β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗治疗小鼠肝癌免疫机制研究

目的观察β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗对小鼠肝癌的治疗作用,探讨β-榄香烯抗肿瘤的免疫机制。方法制备Balb/c小鼠脾脏来源的DC并鉴定其表型,以Balb/c小鼠来源的肝癌细胞株BNL1MEA.7R.1(简称BNL)为靶细胞,募集富含肿瘤"信息"的抗原载体—自噬小体,制备DC/DRibble疫苗。预先免疫小鼠,分设对照组、β-榄香烯组、疫苗组、联合组,对照组皮下、腹腔注射PBS,β-榄香烯组和联合组连续7天腹腔注射β-榄香烯50mg/(kg·d),疫苗组和联合组分别在第1天淋巴结注射疫苗,第3、5天皮下注射疫苗,第10天处死小鼠,无菌获得小鼠脾脏,制备悬液,分设不加刺激和Dribble刺激组,孵育72h,ELISA法检测上清中IFN-γ的含量。另外给予联合组小鼠脾细胞不同刺激,分设对照组、DRibble组、DC组、疫苗组,孵育72h,ELISA法检测上清中IFN-γ的含量。建立小鼠肝癌荷瘤模型,分为对照组、β-榄香烯组、疫苗组、联合组,治疗方式同上免疫方式,观察各组小鼠的肿瘤大小及生存期,第23天处死小鼠,剥取肿瘤组织经HE染色,光学显微镜观察肿瘤组织病理形态学表现。结果体外检测发现不同方式免疫后小鼠中,联合组IFN-γ分泌量明显高于其他组(P<0.01),β-榄香烯组、疫苗组高于对照组(P<0.01);给予免疫后小鼠脾细胞不同刺激,发现疫苗组、Dribble组均能刺激脾细胞分泌大量IFN-γ(P<0.01),当β-榄香烯刺激浓度10μg/mL时,IFN-γ分泌明显增多(P<0.01);体内观察发现联合组小鼠肿瘤生长速度明显减慢,瘤表面积、生存期与其他组相比均有统计学差异(P<0.01),肿瘤组织HE染色可见周围结缔组织包裹紧密完整,大量炎性细胞浸润。结论β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗能够诱导特异性免疫细胞分泌细胞因子功能增强,从而发挥抗肿瘤作用,其免疫效应基础可能与增强DC抗原递呈功能有关。     

健脾消癥方诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用研究

目的:探讨健脾消癥方对肝癌细胞HepG2凋亡的影响及机制。方法:MTT法观察健脾消癥方对肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721增殖的影响,Hochest 33342染色、透射电镜观察健脾消癥方对HepG2细胞超微结构的改变作用,DCFH-DA探针法观察健脾消癥方对HepG2活性氧水平的影响,Western blot检测健脾消癥方对HepG2的凋亡相关半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9表达的影响。结果:健脾消癥方作用HepG2 48h后,细胞形态及超微结构出现典型的凋亡特点,细胞内活性氧浓度升高,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达上调。结论:健脾消癥方对HepG2有较好的诱导凋亡的作用,其作用机制可能与其增加细胞活性氧(ROS)水平及下调Caspase-3、Caspase-9蛋白有关。     

清肠化湿方对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织PPAR-γ,NF-κB及MUC2,TFF3的影响

目的:观察清肠化湿方对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗效果,以过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和核因子(NF)-κB为中心探讨其作用机制。方法:将雄性Wistar大鼠80只,随机分为8组,分别为正常组灌胃(ig)生理盐水2 m L·d-1],模型组(ig生理盐水2 m L·d-1),清肠化湿方低、中、高剂量组(ig清肠化湿方8,16,32 g·kg-1),柳氮磺胺吡啶(SASP)组(ig SASP 0.67 g·kg-1),SASP+双酚A-二甘氨酸醚(BADGE)组(ig SASP 0.67 g·kg-1+腹腔注射BADGE 20 mg·kg-1)及清肠化湿方中剂量+BADGE组(ig清肠化湿方16 g·kg-1+腹腔注射BADGE 20 mg·kg-1),每组10只。除正常组以生理盐水灌肠外,其余组采用TNBS/乙醇灌肠造UC大鼠模型。以柳氮磺胺吡啶(SASP)为阳性药物,同时联合使用PPAR-γ抑制剂双酚A-二甘氨酸醚(BADGE),观察大鼠疾病活动指数及结肠病理评分,蛋白质免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法分别检测大鼠结肠组织中PPAR-γ,NF-κB的蛋白和基因表达酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肠组织分泌蛋白黏蛋白2(MUC2)和三叶因子3(TFF3)的表达情况。结果:模型组大鼠结肠出现明显炎症和溃疡,提示造模成功。模型组PPAR-γ蛋白和基因表达较正常组显著降低(P0.01);与模型组比较,清肠化湿方组和SASP组PPAR-γ表达均有所增加(P0.05);联用PPAR-γ抑制剂BADGE后两组PPAR-γ表达又显著降低(P0.05)。同时,模型组NF-κB的蛋白和基因表达显著升高(P0.01),清肠化湿方各剂量组均能降低NF-κB的表达(P0.05),而清肠化湿方中剂量+BADGE组较清肠化湿方中剂量组NF-κB的表达又显著增高(P0.05)。此外,清肠化湿方组和SASP组能有效升高大鼠肠组织中MUC2和TFF3的表达,而当清肠化湿方或SASP联合使用BADGE时这一作用被减弱。结论:清肠化湿方能有效改善溃疡性结肠炎大鼠的病变程度,其作用机制与抑制NF-κB的激活,减轻炎症反应,并通过促进肠道黏膜MUC2与TFF3的分泌修复肠粘膜屏障有关,而这些作用可能主要是通过激活PPAR-γ信号通路完成的。     

医院改革背景下新建医院建立护理层级架构的探讨

对国内外护理层级架构的设置进行分析,探讨在医院改革背景下新建医院护理层级架构的设置方法,并对设置时应考虑的问题进行剖析,为下一步公立医院改革及新建医院的护理层级架构设置提供借鉴。     

控制初次献血不合格比例及保留低危献血者再次献血

随着无偿献血宣传力度加大,咸阳地区无偿献血工作取得了突破性的进展,自2005年起,本地区临床用血已100%来自自愿无偿献血.为了减少这些爱心资源的浪费,将血液报废率降到最低,我站采取了控制初次献血不合格比例及保留低危献血者再次献血措施,取得了很好的效果,报告如下.     

咸阳市无偿献血者血液检测结果分析

为了解咸阳地区无偿献血者血液检测阳性结果的分布特征,以便从低危人群中建立一支重复、固定的无偿献血者队伍,保证血液采集充足与安全,减少资源浪费,我们对咸阳地区2008年7月1日-2009年6月30日的41 294人次无偿献血者血液检测结果进行了分析,现报道如下.     

乳腺癌保乳手术即刻自体整形美容效果分析

目的对176例Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌患者行保乳手术,分析影响美容效果的因素。方法回顾性研究11年来我院保乳手术患者的临床资料,对肿瘤位置、切口、切除范围、术中即刻自体整形与术后乳房美容效果进行分析。结果170例患者得到随访,时间3-60个月,采用Harrrs四等分类法为美容评定标准,符合优良标准155例,占91.2%;一般10例,占5.9%;差5例,占2.9%。结论确保切缘阴性的前提下,不必过大范围切除腺体,术中即刻做自体整形,美容效果满意。     

全身化疗联合局部热疗治疗晚期胃癌的疗效观察

目的:研究FOLFOX4方案联合射频热疗治疗晚期胃癌的疗效和不良反应.方法:33例患者接受FOLFOX4方案化疗的同时给以热疗.L-OHP(85-100)mg/m2,静脉滴入2h, d1;CF 200mg/m2静脉滴入2h, d1、d2;氟尿嘧啶(5-FU) 400 mg/m2,静脉推注d1、d2,600 mg/m2持续静滴22h,d1、d2;每2周重复, 28天为1周期.热疗每周2次,每次60分钟.3个周期化疗后评价疗效.结果:33例患者 CR 4例(12.1 %) 、PR 13例( 39.4 %) , 有效率(CR+PR)51.5%.不良反应主要为胃肠反应、骨髓抑制和感觉神经毒性.结论: FOLFOX4方案化疗联合热疗应用于晚期胃癌疗效肯定,不良反应能耐受.     

血栓调节蛋白与糖尿病肾病关系的研究

 目的观察2型糖尿病(Diabetes mellitus DM)患者血浆血栓调节蛋白(Thrombomodulin TM)在糖尿病肾病(Diabetic nephropathy DN)各期的水平,探讨其在DN发生、发展中的作用.方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测81例2型DM患者血浆TM的水平;用放免法测定尿白蛋白(uAlb)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、TH糖蛋白(THP)的排泄率,并与30例正常对照组进行比较.结果(1)DM组血浆TM水平明显高于正常对照组,在正常白蛋白尿组即出现TM水平增加(P＜0.05),随着尿白蛋白排泄率(UAE)的增加,血浆TM水平递增.(2)血浆TM水平与UAE、α1-MG、β2-MG呈正相关,与THP呈负相关.结论(1)血浆TM水平是早期诊断DN较敏感的指标,并能反映DN的发生和发展.(2)血浆TM与UAE、α1-MG、β2-MG、THP的联合检测有助于早期诊断DN.     

老年肺功能不全肺癌患者的外科治疗(附25例分析)

我科自 1985～ 1999年对老年肺癌合并肺功能低下的患者行手术治疗 ,取得了较好疗效 ,现报告如下。资料 :本组共 2 5例 ,男 18例 ,女 7例 ,年龄 62岁～ 78岁 ,大于 65岁者 2 1例 ,平均 66.9岁。术前诊断为中心型肺癌 19例 (术后病理证实鳞癌 16例 ,腺癌 2例 ,未分化小细胞癌 1例 ) ,周围型肺癌 6例 (腺癌 4例 ,鳞癌 2例 )。全组病人均符合 :最大通气量 (ＭＶＶ) <5 0 % ,第一秒最大呼气量 (ＦＥＶ1% ) <80 % ,肺活量 (ＶＣ)占预计值 % <70 % ,动脉血氧分压 (ＰａＯ2 ) <10 .6ｋＰａ(80ｍｍＨｇ)为呼吸功能低下诊断标准。术前呼吸功能测定。其…