八种中药多糖对小鼠巨噬细胞释放细胞因子的影响

常规提取黄芪、枸杞、当归、香菇、地黄、蒲公英、板蓝根、柴胡等8味中药的多糖组份,体外与小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,ELISA法检测培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子的含量,并与巨噬细胞对照组比较,借以观察黄芪等中药的多糖对巨噬细胞释放细胞因子的影响,探索巨噬细胞甘露糖受体在中药多糖免疫干预效应中的作用。结果表明,黄芪、枸杞、当归、香菇和蒲公英等5味中药多糖组份一定浓度组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8中一个或多个细胞因子水平明显升高(P<0.05或P<0.01),且具有浓度差异性(P<0.05或P<0.01)。提示黄芪等5味中药多糖组分刺激巨噬细胞释放细胞因子是他们干预机体免疫功能的部分机制。     

基因工程技术在医学中的应用

目的：为了了解基因工程技术在医学中的应用及其利弊。方法：通过查阅相关文献,了解基因工程技术在重组药物、疫苗、诊断和治疗等方面的应用,并分析其利弊。结果：基因工程技术的快速发展使其在医学中得到了广泛的应用,但同时也存在着不利的一面。结论：发展基因工程技术的造福功能,抑制其危害功能。     

杜仲多糖对肝纤维化模型大鼠Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白，MMP-1，TIMP-1及TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:探讨杜仲多糖治疗肝纤维化(HF)作用,并探讨其相关的作用机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分成2组,正常组(10只)和肝纤维化造模组(50只)。造模组采用40%四氯化碳(CCl4)腹腔注射制备HF动物模型,造模成功后将其随机分为5个组,分别为模型组,杜仲多糖高、中、低剂量组及秋水仙碱组每组10只。秋水仙碱组(1.0×10-4g·kg~(-1)),杜仲多糖高、中、低剂量组(0.14,0.07,0.035 g·kg~(-1))分别连续灌胃给药8周后收集样本,测定法大鼠体质量及计算肝脏系数;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素-6(IL-6),高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1),脂多糖(LPS),肝组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)水平;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析各组大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1,TIMP-1及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)mRNA表达情况。结果:与正常组比较,CCl_4能显著降低实验大鼠体质量(P0.01),提高肝脏系数(P0.01);杜仲多糖能显著增加HF模型的体质量(P0.01),显著降低HF模型肝脏系数(P0.01);ELISA检测表明,杜仲多糖能显著降低肝纤维化大鼠血清IL-6,HMGB1及LPS含量(P0.01);RT-PCR检测结果显示,杜仲多糖及秋水仙碱能显著降低HF肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,TIMP-1及TGF-β_1mRNA含量(P0.05),明显提高MMP-1含量(P0.05,P0.01),且呈量效关系。结论:杜仲多糖具有显著的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与抑制降低HF肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,TIMP-1及TGF-β_1mRNA表达有关。     

皂角刺总黄酮对体内外人肝癌细胞株HepG2作用活性的研究

目的:探索皂角刺总黄酮对肝癌细胞体内外抑制作用。方法:采用不同剂量的皂角刺总黄酮对肝癌细胞的体外敏感性;对荷瘤小鼠进行体内实验,观察该提取物对肝癌细胞生长的抑制情况。结果:体外实验2.0-0.75mg/ml浓度下皂角刺总黄酮对其增殖有明显的抑制作用,体内实验50、100和150mg/kg剂量分别对荷瘤小鼠生命延长率分别为50.2%、67.2%和74.6%,抑瘤率分别达到55.3%、55.4%和60.3%。结论:皂刺总黄酮在体内外具有明显抑制肝癌细胞的作用。该实验结果为将来皂刺总黄酮应用于临床提供了理论依据。     

苗药组方雾化剂对染矽尘大鼠血清SOD、MDA和肺组织细胞凋亡Fas、Caspase-3基因表达的影响

目的：通过制备苗药组方雾化剂,观察苗药组方雾化剂对染矽尘大鼠血清 SOD 和 MDA 及肺组织细胞凋亡Fas和Caspase-3基因表达的影响。方法：健康 SD大鼠分成5组,其中4组进行染矽尘造模,待模型成功后随机选其中3组分别给予糖皮质激素雾化、苗药组方雾化剂雾化、苗药组方雾化加中药灌胃治疗,治疗40天后,采用 WST-1法检测超氧化物歧化酶（SOD）,TBA 法检测丙二醛（MDA）,提取实验大鼠肺脏组织 RNA ,采用反转录合成 cDNA ,通过 RT-PCR 技术检测 Fas、Caspase-3基因表达。结果：与染矽尘组比较,苗药组方雾化组大鼠血清中 SOD 活力明显升高（P〈0.05）,苗药组方雾化组大鼠血清中 MDA 含量明显降低（P〈0.05）,苗药组方雾化组大鼠肺组织 Fas 和 Caspase-3基因表达明显降低（P〈0.05）。结论：苗药组方雾化组能增强染矽尘大鼠血清SOD活力,减少染矽尘大鼠血清MDA含量,显著降低大鼠肺组织Fas和Caspase-3基因表达。     

并殖吸虫病患者血清IL-5、IL-4、IL-13及胸腺基质淋巴细胞生成素水平检测

目的 研究并殖吸虫感染者Th2免疫应答产生的细胞因子IL-5、IL-4、IL-13、胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)的水平,筛选出可以用于临床诊断并殖吸虫病的潜在细胞因子标志物.方法 收集贵州省本地并殖吸虫病患者成年组(年龄＞18周岁)及未成年组患者(年龄≤18周岁)的血清样本各12例,以健康人血清4例为对照,ELISA检测血清中的IL-5、IL-4、IL-13、TSLP等4种细胞因子的浓度,各病例组及对照组间采用独立样本t检验分析,同时收集患者的流行病学信息.结果 成年组IL-5、IL-4、IL-13、TSLP分泌浓度分别为(19.50±5.57)pg/ml、(0.95±0.19)pg/ml、(475.30±629.81) pg/ml、(16 676.67±7 169.29) pg/ml;未成年组分别为(23.04±3.37)pg/ml、(1.05 ±0.19) pg/ml、(422.84±539.48) pg/ml、(16 242.50±6 230.81) pg/ml;对照组分别为(4.45±0.84) pg/ml、(0.32±0.12) pg/ml、(41.15±11.72) pg/ml、(490.00±123.36) pg/ml.IL-13、TSLP在成年组、未成年组患者中升高,具有统计学意义(t=1.27,P＜0.05;t=3.11,P＜0.05).在有典型并殖吸虫病流行病学特征的未成年组中,IL-5升高(t=3.11,P＜0.01),具有统计学意义;而在无典型症状的成年组中的变化无统计学意义(t=1.52,P＞0.05).IL-4在成年组、未成年组患者中均无统计学意义变化(t=1.08,P＞0.05;t=2.1,P＞0.05).结论 并殖吸虫病患者Th2免疫反应活化,IL-5、IL-13、TSLP显著上调,可以作为潜在的诊断标志物进行下一步的研究筛选.     

不同柴胡用量的小柴胡汤对正常小鼠胃排空和小肠推进功能的影响

目的:观察不同柴胡用量的小柴胡汤对正常小鼠胃排空和小肠推进功能的影响,并探讨其作用机制。方法:40只小鼠随机分为四组:小柴胡汤组(小)、小柴胡汤组(中)、小柴胡汤组(大)、及正常对照组,分别灌胃生理盐水溶液和相应柴胡用量的小柴胡汤水煎剂,30min后再灌0.4mL的浓度为20mg/ml葡聚糖蓝-2000,20min后处死小鼠,观察各组的小肠推进率和胃残留率。结果:与正常对照组比较,三组小柴胡汤均可增加正常小鼠的小肠色素推进率,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。其中,柴胡用量最大的小柴胡汤组(大)与其他三组相比,增加小肠色素推进率的作用最为明显,与三组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与正常对照组比较,三组小柴胡汤均可增加正常小鼠的胃排空率,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。其中,柴胡用量最大的小柴胡汤组(大)与其他三组相比,增加胃排空率的作用最为明显,与三组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:小柴胡汤可以降低正常小鼠胃内色素残留量,同时促进小肠推进,随柴胡用量的增加胃肠运动增强。     

苗药组方雾化剂的制备及对染矽尘大鼠血清SOD、MDA和肺组织细胞凋亡Fas、Caspase-3 mRNA表达作用的研究

目的：通过制备苗药组方雾化剂,观察苗药组方雾化剂对染矽尘大鼠血清SOD和MDA及肺组织细胞凋亡Fas 和Caspase-3基因表达的影响。方法：健康SD大鼠分成5组,其中4组进行染矽尘造模,待模型成功后随机选其中3 组分别给予糖皮质激素雾化、苗药组方雾化剂雾化、苗药组方雾化加中药灌胃治疗,治疗40天后,采用WST-1法检测超氧化物歧化酶（SOD）,TBA法检测丙二醛（MDA）,提取实验大鼠肺脏组织RNA,采用反转录合成cDNA,通过RT-PCR技术检测Fas、Caspase-3基因表达。结果：与染矽尘组比较,苗药组方雾化组大鼠血清中SOD 活力明显升高（P＜0.05）,苗药组方雾化组大鼠血清中MDA 含量明显降低（P＜0.05）,苗药组方雾化组大鼠肺组织Fas和Caspase-3基因表达明显降低（P＜0.05）。结论：苗药组方雾化组能增强染矽尘大鼠血清SOD活力,减少染矽尘大鼠血清MDA含量,显著降低大鼠肺组织Fas和Caspase-3基因表达。     

保和丸对溃疡性结肠炎模型小鼠肠道益生菌A.muciniphila菌变化及肠黏膜屏障的影响

目的观察保和丸对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠肠道嗜黏蛋白阿克曼氏菌(A.muciniphila)变化及肠黏膜屏障的影响。方法 40只SPF级6周龄KM小鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、美沙拉嗪组和保和丸组,每组10只。除空白对照组外,其余各组参照文献方法,采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导制备UC小鼠模型,空白对照组、模型组小鼠给予等体积蒸馏水灌胃,美沙拉嗪组和保和丸组小鼠分别按0.1mL/10g鼠重给药,每次给予0.2mL美沙拉嗪溶液(0.065g/kg,每天3次)和保和丸溶液(0.78g/kg,每天2次)灌胃,连续给药7天。计算小鼠疾病活动指数(DAI)评分,采用肠杆菌基因间重复共有序列(ERIC)-聚合酶链式反应(PCR)检测粪便菌群多样性,半定量PCR检测各组A.muciniphila细菌变化,病理切片HE染色观察各组小鼠结肠组织病理。结果药物干预前,各实验组小鼠DAI评分显著高于空白对照组(P均0.01);药物干预后,美沙拉嗪组和保和丸组小鼠DAI评分均显著低于本组干预前和模型组[干预3天:(0.61±0.39)分比(1.33±0.47)分、(1.19±0.41)分,(0.69±0.42)分比(1.31±0.40)分、(1.19±0.41)分,P0.01或P0.05;干预7天:(0.36±0.24)分比(1.33±0.47)分、(0.84±0.31)分,(0.38±0.26)分比(1.31±0.40)分、(0.84±0.31)分,P0.01或P0.05],美沙拉嗪组和保和丸组药物干预后DAI评分比较,差异无统计学意义(P0.05);ERIC-PCR结果显示,与空白对照组比较,模型组条带数量无明显减少,但条带位置变化较明显,保和丸组和美沙拉嗪组带数量明显减少,肠道菌群的多样性降低;半定量PCR结果显示,与空白对照组比较,模型组条带稍明显减少,美沙拉嗪组稍暗,保和丸组亮度明显升高,即A.muciniphila丰度升高,基因全长329bp;病理结果显示,与空白对照组比较,模型组小鼠结肠组织隐窝和腺体正常结构被破坏,发现大量炎性细胞浸润到黏膜层,与模型组比较,美沙拉嗪组和保和丸组黏膜损伤程度小,腺体结构破坏较轻,炎性细胞的数量和浸润深度都显著减少。结论保和丸能调节DSS诱导的UC模型小鼠肠道菌群,提高A.muciniphila菌群丰度,可改善UC模型小鼠炎症。