ABO血型基因分型诊断方法的建立

目的 在北京地区建立一套稳定的ABO血型系统基因分型的诊断方法,为临床疑难血型定型工作提供技术保证和输血安全保障.方法 通过Multiplex-PCR-RFLP技术和PCR-SSP技术建立起ABO血型基因分型方法.结果 所建立的分型方法具有良好的重复性和稳定性,在各种分型检测中均取得了理想的试验结果.结论 建立一套较为完善和实用的基因分型方法,为进一步研究中国人ABO亚型的分子基础提供参考依据.     

我国5城市合格献血者血液HIV及HCV残余风险研究

目的研究我国献血者血液HIV及HCV残余风险;评估我国开展血液核酸检测(NAT)的可行性和必要性。方法采集乌鲁木齐、昆明、北京、广州、杭州5城市献血者血样,用Chiron Procleix HIV-1/HCV Assay血液核酸检测体系,对各项血清学筛查均合格的89 467份血液作16人份混合血样NAT检测,凡筛查不合格血样再作单人份检测;对于抗-HCV阴性而HCV RNA NAT阳性者,用备用管作抗-HCV、ALT、及HCV RNA NAT复检。结果共检出HCV RNA NAT阳性但抗-HCV EIA阴性标本3例,未检出HIV RNA NAT阳性但抗-HIV EIA阴性标本;在87 034份血清学筛查合格献血者中,检出HCV NAT阳性2例,其中1例复检ALT为254U/L,未检出HIVNAT阳性;在2 613份血清学筛查不合格者中,检出1例HCV NAT阳性但抗-HCV EIA阴性标本,该献血者抗-HIV阳性、ALT 372U/L;未检出HIV NAT阳性但抗-HIV EIA阴性的标本。结论血清学筛查使我国的血液安全性已有相当高的保障;而NAT技术可进一步提高血液的安全性,但在我国是否可应用于常规血液筛查,需考虑成本与效益比。此外,ALT筛查对排除抗-HCV漏检血液仍有一定的作用。     

不同保存期全血辐照后红细胞保存损伤的研究

目的 观察全血在不同保存期辐照的红细胞的活性及功能的变化,确定不同保存时期的红细胞制品辐照后可保存的时间。方法 每袋CPDA-全血分成若干份,于采血后1、8、15、22d进行25Gy辐照,并设不辐照对照组。于辐照后即刻及辐照后7、14、21、28、35d取样测定各项红细胞活性、功能指标。结果 CPDA-全血于采血后1、8、15、22d不同保存期进行辐照,在继续保存至36d过程中,与对照组相比,均未引起其红细胞ATP含量、2,3-DPG含量的明显降低及血浆游离Hb的明显升高,表明不论是新鲜血或是库存血,25Gy辐照对红细胞活性、功能均无明显影响;各辐照组保存至36d时,其红细胞ATP含量仍保持在76.6％以上,表明仍有良好的细胞活性;但所有辐照组血浆K~+含量均于辐照后的一周内升高迅速,表明辐照对红细胞膜有一定的损伤,可引起红细胞内K~+的渗漏。结论 初步的体外研究表明,采集的血液无论何时进行辐照处理,与不辐照血比较,在35d有效期内,均未影响红细胞制品的活性和功能。建议25Gy辐照CPDA-全血保存期与不辐照CPDA-全血相同,也可保存35d;但由于血液在辐照后的一周内K~+升高迅速,因此对于不能耐受较高K~+的新生儿、早产儿、肾功能不全患者及快速大量输血的患者等,血液辐照后应立即输用。     

全血、悬浮红细胞和去白细胞悬浮红细胞储存期末溶血率调查

目的调查全血、悬浮红细胞和去白细胞悬浮红细胞3种红细胞制品储存期末的溶血率。方法分别收集全血、悬浮红细胞和去白细胞悬浮红细胞制品24份、94份和44份。4℃保存至储存期末,检测储存期末的总血红蛋白浓度、血细胞比容和上清游离血红蛋白浓度,计算储存期末溶血率。结果 24份全血的储存期末溶血率均值为0.07%;94份悬浮红细胞有93份的储存期末溶血率均值为0.20%;44份去白细胞悬浮红细胞的储存期末溶血率均值为0.24%。全血储存期末溶血率显著低于另外两种红细胞制品,而悬浮红细胞和少白细胞悬浮红细胞之间差异无统计学意义。结论 99.4%的检测样本的储存期末溶血率低于0.8%;去除血浆成分的红细胞保存基质影响储存期末溶血率;滤除白细胞未影响储存期末溶血率。     

红细胞吸收噻唑橙动力学观察

目的了解噻唑橙(TO)在红细胞保养液MAP液中的吸收光谱特性及其稳定性;了解红细胞(RBC)对TO吸附吸收、洗脱的动态过程。方法用MAP液配制120 mmol/L TO-MAP液,4℃避光保存,于配制后d 0、3、17,分别用可见紫外分光光度计进行350～600 nm扫描,观察其吸收光谱的变化;配制成TO-MAP-RBC悬液,于第0、2、4、12、24 h分别离心,取上清液测定其350～600 nm的扫描光谱;取储存2 d的TO-MAP-RBC液,离心弃上清,加生理盐水洗涤6次,每次间隔20 min,收集每次洗涤液,测定其350～600 nm扫描光谱。结果 MAP液中TO吸收主峰位于468 nm,在430 nm和520 nm有2处肩峰,储存0、7 d TO-MAP液扫描线几乎完全重叠,储存17 d扫描线略有降低;TO-MAP-RBC悬液0、2、4、12、24 h其上清液的扫描线有较大的降低;洗涤液的扫描光谱显示,第1～2次洗涤TO被洗脱的量较大,第3～6次洗涤TO被洗脱的量较小,并趋于平稳。结论 TO在MAP液中非常稳定,这为TO光化学病原体灭活提供了必要条件;TO可被红细胞吸附或吸收;TO洗脱的动力学过程提示,为降低TO对测定红细胞活性功能指标的影响,可增加洗涤次数及延长洗涤间隔。     

4种血小板保存袋保存效果的比较

目的 比较美国、荷兰、北京、上海4种血小板保存袋对手工制备浓缩血小板的保存效果.方法 手工浓缩血小板无菌加入到4种保存袋于22℃保存,保存0、1、3、5、7d后分别取样检测血小板回收率、pH、体外聚集活性、血小板第3因子、第4因子有效性(PF4)及CD62P阳性表达率.结果 随保存时间的延长4种保存袋血小板回收率均逐渐降低,但各保存袋之间无显著性差异(P>0.05);随保存时间延长pH均逐渐下降,血小板保存5d时各保存袋pH无显著性差异(P>0.05);保存7d时,北京保存袋pH(5.8± 0.35)明显低于其他3种保存袋(6.68±0.13、6.88 ±0.13、6.96 ±0.11)(P<0.05).随保存时间的延长各保存袋中的血小板聚集率均下降迅速,但4种保存袋间无显著性差异(P>0.05).血小板保存5d时血小板第3因子(止血功能)无显著性差异(P>0.05);保存7d时美国(127.30±20.35)、北京(649.20±504.00)保存袋第3因子(纤维蛋白析出时间)比荷兰(93.38±7.51)、上海保存袋(71.10±4.52)明显延长(P<0.05).保存7d血小板第4因子(释放功能)均无明显下降(P>0.05).血小板保存5d时CD62P阳性表达率无显著性差异;保存7d时北京保存袋(56.63)高于其他3种保存袋(30.79、26.58、30.91).结论 北京、上海与美国、荷兰血小板保存袋相比,血小板保存5d时各检测指标接近,4种保存袋保存效果基本一致;但保存7d时北京保存袋其pH、血小板第3因子及CD62P阳性表达率指标比其他3种保存袋差.     

辐射变色膜用于标识输注辐照血液辐照剂量的研究

目的制备可标识血液辐照剂量的辐射变色膜,了解其吸光度峰值与淋巴细胞反应抑制率之间的对应关系。方法分别用5、15、25、35、50Gy 5种辐射剂量的射线照射所制备的辐射变色膜和血液,测定辐照前后辐射变色膜的吸光度和淋巴细胞反应抑制率。结果该辐射变色膜具有低剂量响应特征,与血液同时被辐照后,薄膜颜色由粉红色变为蓝色,其吸收峰的吸光度与血液淋巴细胞反应抑制率具有相关性。结论经肉眼观察辐射变色膜可确定血袋是否经辐照,测定辐射变色膜的吸光度可定量标识血液的辐照剂量。该辐射变色膜在血液辐照预防TA-GVHD中具有重要的应用前景。     

4℃长期保存洗涤红细胞体外质量研究

目的探讨延长洗涤红细胞(WRC)的保存期限。方法将悬浮红细胞均分为3份:1份不洗涤(对照组),其余2份分别用生理盐水(盐水组)和红细胞添加剂(MAP组)洗涤,终产品用MAP液悬浮,4℃保存,分6个时间段取样检测红细胞活性、功能。结果上清游离K+、Na+、Hb:盐水组0~35d,MAP组0~28d均符合标准[1];pH:MAP组<盐水组<对照组(P<0.01);ATP:盐水组与对照组下降趋势基本一致(P>0.05),35d时分别保留70.8%和66.9%,而MAP组自保存7d起低于盐水组、14d起低于对照组(P<0.01),至35d时仅保留27.8%;2-3-DPG:MAP组下降速度明显大于盐水组和对照组(P<0.01),7d时下降了92.5%;洗涤效果:盐水组红细胞回收率83.1%,白细胞清除率84.5%,血浆蛋白清除率98.9%,细菌试验阴性。结论盐水、MAP对红细胞膜基本无损伤;但较之盐水洗涤,MAP洗涤不适于WRC持续保存;盐水洗涤后WRC可在4℃继续保存21d。     

丙型肝炎病毒抗体酶联免疫试验S/CO比值与补充试验阳性的相关性研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）是1989年被发现的，1990年美国第一代抗-HCV酶联免疫吸附试剂（EIA）获得美国食品药品管理局（FDA）批准，目前第三代试剂的灵敏度和特异性都有很大提高。我国的抗-HCV诊断试剂自1993年面世以来，经广大科技工作者和生产单位努力，经过国家“八五”、“九五”攻关，其质量也不断改进。     

不同程度溶血对抗-HCV EIA试剂检测结果的影响

血液检验常会遇到溶血的标本,文献报道国产酶免HB-sAg试剂检测溶血标本时可造成假阳性[1,2],溶血也可以使国产抗-HCV试剂检测阴性标本的OD值略高于其相对应的非溶血标本OD值,从而可导致接近临界值者出现假阳性[3]。但以往报道均为对国产试剂的考察,进口试剂是否也有这种现象?此