miR-409-3p靶向癌基因ELF2抑制非小细胞肺癌细胞系A549增殖

目的观察miR-409-3p对非小细胞肺癌细胞系A549增殖的影响及其机制。方法对照组为常规条件下培养的转染阳性对照核苷酸的A549细胞寡核苷酸组。实验组在对照组的基础上采用化学合成miR-409-3p模拟物,脂质体转染构建miR-409-3p高表达A549细胞;经q PCR检测,观察2组48 h后miR-409-3p的表达; MTT法检测细胞增殖;流式细胞计量术检测细胞凋亡和周期的差异。结果 miR-409-3p模拟物转染后,A549细胞中miR-409-3p表达水平显著升高(P0. 05);细胞总凋亡比例为22. 66%±4. 61%,显著高于对照组的7. 78%±1. 95%(P0. 05); G0/G1期为40. 21%±5. 37%,显著低于对照组细胞56. 09%±5. 22%(P0. 05);双荧光报告系统表明癌基因ELF2是miR-409-3p的靶基因,过表达miR-409-3p模拟物后,内源性ELF2蛋白表达水平显著下降(P0. 05)。结论 miR-409-3p可能通过调控ELF2的转录水平抑制非小细胞肺癌细胞A549增殖并促进其凋亡。     

脂质过氧化对人血管内皮细胞NO合成的影响及维生素E的作用

一、材料与方法1.细胞培养 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)培养采用本实验室改进的Ｊａｆｆｅ培养法。经免疫荧光检测第Ⅷ因子相关抗原阳性 ,鉴定为血管内皮细胞。2 .实验分组 :分 8组 ,第 1组为正常对照组 ;第 2组为氢过氧化枯烯 0 0 1ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 3组为氢过氧化枯烯 0 0 5ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 4组为氢过氧化枯烯 0 10ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 5组为氢过氧化枯烯 0 5 0ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 6组为氢过氧化枯烯 1 0 0ｍｍｏｌ/Ｌ ;第 7组为氢过氧化枯烯 0 5 0ｍｍｏｌ/Ｌ +维生素Ｅ(ＶｉｔＥ) 5 0ｍｇ/Ｌ ;第 8组为氢过氧化枯烯 1 0 0ｍｍｏｌ/Ｌ +…     

酪氨酸酶基因在HEK293细胞表达的MRI评价

目的:以酪氨酸酶基因作为报告基因转染HEK293细胞, 利用其合成大量黑色素而能被MRI检测的特性来反映基因表达的情况, 以探索磁共振成像(MRI)评价体外细胞基因表达的方法。方法:以脂质体将含酪氨酸酶基因完全cDNA的pcDNA3tyr质粒转染到HEK293细胞, 以MRIT₁WI、T₁WI/SPIR、T₂WI序列扫描转染细胞, 观察表达的黑色素的MRI信号。应用Fontana染色检测黑色素的合成, RT-PCR检测酪氨酸酶基因的cDNA片段, 以进一步验证酪氨酸酶基因的转染与表达。结果:(1)pcDNA3tyr质粒转染进入HEK293细胞并在其中表达生成黑色素, 转染5μg、10μg、20μg质粒的10⁶个细胞内生成的黑色素能够被MRI检测到并在MRIT₁WI、T₁WI/SPIR、T₂WI检查呈高信号, MRI信号强度与转染质粒量成正相关。(2)Fontana染色法检测到HEK293细胞内的黑色素颗粒;(3)采用RT-PCR方法检测到转染的HEK293细胞含酪氨酸酶基因的cDNA片段。结论:MRI能够检测到HEK293细胞内由外源基因表达合成的黑色素, 说明影像学与分子生物学技术结合可以评价体外细胞基因表达的情况。     

环孢素A体外诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察环孢素Ａ是否有诱导白血病细胞凋亡的作用。方法：应用细胞形态学检查、二苯胺法ＤＮＡ片段化定量，ＤＮＡ凝胶电泳及流式细胞术等方法观察细胞凋亡。结果：ＣｓＡ５０ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞４ｈ，ＤＮＡ片段率显著增高，达（２８．２±５．８）％，而对照组仅为（１２．５±１．７）％（Ｐ＜０．０１，ｎ＝１０）。光镜及电镜检查见细胞核固缩，碎裂，有凋亡小体形成。ＤＮＡ电泳显示典型的ＤＮＡｌａｄｄｅｒ。流式细胞术检测发现ＣｓＡ５０ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞６ｈ凋亡细胞率为４９．７％，而空白组仅为９．１％。ＣｓＡ诱导ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ片段化呈剂量和时间依赖性。结论：ＣｓＡ在体外能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡。     

第九届华东地区脑电图与临床神经电学术会议召开

由华东地区脑电图与临床电生理协作组主办、福建医科大学附属协和医院神经内科协办的第九届华东地区脑电图与临床神经电学术会议于2008年10月23—26日在福建武夷山市举办。会议共收到论文近100篇，参会代表80人。除华东地区六省一市以外，还有来自广东、天津、西安等地的代表。大会在癫痫的脑电图、脑电图的分类、脑电图及其他神经电生理指标对意识障碍病人的评估、肌电图在重症肌无力、运动神经元病及肌电图在司法鉴定中的应用都进行了充分的讨论，     

不同跟腱修复材料特性的临床意义

目的　跟腱断裂术后制动弊端多 ,而早期功能锻炼优点明确 ,探讨各种缝合材料在打结后材料力学特性及滑结情况 ,为临床创新设计 ,术后无须制动的缝合组合提供依据。方法　将不同型号薇乔线 (CV)、慕丝线 (Mersilk)、攀状尼龙线 (Nylon)、普迪思 (PDS)各 1 6条剪断后各打 4个结 ,进行材料力学特性测试。结果　缝合材料的最大载荷、刚度、强度、比能分别为 :PDS >CV >Nylon >Mersilk(P <0 .0 5 )。结论　尽管PDS肌腱缝合线易滑结 ,但 1 0 -PDS ,1 0 -CV、1 0Nylon作端对端跟腱修复强度足够 ,相应 5 0PDS、5 0CV缝合材料作腱周修复也可选择 ,且打 4个以上结可靠。尽管Mersilk不易滑结 ,但不适合跟腱修复。不过好的缝合材料应选择最佳的缝合方法才更有临床意义     

腹腔镜初学者病例选择的初步体会

腹腔镜胆囊切除术(LC)具有创伤轻、痛苦小、恢复快的特点,我院开展腹腔镜胆囊切除(LC)时间较晚,对病例选择的初步体会如下.1 资料及结果施行LC病人共32例.男性14例,女性18例;年龄22～75岁,平均38岁;手术时间最短45分钟,最长240分钟;其中急性胆囊炎并结石3例,胆囊三角区充血水肿粘连增厚解剖不清1例,中转开腹手术1例.住院天数4～7天,平均5.6天,全部病人顺利康复无术后并发症出现.     

胸廓内动脉的穿动脉越侧行走一例

我们在观察胸廓内动脉上4个穿动脉时,在25具成人尸体中,见一例男性标本,其右侧第Ⅰ穿动脉进入浅层后,跨过胸前正中线,在左侧行走并分布左侧胸前内侧区上分,还成为左侧诸穿动脉中的主支,特记录如下。本例(见图)右侧第Ⅰ穿动脉起自右侧     

SGI工作站医学图像三维重建系统

ＳＧＩ工作站医学图像三维重建系统张绍祥，刘正津，何光篪第三军医大学重庆６３００３８除美和，唐泽圣清华大学北京１０００８４国内已见报道的医学图像计算机三维重建研究均为在小型机或微机上完成，重建图像质量并不理想。本实验采用ＳＧＩ图像工作站，从人体蝶鞍、斜...     

人类胚胎生殖细胞体外分化为心肌细胞的研究

胚胎生殖（EG）细胞是来源于胚胎原始生殖细胞（PGCs）的多潜能干细胞。采用无饲养层细胞、无细胞因子等的基础培养液（DMEM＋20％NBS＋0．1mM 2Me）培养EG细胞，部分在基础培养液添加10μmol／LRA＋0．75％DMSO或10μmol／L 5-氮胞苷（5-AZA）诱导人类EG细胞向心肌细胞分化，以检测其是否具有向心肌细胞自发分化的能力。9例（8．49％，9／106）胎儿EG细胞在体外分化得到20个节律性心脏跳动样细胞团，其搏动节律为20～120次／min，体外维持节律性搏动最短2d，最长至15d，呈PAS，Myoglobin，α-actin阳性；对K^＋、Ca^＋、肾上腺素等具有与在体心脏相似的反应性；透射电镜观察具有心肌细胞样结构。添加DMSO和RA或5-AZA诱导未得到跳动样心肌细胞，但可提高心肌α-actin免疫组织化学染色阳性率；表明人类胚胎生殖细胞具有向心肌细胞分化的潜能。