分为两部分,第一部分纳入卵巢功能减退患者共107例,A组不添加r-hLH(n = 80),B组添加r-hLH 75 U/d(n = 27)?第二部分纳入应用GnRH拮抗剂+r-hLH+GnRH激动剂扳机的患者共71例并分为两组,C组为卵巢功能正常组(n = 47),D组为卵巢功能减退组(n = 24)?评价两组卵巢反应和妊娠结局的临床指标包括成熟卵子数?受精率?卵裂率?优质胚胎率?种植率和临床妊娠率?结果:①卵巢功能减退患者中,添加r-hLH组每优势卵泡平均雌激素水平?IVF成熟卵子数(100.00% vs 96.31%)显著高于对照组,种植率(29.41% vs 19.46%)和临床妊娠率(44.44% vs 31.25%)均高于对照组,但差异无显著性?②添加了r-hLH的患者中,卵巢功能减退组IVF成熟卵子数(100.00% vs 93.71%)?IVF受精率(79.52% vs 38.46%)和ICSI受精率(84.85% vs 42.74%)显著高于卵巢功能正常组,种植率(28.89% vs 17.44%)?临床妊娠率(41.67% vs 25.53%)均高于卵巢功能正常组,但差异无显著性?结论:在GnRH拮抗剂方案中,添加r-hLH可以改善卵巢反应减退患者的卵巢反应和临床结局?卵巢功能正常者不是添加r-hLH的适应人群?     

sIL-1RⅡ对IL-1α诱导子宫内膜异位症在位内膜基质细胞表达IL-8的影响

目的:探讨可溶性IL-1Ⅱ型受体(sIL-1RⅡ)对人白细胞介素1α(IL-1a)诱导子宫内膜异位症(EMs)在位内膜基质细胞(ESC)表达白细胞介素8(IL-8)的影响.方法:体外培养EMs在位内膜基质细胞,分别以含不同浓度IL-1α(0、0.1、1.0、10、100 ng/ml)的DMEM/F12培养基孵育24h,利用RT-PCR和ELISA法从转录和蛋白翻译水平分别检测IL-8的表达情况.选取能显著刺激IL-8升高的IL-1α浓度,作用于EMs在位内膜基质细胞不同时间,RT-PCR和ELISA法检测IL-8的表达情况.并检测1.0μg/ml的sIL-1RⅡ对不同浓度IL-1α诱导EMs在位内膜基质细胞表达IL-8的影响.结果:未刺激时,EMs在位内膜基质细胞能表达低水平IL-8,经IL-1α刺激后IL-8 mRNA及蛋白表达均升高,并呈剂量和时间依赖性,差异有统计学意义(P＜0.01).1.0μg/ml sIL-1RⅡ能拮抗低浓度IL-1α的刺激效应.结论:IL-1α能以时间剂量依赖方式刺激EMs在位内膜基质细胞表达IL-8,促进EMs的发生发展,sIL-1RⅡ能一定程度拮抗此作用,为EMs的生物治疗提供了理论基础.     

体外受精和胚胎移植促超排卵降调节方案的比较

目的 体外受精和胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）促排卵治疗中降调节长方案和短方案的比较。方法 临床资料分析、比较两组方案的促性腺激素使用量,刺激天数,成熟卵泡数,取卵数,受精率、卵裂率和优质卵泡率。结果 两组降调节方案在使用促性腺激素量和卵巢过度刺激综合征发生上有显著性差异,其余无显著性差异。结论 降调节长方案比短方案的促性腺激素使用量多,刺激周期略长,卵泡数略多,较易发生卵巢过度刺激综合征,在选择时应考     

体外受精-胚胎移植周期中注射人绒毛膜促性腺激素日患者血清孕酮水平与妊娠结局的相关性

目的 探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)日患者血清孕酮水平与临床妊娠结局的相关性.方法 对2002年3月-2007年4月在南京医科大学第一附属医院生殖医学科注射hCG日有血清孕酮水平检测结果的786个IVF周期进行回顾性分析.每个周期均采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节,采用促性腺激素(Gn)促排卵.将孕酮水平为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5和9.0 nmol/L设定为不同界值,孕酮水平<相应界值者为低孕酮水平,≥相应界值者为高孕酮水平,分别比较采用不同界值时高、低孕酮水平患者的各项实验室及临床检测指标.结果 786个周期中,采用不同的孕酮水平界值时,注射hCG日高孕酮水平与低孕酮水平患者的正常受精率、优质胚胎率、种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、活产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);以8.5及9.0 nmol/L为孕酮水平界值时,高孕酮水平患者的早期流产率分别为27.3%(3/11)和3/7,均高于低孕酮水平者[分别为8.8%(26/297)和8.6%(26/301)],差异均有统计学意义(P<0.05);以9.0 nmol/L为孕酮水平界值时,高孕酮水平患者的总流产率为3/7,高于低孕酮水平者[11.0%(34/301)],差异也有统计学意义(P<0.05).结论 注射hCG日血清孕酮水平与临床妊娠率及活产率无关,当以8.5或9.0 nmol/L为孕酮水平界值时,早期流产率或总流产率与高孕酮水平相关.     

应用孕妇血浆DNA检测胎儿性别的研究

目的探讨应用孕妇血浆中游离DNA进行无创性产前性别诊断的可行性。方法用柱分离法提取26例孕妇血浆中DNA,用巢式PCR技术检测其胎儿性别决定基因（SRY）基因。结果26位孕妇中14例孕男胎的孕妇有12例显示阳性条带,12例孕女胎的孕妇2例有阳性条带,总的准确率为84．6％。结论采用孕妇血浆胎儿DNA和巢式PCR技术可以快速简便地进行无创性产前性别诊断,对性连锁遗传病的预防具有重要意义。