半夏醇提取液逆转多药耐药细胞系K562/A02的耐药性

目的:观察非细胞毒性浓度(抑制率≤5％)半夏醇提取液对耐阿霉素的人白血病细胞系K562/A02多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制.方法:将细胞悬液接种于72孔培养板中,细胞数为2 ×108个/L,半夏醇提取液(2.5,5,10,20,40μg·L-1)处理K562/A02细胞72 h后,采用MTT法测定半夏醇提取液的细胞毒性及其对K562/A02细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测非细胞毒性浓度的半夏醇提取液处理后K562/A02细胞膜表面糖蛋白p170表达的变化与细胞内柔红霉素的浓度,应用SPSS 16.0软件包对实验结果进行统计学处理.结果:半夏醇提取液对K562/A02细胞有一定的细胞毒作用,其非细胞毒性质量浓度为6.5 μg·L-1,非细胞毒性浓度半夏醇提取液可显著降低阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度( IC50),使K562/A02细胞的IC50由原来的(30.9±0.11) μg·L-1降低至(10.1±0.21) μg·L-1,其逆转倍数为3.06倍;半夏醇提取液作用于K562/A02细胞后,细胞膜糖蛋白p170的表达从91.21％下调至45.12％ (P ＜0.01);柔红霉素外渗试验显示,半夏醇提取液作用于K562/A02细胞后,可使细胞内化疗药物的浓度明显增加.结论:半夏醇提取液可部分逆转多药耐药细胞系K562/A02细胞对阿霉素的耐药性,半夏醇提取液逆转白血病细胞耐药性是通过下调了白血病细胞膜糖蛋白p170的表达,使其将化疗药物泵出细胞外的功能受到了抑制,从而使化疗药物在白血病细胞内能达到有效浓度,从而可以杀灭耐药的白血病细胞系.     

RNA干扰沉默cyclin D1基因表达对乳腺癌细胞迁移和侵袭力的影响

 目的 利用RNA干扰技术下调cyclin D1基因表达,探讨其对乳腺癌细胞体外侵袭和迁移能力的影响,了解cyclin D1在肿瘤细胞转移的作用.方法 设计cyclin D1基因的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段siRNA51和siRNA52,脂质体介导转染入乳腺癌MDA-MB-231细胞株.应用Western印迹法检测转染前后cyclin D1表达水平;通过单层细胞划痕实验观察细胞转染前后迁移能力的变化,Transwell侵袭实验检测细胞体外侵袭力.结果 乳腺癌MDA-MB-231细胞株转染cyclin D1的siRNA后,cyclin D1蛋白水平明显下调,细胞的迁移及侵袭能力明显减弱.结论 利用RNA干扰技术能够特异阻断cyclin D1基因表达;cyclin D1基因表达下调能够明显抑制乳腺癌细胞的迁移及侵袭能力.     

趋化因子受体CXCR5在肺癌中的表达及其意义

目的：探讨肺癌原发灶中趋化因子受体CXCR5的表达特点及与其临床病理的关系。方法：对79例肺癌手术切除标本组织采用免疫组化法检测CXCR5表达。结果：CXCR5在肺腺癌组织100％（46／46）中呈阳性表达,33例肺鳞癌中仅1例表达（3．0％）。CXCR5的表达与肺癌患者的性别、年龄、肿瘤大小无关（P〉0．05）,而与肺癌患者的组织学类型密切相关（P〈0．01）。结论：CXCR5表达与组织学类型密切相关。CX-CR5在肺腺癌选择性的表达值得进一步进行相关研究。     

转染肿瘤坏死因子α及其突变体基因对H22肿瘤细胞体内致瘤能力的影响

目的:比较转染野生型TNF-(Wt-TNF)及多种突变体,包括分泌型TNF-α突变体(S-TNF^m)、跨膜型TNF-α突变体(TM-TNF^m)基因后,H2 2细胞体内致瘤能力,并探讨其可能的机制。方法:将表达TNF-α及其突变体的H22细胞分别与未转染基因的H22细胞以不同比例混合,2.5× 10⁵(10 0 μL)接种于小鼠体内,观察肿瘤的生长情况;并用免疫组化检测肿瘤局部淋巴细胞浸润和肿瘤细胞表达Fas和CD44V。结果:转染TNF-α及其突变体基因的肿瘤细胞的致瘤能力均明显减弱(P <0.0 1);除二型TNF对瘤细胞的胞毒效应外,TM-TNF^m 可诱导肿瘤细胞表达死亡受体Fas,而S-TNF^m 则可明显促进肿瘤灶局部淋巴细胞的浸润(P <0.01)。此外,注射H2 2/S-TNF^m细胞,小鼠出现一过性体重下降。结论:转染TM-TNF^m 和S-TNF^m 基因肿瘤细胞的致瘤能力明显降低,其原因除与二者胞毒效应有关外,前者可能通过Fas途径导致瘤细胞凋亡,后者则可能通过募集和激活淋巴细胞发挥抗瘤作用.     

稳定高效表达TNF—α基因及其突变体的H22肿瘤细胞株的建立

目的 建立转染3种TNF－α基因（分泌型TNF－α突变体、跨膜型TNF－α突变体和野生型TNF－α的H22细胞株,以比较不同类型TNF－α的杀瘤效应。方法 采用逆转录病毒载体,将3种TNF－α基因导入小鼠H22肿瘤细胞中,用Southern印迹、RT－PCR、流式细胞术和生物学活性检测等方法,从基因的整合、RNA转录、蛋白的表达及其生物学活性4个方面,对转染细胞进行检测鉴定。结果 3种TNF－α基因匀在H22名得到有效表达,并具有生物学活性。结论 获得3种稳定高效表达TNF－α的H22肿瘤细胞株,为进一步研究跨膜型和分泌型TNF－α体内的抑瘤效应建立了良好的实验模型。     

上海世博会园区内伤害流行病学特征分析

[目的]了解中国2010年上海世博会（简称“上海世博会”）园区内伤害流行病学特征。[方法]利用“中国2010年上海世界博览会园区内就诊异常情况监测和报告系统”（后称“就诊监测报告系统”）,观察上海世博会园区内伤害病例,对其伤害原因、伤害性质等流行病学特征进行调查分析。[结果]从2010年5月1日至10月31日,伤害监测系统共收集12505例伤害病例。5月份游客伤害发生率最高（月均3．01／万）,在世博局采取健康宣教以及改善园区内设施等一系列干预措施后,游客伤害发生率逐步下降,从5月初的4．50／万降低到最后一周的0．80／万。伤害分别是≥65岁和0～14岁游客的第1和第3位就诊原因。游客的主要伤害原因是跌倒和坠落。但是园区内最主要的伤害性质是挫伤和擦伤。[结论]上海世博会园区内伤害发生特征表明,在大型活动中,及时进行健康干预能有效地降低伤害的发生。     

毫火针排针浅刺放血法治疗顽固性带状疱疹后遗神经痛验案2则

带状疱疹后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)是指带状疱疹皮损愈合后遗留的神经病理性疼痛.其疼痛持久而强烈,严重影响患者的生活质量.目前西医学针对PHN的治疗药物主要包括抗惊厥药、抗抑郁药、阿片类药物和局部疗法(利多卡因贴剂、辣椒素贴剂),当药物治疗无效和效果欠佳时,神经阻滞与神经调节或可作为PHN的治疗手段.但临床可见部分PHN患者,经上述多种方法治疗后,疼痛仍未能有效缓解,发展为顽固性PHN.笔者老师郭玉峰教授近20年来采用毫火针排针浅刺法治疗PHN,疗效显著,兹录验案2则,整理如下.     

胰升血糖素样肽-1类似物与甘精胰岛素治疗2型糖尿病患者疗效及安全性的Meta分析

目的评价胰升血糖素样肽-1(GLP-1)类似物与甘精胰岛素对采用口服降糖药(OADs)治疗但血糖控制不佳的T2DM患者疗效及安全性。方法采用Medline、PubMed、Embase、The National Register、Cochrane、Current Controlled Trials、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、VIP、CNKI和万方数据库检索,查找符合标准的随机对照试验(RCTs)进行质量评价。结果最终纳入7篇RCTs,共2653例患者,其中,GLP-1类似物(包括艾塞那肽、利拉鲁肽)组1347例,甘精胰岛素组1306例。两组均可降低FPG、HbA1c水平,GLP-1类似物组降低HbA1c水平较甘精胰岛素组高,甘精胰岛素组降低FPG水平较GLP-1类似物组高(P<0.01)。GLP-1类似物组可降低体重,甘精胰岛素组可增加体重,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。GLP-1类似物组低血糖事件发生率较甘精胰岛素组降低43%。GLP-1类似物组胃肠道不良反应较甘精胰岛素组常见,多为恶心、呕吐,症状短暂、轻微。结论采用OADs治疗但血糖控制不佳的T2DM患者,GLP-1类似物和甘精胰岛素均可降低其FPG、HbA1c水平,但GLP-1类似物可降低体重,低血糖发生风险低,胃肠道不良反应较常见,症状短暂、轻微,是T2DM患者新的治疗选择。     

重组肿瘤坏死因子-α抗血清对大鼠实验性结肠炎的影响

目的 探讨灌胃给予肿瘤坏死因子-α(TNF-α)多克隆抗体对溃疡性结肠炎的作用。方法 以50mg／kg三硝基苯磺酸(TNBS)经肛门注入大鼠肠腔，复制大鼠溃疡性结肠炎模型；用兔抗人TNF-α多克隆抗体血清10mg／kg给大鼠灌胃，观察一氧化氮(N0)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性及TNF-α在大鼠溃疡性结肠炎组织中的表达。结果 抗TNF-α多克隆抗体治疗可明显减轻溃疡性结肠炎的病理改变，抑制局部结肠组织NO的产生、MPO活性以及TNF-α表达。结论 抗TNF-α血清通过中和TNF-α，可抑制溃疡性结肠炎结肠组织表达TNF-α及炎性介质的释放，从而减轻溃疡性结肠炎的病理损伤。