反复上呼吸道感染与婴幼儿饮食结构的相关性研究

目的探讨婴幼儿饮食结构与反复上呼吸道感染的关系。方法对270例足月正常产并反复上呼吸道感染患儿进行问卷调查(病例组),选择同期于本院体检的健康儿童270例作为对照组。采集两组研究对象出生、抚育、生长发育及既往病史等基本信息,分析饮食结构与反复上呼吸道感染的关系,对饮食结构中影响反复上呼吸道感染的多因素进行Logistic回归分析,比较两组研究对象血清微量元素、免疫球蛋白(Ig)及T细胞亚群水平。结果 Logistic回归分析表明,未按时添加维生素A+D、肉类蛋白类、蔬菜水果类及喜甜食、经常饮用煲汤是反复上呼吸道感染的危险因素。病例组患儿血清维生素D3、锌、铁、铜、镁、Ig G、Ig A、Ig M、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于对照组,CD8+水平明显高于对照组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论婴幼儿不良饮食习惯与反复上呼吸道感染发作密切相关,合理的饮食结构和指导在预防和治疗小儿反复上呼吸道感染的发生发展中具有重要作用。     

人神经干细胞移植治疗重度视觉障碍脑瘫患儿的临床观察

目的观察人神经干细胞(NSCs)移植治疗脑性瘫痪(CP)合并重度视觉障碍患儿的临床疗效。方法取孕11周正常发育人胚胎前脑细胞,经体外培养扩增为人神经干细胞球,并经前囟穿刺注入7例严重视觉障碍CP患儿的脑室。结果移植后,4例患儿在很短时间即出现视觉功能改善,伴有闪光视觉诱发电位、功能核磁的改变。结论人NSCs移植对部分重度视觉障碍脑瘫患儿有治疗作用。     

非血缘脐血干细胞移植治疗恶性婴儿型石骨症1例报道

恶性婴儿型石骨症（osteopetrosis，OP）是一种因破骨细胞功能障碍导致成骨发育障碍性疾病，表现为骨质硬脆，易骨折。随着病情进展，颅骨骨质重造异常，颅神经受压可致听力和视觉下降，甚至出现脑积水，多在早期夭折。异基因造血干细胞移植是唯一治疗此病的措施。我们于2006年1月为1例OP患儿进行了非血缘脐血干细胞移植（CBT）治疗，     

阻断子宫血流复制围生期缺氧缺血性脑损伤动物模型

目的 探讨制作围生期缺氧缺血性脑损伤（HIBD）动物模型的方法，为进一步研究其防治规律提供条件。方法 用自制的血管阻断带阻断临产SD孕鼠双侧子宫动脉，观察不同阻断时间后出生的乳鼠的死亡率，生长发育状况及脑部病理改变。结果 随着血供阻断时间的延长，胎鼠死亡率明显增加，实验组乳鼠体重增长缓慢，运动发育落后，其脑部病理改变与人类HIBD相似。结论 通过阻断乳鼠双侧子宫动脉可成功复制出HIBD动物模型。     

大鼠胰腺间质细胞体外培养过程及其形态学特征

目的:对胰腺间质细胞进行原代及传代培养,观察其形态学的变化。以探索一种简单稳定的获取及培养胰腺间质细胞的方法。方法:用机械剪切加胰蛋白酶消化的方法制备SD大鼠胰腺单细胞悬液,取新生SD大鼠1只麻醉断髓处死,体积分数0.75的乙醇浸泡消毒,无菌条件下取出胰腺组织,去除红细胞,剪切,加入胰蛋白酶消化,消化终止后细胞筛过滤,收集滤过的细胞悬液离心,弃上清液,重复1次。收集获得的单个胰腺间质细胞。接种于含体积分数0.1的胎牛血清、0.05g/L的亚胺培南的DMEM/F-12(1∶1)培养基,培养48h后换液,弃上清及悬浮细胞,继续培养48h后,换用含1×10-5mol/L阿糖胞苷的完全培养基培养24h,再换正常培养基继续培养,在培养细胞达到80%～90%的细胞汇合时,按1∶3进行传代培养。测定细胞生长曲线及贴壁率,原代细胞及传代细胞用双硫腙染色,鉴定有无胰腺β细胞。结果:①原代细胞及传代细胞形态学观察:原代培养换液前,显微镜下可见细胞大小不等,悬浮,有较多细胞碎片。48h首次全量换液后,悬浮细胞减少,经3次换液可基本去除。加用阿糖胞苷培养24h,大量细胞相继死亡。至第10-14天,培养细胞明显增加,基本铺满瓶底,以星形、梭形为主,细胞呈放射状或漩涡状生长,部分区域呈灶状。传至第5代细胞出现老化。②细胞生长曲线:细胞从传代后第2天,数量即开始增加,第4天增加幅度最大,至第6天细胞数量最大,以后数量略有下降。传代培养对数增殖期为2-4d,对数增殖期结束后,第6天细胞生长缓慢,进入平台期。③细胞的贴壁率:传代细胞培养2h已有部分细胞贴壁;培养4h贴壁细胞接近50%;培养10h贴壁达79%;培养12h细胞全部贴壁,而且部分细胞开始分裂增殖,细胞形态与原代细胞基本相似。④胰腺β细胞的化学鉴定:对胰腺组织分离所得单个细胞、原代培养细胞及传代培养细胞分别用双硫腙染色。培养前细胞染色,可见少量腥红色细胞,随着培养时间延长腥红色细胞逐渐减少,在原代培养10～14d,腥红色细胞消失,传代培养细胞染色未见腥红色细胞。结论:细胞培养12h全部贴壁,传代培养对数增殖期为2-4d,第6天细胞进入平台期。原代培养胰腺间质细胞形态多样,主要呈梭形,少数呈三角形或星形,贴壁爬行生长,第1周增殖较慢,随后增殖加速,细胞团块多见,偶可见大的圆形细胞生长,核大,胞浆内颗粒多。传代培养,细胞能迅速贴壁生长,细胞形态逐渐均一,主要为梭形、三角形细胞,呈集落样生长,双硫腙染色阴性;但细胞培养至第5代,胞浆颗粒增多,细胞增殖减慢,大部分细胞逐渐老化死亡。     

大鼠胰腺间质细胞体外培养过程及其形态学特征

目的：对胰腺间质细胞进行原代及传代培养，观察其形态学的变化。以探索一种简单稳定的获取及培养胰腺间质细胞的方法。方法：用机械剪切加胰蛋白酶消化的方法制备SD大鼠胰腺单细胞悬液，取新生SD大鼠1只麻醉断髓处死，体积分数0．75的乙醇浸泡消毒，无菌条件下取出胰腺组织，去除红细胞，剪切，加入胰蛋白酶消化，消化终止后细胞筛过滤，收集滤过的细胞悬液离心，弃上清液，重复1次。收集获得的单个胰腺间质细胞。接种丁含体积分数0．1的胎牛血清、0．05g/L的砸胺培南的DMEM／F—12（1：1）培养基，培养48h后换液，弃上清及悬浮细胞，继续培养48h后，换用含1&;#215;10^-5mol／L阿糖胞苷的完全培养基培养24h，再换正常培养基继续培养，在培养细胞达到80％～90％的细胞汇合时，按1：3进行传代培养。测定细胞生长曲线及贴壁率，原代细胞及传代细胞用双硫腙染色，鉴定有无胰腺β细胞。结果：①原代细胞及传代细胞形态学观察：原代培养换液前，显微镜下可见细胞大小不等，悬浮，有较多细胞碎片。48h首次全量换液后，悬浮细胞减少，经3次换液可基本去除。加用阿糖胞苷培养24h，大量细胞相继死亡。至第10—14天，培养细胞明显增加，基本铺满瓶底，以星形、梭形为主，细胞呈放射状或漩涡状生长，部分区域呈灶状。传至第5代细胞出现老化。②细胞生长曲线：细胞从传代后第2天，数量即开始增加，第4天增加幅度最大，至第6天细胞数茸最大，以后数量略有下降。传代培养对数增殖期为2—4d，对数增殖期结束后，第6天细胞生长缓慢，进入平台期。③细胞的贴壁率：传代细胞培养2h已有部分细胞贴壁；培养4h贴壁细胞接近50％；培养10h贴壁达79％；培养12h细胞全部贴壁，而且部分细胞开始分裂增殖，细胞形态与原代细胞基本相似。④胰腺β细胞的化学鉴定：对胰腺组织分离所得单个细胞、原代培养细胞及传代培养细胞分别用双硫腙染色，培养前细胞染色，可见少量腥红色细胞，随着培养时间延长腥红色细胞逐渐减少，在原代培养10～14d，腥红色细胞消失，传代培养细胞染色未见腥红色细胞。结论：细胞培养12h全部贴壁，传代培养对数增殖期为2—4d，第6天细胞进入平台期。原代培养胰腺间质细胞形态多样，主要呈梭形，少数呈三角形或星形，贴壁爬行生长，第1周增殖较慢，随后增殖加速，细胞团块多见，偶可见大的圆形细胞生长，核大，胞浆内颗粒多。传代培养，细胞能迅速贴壁生长，细胞形态逐渐均一，主要为梭形、三角形细胞，呈集落样生长，双硫腙染色阴性；但细胞培养至第5代，胞浆颗粒增多，细胞增殖减慢，大部分细胞逐渐老化死亡。     

人神经前体细胞移植治疗重度脑瘫患儿疗效观察

目的：观察人神经前体细胞（human neural progenitor cells, hNPCs）移植治疗重度脑性瘫痪（cerebral palsy, CP）患儿的临床疗效。方法：45例重度CP患儿自愿接受hNPCs移植治疗。取孕10~12周人胚胎脑细胞,经体外培养扩增为人神经干细胞球,在超声引导下经侧脑室穿刺注入患儿脑室。49例接受常规康复治疗的重度CP患儿作为对照组。结果：移植后疗效最早出现的1例患儿于术后3 d睡眠、激惹、肌张力明显改善,大部分患儿于术后1个月出现明显改善,3~6个月疗效逐渐减缓。移植组患儿术后1年粗大运动、精细动作及认知发育水平均明显优于对照组。移植治疗后无1例患儿出现危及生命或导致患儿生活质量较术前下降的并发症,移植5年以上随访未见肿瘤发生。结论：hNPCs移植治疗重度CP是一种新的、安全有效的方法,值得进一步研究探索。     

重症脑瘫240例临床分析

目的 通过对住院康复治疗240例重症脑瘫(cerebral palsy,CP)患儿临床特点进行分析,提高对重症CP的认识,并尽早防治。 方法 对资料完善的240例重症CP患儿围产史、生长发育史、症状、体征、影像学检查、电生理学检查、粗大运动功能评估量表和Peabody精细运动量表评估检查,进行回顾性研究分析。结果 240例CP患儿中痉挛型103例(42.9%),不随意运动型81例(33.8%),混合型49例(20.4%),肌张力低下型7例(2.9%),粗大运动功能分级均在Ⅳ级以上;主要高危致病因素为早产(37.9%),宫内缺氧(20.4%),病理性黄疸(15.8%);90%患儿合并智力低下,44%患儿合并视觉障碍,8.3%合并听觉障碍,27.1%存在症状性癫痫,42.9%患儿因吞咽功能障碍导致营养不良;其大脑形态学损伤以白质容积减少,髓鞘化延迟,脑室周围白质软化,多发性脑软化,脑发育不良,基底节病变为主。 结论重症CP致病因素复杂多样,运动功能严重受限,多伴有一种甚至多种并发障碍,认识这些疾病的高危因素和并发症的损害,有利于更好地防治重症CP。     

人神经干细胞移植治疗重度新生儿一氧化碳中毒一例

目的探讨人神经干细胞移植治疗新生儿重度一氧化碳中毒(COP)的可行性。方法1例生后18d的新生儿重度COP急性期患儿,肌张力异常,原始反射减弱,NBNA评分15分。取孕12周胚胎前脑细胞体外培养扩增11d,获取人神经干细胞(NSCs)球,经患儿脑室穿刺注入。结果移植后28d,患儿肌张力、原始反射明显改善,NBNA评分35分。移植后9个月Peabody量表,0～6岁儿童神经心理检查量表评估,患儿运动、智力、语言发育正常。结论本例人胚胎来源NSCs移植治疗急性期新生儿重度COP,临床疗效显著。最终的疗效还需更多病例的进一步观察。     

佩-梅病3例报告

<正>1临床资料病例1,男,11个月,因"智力、运动发育落后9个月伴惊厥发作"入院。围产期无明显异常。有1姐姐,体健,家族无类似病史。入院时不能竖头,不会翻身,不能独坐,手不能握物,能认识亲人,能逗笑,不会发声。生后1/2个月出现惊厥发作,服用丙戊酸钠、苯巴比妥后惊厥控制。体检:头围45.5 cm,视物追踪可,无眼球震颤,