质粒载体介导CD基因对喉癌细胞的杀伤作用研究

目的构建含酵母菌自杀基因CD的质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV.CD,并利用该载体进行喉癌Hep-2细胞株转染研究,体外实验观察前体药物5-FC对稳定表达CD基因的喉癌Hep-2细胞株的杀伤作用.方法通过RT-PCR从酵母菌RNA内扩增出CD基因全长CDS序列,将其定向克隆到质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV中,重组体质粒经XhoI/HindⅢ双酶切鉴定,并对重组体中的CD基因片段进行序列分析,将鉴定好的阳性重组质粒pcDNA3.1(-)CMV.CD运用电穿孔法转入喉癌Hep-2细胞中.经300～600 μg/mlG418正筛选14 d和10 μg/ml前体药物5-FC负筛选,获得稳定表达CD基因的喉癌Hep-2细胞株,提取该细胞株细胞的总RNA,经RT-PCR鉴定CD基因的表达.MTT法观察不同浓度5-FC对稳定表达CD基因的喉癌Hep-2细胞及转染空白载体pcDNA3.1(-)CMV的对照组喉癌Hep-2细胞的杀伤作用.结果阳性重组质粒pcDNA3.1(-)CMV.CD经XhoI/HindⅢ双酶切后获得5353 bp的片段及496 bp的插入片段,DNA自动序列分析证明重组体质粒含完整的477 bp长的CD基因CDS序列.RT-PCR从转染细胞总RNA中扩出453 bp的预期片段.当添加不同浓度的5-FC时,表达CD基因的Hep-2细胞不同程度地被杀死,而对照组的细胞几乎未受到影响,两组细胞的相对生存率具有显著差异性(P<0.05).结论成功构建了质粒表达载体pcDNA3.1(-)CMV.CD,建立了稳定表达酵母菌CD基因的喉癌表达CD基因的Hep-2细胞株,表达CD基因的Hep-2细胞可以被5-FC杀死.     

三组新生儿的诱发性耳声发射的检测分析

目的　研究新生儿的畸变产物耳声发射 (DPOAE)和瞬态诱发耳声发射 (TEOAE)的特点 ,评价其在新生儿听力筛选中的作用。方法　应用Capella耳声发射分析仪对正常新生儿组、剖腹产儿组、新生儿监护病房组三组新生儿进行DPOAE、TEOAE检测。结果　得出正常新生儿的诱发性耳声发射 (EOAE)的正常参考值和正常新生儿的DPOAE图 ;三组新生儿EOAE筛查的通过率分别为 96.1% (12 3 / 12 8)、90 .8% (10 9/ 12 0 )、81.6% (93 /114 ) ,其中新生儿监护病房组的通过率与前两组比较有统计学意义 (P <0 .0 1) ;各组间DPOAE与TEOAE的筛查通过率差异均有统计学意义 (P <0 .0 1) ;正常新生儿与剖腹产儿的DPOAE的幅值和信噪比差异无统计学意义(P >0 .0 5)。结论　在病房内 (非隔音 )进行听力筛选时 ,可明显降低假阳性率 ;剖腹产因素对新生儿耳声发射未见影响 ;对高危新生儿进行听力筛选更有意义     

香菇多糖联合顺铂治疗恶性胸腔积液

目的：观察香菇多糖联合顺铂胸腔灌注与单用顺铂治疗恶性胸腔积液的有效性和安全性。方法：收治恶性胸腔积液患者７３例,香菇多糖联合顺铂组（Ａ组）３８例,单用顺铂组（Ｂ组）３５例。用一次性中心静脉导管行胸腔置管和闭式引流胸液,Ａ组胸腔给药：香菇多糖４ｍｇ＋生理盐水２０ｍｌ,顺铂４０ｍｇ／ｍ２＋生理盐水５０ｍｌ;Ｂ组胸腔给药：顺铂４０ｍｇ／ｍ２＋生理盐水５０ｍｌ。结果：Ａ组患者总有效率和生活质量改善率均优于Ｂ组（Ｐ＜０.０５）,两组毒副反应相近。结论：胸腔闭式引流后灌注香菇多糖联用顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效优于单用顺铂,且毒副反应轻微。     

言语障碍儿的诱发性耳声发射的检测分析(附31例报告)

目的　研究言语障碍儿 (speechdisorderchildren ,SDC)的诱发性耳声发射 (evokedotoacousticemis sion ,EOAE)的特征 ,评价其对SDC的听力诊断作用。方法　应用Capella耳声发射分析仪对 31例SDC进行畸变产物耳声发射 (distortionproductotoacousticemission ,DPOAE)和瞬态诱发耳声发射 (transientevokedotoacaustice mission ,TEOAE)检测 ,同时每例均进行听性脑干反应 (auditorybrainstemresponse ,ABR)、声导抗测试 ,以ABR检查结果为标准 ,评价EOAE的诊断价值。结果　SDC的EOAE的幅值、信噪比 (S/N ratio)、相关系数 (correlationcoffi cient,Corr)明显低于正常儿 (P <0 .0 1) ,扫描时间、叠加次数明显高于正常儿 (P <0 .0 1) ,其检出率明显低于正常儿 (P <0 .0 1)。以ABR为标准 ,DPOAE和TEOAE的灵敏度同为 95 .5 % ,特异度分别为 80 %和 6 0 % ,准确度分别为 95 .2 %和 93.5 %。结论　SDC的EOAE明显异常于正常儿 ,EOAE对SDC的听力诊断具有较高的应用价值 ,DPOAE的频率特异性对SDC的听力评估、助听器选配可能更有意义。     

吉西他滨联合奥沙利铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的观察吉西他滨（GEM）联合奥沙利铂（L—HOP）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效和不良反应。方法将76例晚期NSCLC患者随机分为两组,观察组39例采用GEM＋L—OHP治疗,对照组37例采用GEM＋顺铂（DDP）治疗,两组均治疗21d为一周期,治疗2个周期后评价疗效和不良反应。结果观察组和对照组总有效率分别为46．1％、43．2％,两组比较无统计学差异（P〉0．05）。两组主要不良反应均为骨髓抑制,表现为白细胞及血小板Ⅰ～Ⅱ度减少;但观察组消化道反应和肾毒性明显轻于对照组（P均〈0．05）。结论GEM联合L—OHP与GEM联合DDP治疗晚期NSCLC的疗效相似,但前者不良反应较轻,治疗耐受性好,是较理想的化疗方案。     

人缝隙连接蛋白30互作蛋白的筛选及初步鉴定

位进行初步鉴定.结果 共筛选到4个互作蛋白,即Keratin 16、Camk2b、Tubulin beta-3以及alpha-tubulin,Cx30与Keratin 16和Tubulin beta-3存在免疫共定位.结论 Keratin 16、Camk2b、Tubulin beta-3及alpha-tubulin是Cx30互作蛋白,可能在蛋白的组装,运输及控制缝隙连接通道开关等方面影响Cx30的功能.     

DFNA2遗传异质性的听力学证据

遗传性耳聋具有遗传异质性,即某种临床表型的遗传性耳聋可由几种不同的致病基因所致,其在听力学和耳科学方面的临床特征也表现出一定的异质性。DFNA2就是遗传性耳聋遗传异质性的一个代表性基     

应考生高考前失眠现象抽查

作者运用自编“高三毕业生睡眠情况调查表”，对宁波市区６所中学迎接高考的学生进行随机抽样调查，结果表明，失眠发生率为１８．０５％，男女性别无显著差异，重点中学与普通中学的学生失眠发生率有非常显著差异。产生失眠的原因主要由于高考复习紧张，担忧落榜，以往学习成功者失眠情况重。     

单纯性听骨链畸形的临床诊治探讨

摘要：目的探讨单纯性听骨链畸形的临床诊断与治疗。方法通过对2014年1月~2016年1月收治的6例单纯性听骨链畸形患者的临床资料进行分析,总结探讨其临床诊治。结果6例患者均表现为中度到中重度传导或混合性耳聋。手术探查发现6例患者中,砧骨长脚缺失1例,砧镫关节脱位1例,术中通过部分人工听骨（partial ossicular replacement prosthesis,PORP）进行听力重建;砧骨长脚、镫骨上结构缺失,而镫骨足板活动可1例,术中通过全人工听骨（total ossicular replacement prosthesis,TORP）进行听力重建;镫骨足板固定1例,术中通过镫骨足板开窗,人工镫骨（piston）进行听力重建;砧、镫骨畸形并面神经骑跨前庭窗表面1例,谈话后未行听力重建;砧、镫骨畸形1例,面神经骑跨前庭窗下方,术中行piston听力重建。听骨形态异常患者在术前通过中耳HRCT可初步判断,听骨关节脱位、镫骨固定则需在术中探查以明确诊断。结论准确的听力学检查是单纯性听骨链畸形诊断的第一道门槛,而耳乳突HRCT检查对诊断亦有重要作用,临床中对于难以解释的传导性耳聋必要时行鼓室探查术,避免漏诊。