通过凝胶电泳数字化图像分析蛋白含量的改进方法

本文提出利用凝胶电泳数字化图像技术，通过光密度方法测量蛋白含量的改进方法和修正公式。分析了凝胶电泳图像数字化过程中，照射光源强度、凝胶背景、摄像机等参量对蛋白含量计算结果的影响；并证明了用不同强度的光源照射或使用大小不同的摄像机光圈所获得的凝胶数字化图像，不影响测量结果。采用图像分析技术确定蛋白区带电泳边界和修正公式，测量了不同浓度的牛血清白蛋白、β－乳球蛋白的相对含量，结果显示：修正公式的计算结果与蛋白实际浓度的相关系数高于不考虑凝胶背景的公式的计算结果，且修正公式的计算结果与实际含量更趋近于正比关系     

TP73-AS1在肿瘤中的表达及调控作用

<正>随着高通量测序技术的发展,成千上万种长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)进入人们的视野。lncRNA是一类长度超过200个核苷酸并缺少开放阅读框的不具备蛋白质编码功能的RNA~([1-2])。研究发现lncRNA参与诸多生物学进程的关键步骤,包括染色质重塑、基因转录、转录后调节和蛋白质翻译等~([3-5])。LncRNA机制的不断被阐明,也为肿瘤的研究提供了新的可能。LncRNA在多种肿瘤的增殖、迁移侵袭和抗凋亡     

杂合型单核苷酸多态性定量焦测序测定法用于唐氏综合征快速诊断的探索

目的 通过筛查人21号染色体上的杂合型单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,初步建立基于定量焦磷酸测序反应的唐氏综合征分子诊断方法.方法 基于改进引物设计的等位基因特异性扩增法,在21号染色体上选取7个SNP位点进行杂合子筛选,通过焦测序法检测SNP中两个等位基因型的比值,并作为诊断唐氏综合征的依据.结果 通过对84名正常中国人基因组样本进行筛查,得到6个杂合率较高的SNP位点.6个SNP位点的杂合子覆盖率为92.9%.应用这6个SNP位点对10例唐氏综合征患者的样本进行了焦测序定量检测,结果表明10例患者样本中有9例样本的两个基因型比值为2:1或1:2,1例未检出杂合子,检出率为90%.结论 初步建立了一种唐氏综合征辅助诊断方法,具有成本低、操作简单、快速和结果明了的优点,可以有效地快速诊断唐氏综合征,为今后进一步完善该方法,并将其用于临床诊断奠定了基础.     

形态测量在胃癌病理—生物学分型中的价值

生物学行为是影响胃癌预后的重要因素而核面积是影响因素中最重要一个。本文按生长方式对胃癌作了新的病理生物学分型的尝试,把胃癌分作膨胀型和浸润型,每型又依核面积大小分为大核型和小核型。结果表明,本文的分型较其他分型更能体现肿瘤的生物学特性,值得提倡。     

EBVTK激酶基因在原核细胞中的表达及其在NPC诊断中的意义

目的 探索以Epstein-Barr病毒（EBV）TK激酶为抗原，建立简便、快速、敏感和特异的鼻咽癌（NPC）诊断方法。方法 构建原核表达载体pRSET-TK，在原核细胞BL21（DF3）中获得高效表达的TK激酶，以Western blot检测证明其抗原的特异性和应用于NPC检测的可行性。以纯化的TK激酶为抗原初步建立ELISA检测方法，检测NPC患者血清中TK／IgG抗体。结果 在NPC患者血清中含有特异的针对TK激酶的IgG抗体，Western blot TK/IgG检测的敏感度和特异度均为100％。结论 初步建立了ELISA TK／IgG诊断NPC方法，具有较高的敏感性和特异性。     

人类ABO血型系统-B抗原单克隆抗体的研制

血库、临床医院、法医以及在血液免疫学、人类遗传学的基础理论研究方面,都迫切需要高特异性、高亲和性(avidity)、高亲和力(affinity)的血型McAb,从80年代初始,国内外研制ABO血型McAb的工作。目前,有些国家已经商品生产,取代了ABO系统     

分泌抗-HBs、抗-HBc杂交瘤细胞系的建立及其在临床诊断中的初步应用

以含Dane颗粒的无临床症状的HBsAg掳带者血浆沉淀物免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS-1小鼠骨髓瘤细胞在50％PEG下融合。以固相放射免疫测定(SPRIA)、被动凝试验(PHA)、酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法检测抗体,于一次细胞融合实验中建立三株分泌抗-HBs和一株分泌抗-HBc的杂交瘤细胞系。四株细胞分泌的单克隆抗体(以下简称“单抗”)皆属于小鼠IgG_1亚类。抗-HBs属于“a”亚型。经ELISA和微量免疫电泳证实两种单抗具有良好的特异性和亲和性。两和单抗纯化后用于乙肝的临床诊断。     

Epstein-Barr病毒壳抗原gp125的纯化和应用

目的研制ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ（ＥＢ）病毒诊断试剂。方法将重组痘苗病毒表达的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒（ＥＢＶ）壳抗原（ＶＣＡ）主要多肽ｇｐ１２５纯化，作为诊断抗原建立了酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），检测了４８份鼻咽癌（ＮＰＣ）病人血清及１０份正常人血清中的ＶＣＡ／ＩｇＡ抗体。结果该方法与免疫荧光（ＩＦ）检测结果一致，但ＥＬＩＳＡ的平均几何滴度（ＧＭＴ）是ＩＦ的１２倍。结论以纯化的ＥＢ病毒壳抗原主要多肽ｇｐ１２５作为诊断抗原建立的检测方法，更适合于ＥＢＶ相关疾病的血清学诊断和血清流行病学调查。     

2.5无效食管动力在胃食管反流病中的作用

目的明确无效食管动力(IEM)在GERD患者中的发生率及其在食管酸暴露、酸清除及食管黏膜损伤中的作用. 方法对2001年1月至2002年6月拟诊GERD患者行食管压力及食管动态pH监测,对明确GERD诊断的66例患者依食管远端动力特征分为食管动力正常组、IEM组、其它组;分析食管动力正常组及IEM组24小时pH＜4时间百分比,立位及卧位pH＜4的时间百分比、食管酸清除率,并经内镜检查判断有无反流性食管炎.