深圳东门市场野生动物SARS病毒的监测

目的　对深圳东门市场野生动物标本中SARS病毒进行监测 ,了解动物携带SARS病毒的情况。方法　对 2 0 0 3年 5月 7日至 12月在东门市场采集的果子狸、貉、鼬獾、猪獾和狗獾等 5种动物标本 ,进行病毒分离鉴定及RT -PCR和SARS荧光定量PCR检测。结果　 5月首先从 4份果子狸和 1份貉标本中分离到SARS病毒。 5月至 12月的 12 1份动物标本中共有 5 5份SARS病毒阳性标本 ,阳性率为 45.45 %。 5月份、10月份、11月份和 12月份野生动物标本中SARS阳性率分别为 50%、83.33%、34.78%和 44.87% ,其中 ,果子狸的SARS病毒携带率为 90 %。结论　东门市场售卖的果子狸可能是携带SARS病毒的重要载体之一 ,在SARS的传播中可能起着重要的作用。     

第26届世界大学生夏季运动会疾病控制保障体系的构建及应用

目的总结第26届世界大学生夏季运动会(以下简称深圳大运会)疾病控制保障工作经验,为今后举办大型综合活动提供重要借鉴。方法通过赛前筹备及赛时的症状监测、传染病监测、公共场所监测、食品安全保障、病媒生物监测与评估和城市层面的重点传染病监测,构建深圳大运会的疾病控制保障体系。结果 2011年7月29日-8月26日,全部涉大场所无传染病疫情和食物中毒报告,累计报告症状监测病例171例,3例传染病病例,主要症状为腹泻(64.2%)和发热(21.0%),发病时间主要集中于赛时阶段(79.6%),病例主要集中于大运村(53例,31%)和大运会体育中心(25例,14.6%),媒体工作人员(13.66‰)和技术官员(8.51‰)发病率相对较高;累计监测比赛场馆游泳池水898宗,合格率为99.8%;随机抽检供餐食品9 191份,合格率为100%;累计监测发现鼠迹阳性235处,蟑迹42间,成蝇197间,蝇类孳生地5 507次,成蚊288处,防鼠设施总合格率为96.3%,防蝇设施总合格率97.4%;深圳市城市层面累计报告八类重点关注传染病2 104例,与以往监测数据一致。结论深圳大运会的疾病控制保障体系完善,能有效减少突发公共卫生事件的发生,为活动的顺利举办提供重要保障,可在今后相关的大型活动疾病控制保障工作中推广应用。     

登革2型病毒深圳分离株的鉴定及E基因序列分析

分支上,核苷酸同源性最高,达99.8%,氨基酸同源性为100%,与Indonesia-76、Somalia-84和Sri Lanka-90同属基因Ⅳ亚型.结论 首次从深圳市登革热患者血清中分离到1株登革2型病毒,证实该毒株可能来源于马来西亚.     

深圳市2005-2007年H3N2亚型流行性感冒病毒流行病学和分子变异特征

目的 探讨深圳市2005-2007年季节性流行性感冒(简称流感)流行病学特征和甲3亚型流感病毒可能的分子变异.方法 对深圳市2005-2007年流感监测网络(由9所医院、6个区和市疾病预防控制中心共16个主要机构组成)的运行质量进行控制,按周统计分析主要监测医院流感样病例占就诊者的百分比(ILI百分比),并采集流感样病例鼻咽拭子进行流感病毒分离鉴定,对分离到的毒株提取病毒RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增血凝素基因重链区(HAI区)基因片段,产物纯化后测序并进行核苷酸相似性、基因进化树和氨基酸变异分析.结果 深圳市2005-2007年流感活动水平在各年间有所波动,呈现夏季高峰,2006和2007年5-7月为流行高峰期.2005-2007年流感病毒的分离率分别为4.78%(114/2385)、5.77%(212/3674)和12.12%(343/2831),分离毒株数多少与ILI百分比的季节波动相关,按周分离率与ILI百分比的变化趋势基本一致.2005和2006年甲3亚型所占比例分别为25.46%(28/114)和2.83%(6/212),而2007年成为优势毒株,占62.68%(215/343).甲3亚型病毒HA1区序列进化树分析发现,虽然进化树的主干基本按照毒株分离的时间先后发展,与不同年度WHO推荐的疫苗株先后一致,但2005-2007年的主要流感毒株共分为5个分支,2005-2006年毒株在第Ⅰ～Ⅲ分支,2007年4-6月和5-12月形成2个分支,与同期WHO推荐的疫苗株不在一个进化分支,深圳甲3亚型流感病毒的变化较早,出现疫苗株滞后现象.所有毒株未见HA1区序列缺失和插入,受体结合位点和二硫键位点氨基酸也显保守,一些位点出现了不同属性氨基酸的置换,并导致个别潜在的糖基化位点的丢失或增加,但尚不能判定为新变种.结论 深圳市可能属于我国流感病毒变异较早的地区之一,甲3亚型流感病毒在人群中呈活跃状态;常规季节性流感监测与病毒分子变异分析结合,能为毒株的演变及其流行病学意义提供及时、重要的信息.     

A型流感病毒核蛋白噬菌体单链抗体体外表达鉴定

目的　从构建的A型流感病毒核蛋白(Nucleoprotein)噬菌体单链抗体库中筛选阳性克隆,在大肠杆菌HB2 15 1中表达流感病毒核蛋白噬菌体单链抗体,为研究A型流感病毒免疫渗漏试剂盒建立基础。方法　经过连续三轮固相“亲和-洗脱-富集”筛选,丰富噬菌体抗体库中阳性克隆的比例,采用ELISA、SDS PAGE和Western blot方法对大肠杆菌培养上清液和细菌周质腔蛋白进行分析目的产物。采用亲和层析方法对细菌周质腔蛋白进行分离纯化并进行单链抗体滴度分析。结果　从96个克隆中筛选到10个阳性克隆,其中三个阳性信号较强,分别为A1、E1和G3。其A4 50 分别达到0 . 4 6 9、0 . 5 82和0 . 5 0 7。A型流感病毒核蛋白噬菌体单链抗体主要表达于细菌周质腔中,亲和纯化产物稀释4 0 .96倍,ELISA结果仍为阳性。结论　利用噬菌体抗体库技术,初步在大肠杆菌中表达了A型流感病毒噬菌体单链抗体。     

深圳市2005年鼠间汉坦病毒感染的鼠情监测及病毒株SZ2083的分离鉴定

目的 了解深圳市啮齿动物自然感染汉坦病毒（HV）状况和病毒型别，为制订防制措施提供科学依据。方法 收集宿主动物资料，采用酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验分别检测鼠血清特异性总抗体和IgG抗体，直接免疫荧光检测鼠肺汉坦病毒抗原。将阳性鼠肺标本接种长爪沙鼠分离HV，阳性鼠肺标本提取病毒RNA，应用型特异性引物进行逆转录-巢式PCR扩增及核苷酸序列测定从而进行分型鉴定。结果 共捕获鼠形动物472只，其中以褐家鼠为优势鼠种，带病毒率为9．96％。鼠血标本总抗体阳性76例，IgG阳性56例。成功分离到1株HV，命名为SZ2083。经逆转录一巢式PCR扩增并进行序列测定显示为汉城（SEO）型。序列比较分析发现SZ2083核苷酸序列与L99同源性为97％，而与HTN76—118株的同源性仅为76％。结论 深圳市存在着以家鼠型为主的肾综合征出血热自然疫源地。     

深圳市1997～1998年麻疹的流行病学分析

麻疹主要在婴幼儿中流行 ,但广泛使用麻疹疫苗后 ,麻疹的流行病学发生很大变化 ,本文对 1 997～ 1 998年深圳市的 2 41例疑似麻疹病例进行分析 ,结果报告如下。材料与方法采集深圳市 1 997～ 1 998年 1个月内没有免疫过麻疹疫苗的 ,且有发热、出疹 ,伴有咳嗽、上呼吸道炎症、结膜炎、口腔粘膜斑 (柯氏斑 )三种症状之一的疑似麻疹病人血 ,用酶标法 (ＥＬＩＳＡ)检测麻疹ＩｇＭ抗体 ,试剂由中国预防医学科学院病毒所研制。待检血清的病毒抗原孔呈明显的棕色反应 ,正常抗原孔不 (或微 )显色 ,两者能用肉眼明显区别即为阳性 ,否则为阴性。结　　…     

一起非结核分枝杆菌引起的院内感染暴发

1998年4月1日至1998年5月31日,深圳市妇儿医院共做手术292例?从4月22日出现首例病人术后感染?不愈合?到7月11日为止,共发生152例?     

聚合酶亚基间相互作用的抗流感病毒药物筛选体系的建立

目的构建基于聚合酶亚基间相互作用的双靶点特异性抗流感病毒药物筛选酵母双杂交体系。方法将流感病毒A/PR8/34株PB2、PA基因克隆至载体pGADT7,PB1基因克隆至载体pGBKT7,将构建的酵母双杂交重组质粒PB2-pGADT7、PB1-pGBKT7和PA-pGADT7、PB1-pGBKT7分别共转化酵母AH109,利用SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal培养基筛选阳性菌落。结果 PB2-PB1共转化效率为1.4×104cfu/μg,PA-PB1共转化效率为1.6×104cfu/μg;双靶点特异性的酵母双杂交系统在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-Gal上均有兰色菌落生长;PB2、PB1、PA基因PCR结果均为阳性。结论初步构建了流感病毒聚合酶亚基间相互作用的酵母双杂交系统,可用于抗流感病毒靶点特异性的药物高通量筛选。     

小分子药物抑制SARS病毒的体外实验研究

目的:为探索SARS的治疗药物，实验观察合成的13种小分子药物抑制SARS冠状病毒的效果。方法:采用微孔塑料板病变法及MTT法，通过观察细胞病变(CPE)及OD值测定结果，判定药效。结果:13种小分子药物中3、4，7和8号药物在接种SARS病毒后20h内对SARS冠状病毒有抑制作用；9号药物在接种病毒后30h内药效显；接种SARS病毒36h后，SARS病毒繁殖迅速，48h后全部发生细胞病变，微孔板病变法与MTT法结果一致。结论:13种药物中有5种药物在24h内对SARS冠状病毒有一定的抑制作用，30h后所有药物细胞孔开始出现病变，48h后细胞全部病变、死亡，表明合成的13种小的药物均不能有效地抑制SARS病毒的繁殖。