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目的 构建人成熟型TGF-β1基因T克隆载体,为进一步研究人成熟型TGF-β1的原核表达和功能打下基础。方法 应用RT—PCR技术从人外周血单个核细胞扩增人成熟型TGF-β1编码区cDNA基因(336 bp),并将其克隆至pUCM—T载体,经限制性核酸内切酶EooR I, Hind Ⅲ的酶谱分析和DNA测序分析证实。结果 成功构建人TGF-β1/T载体,可进一步用于基因表达和表达产物的功能研究。结论 人TGF-β1/T载体的构建,为进一步研究其基因表达和功能打下基础,对肝纤维化的防治具有较大意义。 相似文献
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目的:构建人成熟型TGF-βl基因原核表达载体,表达并纯化人成熟型TGF-βl融合蛋白。方法:应用基因重组的方法,构建成熟型TGF-βl原核表达载体,诱导表达人成熟型TGF-βl的融合蛋白,并应用亲和层析法纯化重组融合蛋白,应用Western-Blot鉴定其抗原性。结果:成功构建人成熟型TGF-βl原核表达载体,获得人成熟型TGF-βl融合蛋白,其抗原性较好。结论:人成熟型TGF-βl基因原核表达裁体的成功构建,可高效表达人成熟型TGF-βl融合蛋白,为进一步研究其功能和获得其多克隆抗体奠定了基础,并为开发国产人TGF-βl诊断试剂做必要的准备,对肝纤维化的防治具有较大意义。 相似文献
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目的 :获得兔抗人基质金属蛋白酶 1 (MMP 1 )多克隆抗体 ,并将其初步应用于临床检测。方法 :将人MMP 1融合蛋白经亲和层析法纯化 ,并将其作为抗原免疫家兔 ,获得兔抗血清 ,经饱和硫酸铵纯化 ,获得初步纯化的兔抗人MMP 1多克隆抗体。用双抗夹心间接酶联免疫吸附实验 (ELISA)测定正常对照、慢性肝病、肝硬化患者血清MMP 1的OD值。结果 :获得初步纯化的兔抗人MMP 1特异性多克隆抗体 ,该抗体能与人MMP 1起反应。结论:制备的MMP 1多克隆抗体可初步用于临床检测 相似文献
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目的 :研究CCR5基因 5′侧翼区的调控序列。方法 :分段构建CCR5基因 5′侧翼区的pCAT报告基因载体 ;分析各片段在Hela细胞中的CAT调节活性。结果 :CCR5基因 5′侧翼区基因 - 1~ - 4 86bp序列的pCAT重组质粒在Hela细胞中能明显表现CAT上调活性 ,其活性比pCATenhancervector的活性高 3倍。结论 :CCR5基因 5′侧翼区基因 - 1~ - 4 86bp序列中存在基因转录上调元件 相似文献
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