逆转录病毒载体介导人胰岛素样生长因子-Ⅰ在软骨细胞中的表达

目的 探讨逆转录病毒载体介导人胰岛索样生长因子-Ⅰ(human insulin-like growth factor-I,hIGF-I)体外转染兔软骨细胞后软骨细胞hIGF-I的表达情况及其生物学行为变化.方法 将构建的含有目的 基因的逆转录病毒载体pLNc-IGF-GFP体外转染兔关节软骨细胞,经G418筛选阳性克隆,采用RT-PCR及免疫化学染色检测转染软骨细胞中hIGF-I的表达情况,并在荧光显微镜下观察标记基因GFP的表达情况.采用MTT法、流式细胞仪、免疫细胞化学染色、二甲基驱甲蓝法及ELISA法对转染hIGF-I后的软骨细胞的增殖能力及表型进行检测.结果 G418筛选后获得的软骨细胞阳性克隆,经RT-PCR和免疫细胞化学检测表明hIGF-1基因在mRNA和蛋白质水平得到稳定表达,荧光显微镜下观察转染的软骨细胞可激发出绿色荧光,证明转染成功.转染软骨细胞株的增殖能力、Ⅱ型胶原和蛋白多糖的分泌水平,在转染后6 w内均高于同时间点未转染的软骨细胞,差异具有显著性(P<0.05).结论 逆转录病毒载体能有效地将hIGF-I基因转染至兔软骨细胞并获得稳定表达,同时转染后的软骨细胞增生活跃,能够在较长时间维持软骨细胞表型,为进一步研究软骨缺损的组织工程修复和基因治疗打下基础.     

miRNA-122在异烟肼肝损伤大鼠中的调控机制

目的:探讨miRNA-122在异烟肼致大鼠肝损伤中的调控机制。方法:采用异烟肼55 mg·kg^-1·d^-1连续灌胃3,7,10,14,21,28 d建立肝损伤大鼠模型,对照组给予等容积纯化水灌胃。全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)活性;比色法检测肝组织中MDA含量和SOD酶活力,实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测肝组织中miRNA-122、pri-miRNA-122、HNF4α、C/EBPα、Cycling G1、CAT-1表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Cycling G1、CAT-1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,肝组织病理变化在7 d表现为肝损伤;血浆ALT、AST的水平呈升高趋势(均P<0.01),且均在10 d发生明显上升(P<0.05);各用药组肝组织MDA含量逐渐升高,SOD活力却逐渐下降,miRNA-122表达水平整体呈下降趋势(P<0.01),其上游pri-miRNA-122及转录因子HNF4α、C/EBPα mRNA表达水平整体呈下降趋势(均P<0.01),其下游靶基因CyclingG1、CAT-1的mRNA及蛋白表达水平均呈上升趋势(均P<0.01)。结论:转录因子HNF-4α、C/EBPα 调控miRNA-122低表达,miRNA-122低表达进一步调控其下游靶基因Cycling G1、CAT-1参与异烟肼致肝损伤的过程。     

不同时间点冠心病痰瘀互结证与非痰瘀互结证舌诊参数的比较研究

目的在不同时间点通过舌诊仪对冠心病痰瘀互结证患者舌象进行测量,为冠心病痰瘀互结证的中医辨证诊断提供客观化依据。方法选择符合纳入标准的研究对象,采用舌诊仪对舌苔颜色、舌苔面积、齿痕、瘀斑、裂纹、点刺相关的10个指标进行采集与分析。首先比较冠心病痰瘀互结证、非痰瘀互结证患者入院当天(第0天)与健康人舌象的指标;然后对入院治疗的冠心病痰瘀互结证与非痰瘀互结证患者在第0、5、10天舌象指标进行比较。结果共采集149例患者,排除不符合纳入标准的8例,最终纳入141例,其中痰瘀互结证83例,非痰瘀互结证58例,另设置健康人组22例。对其中39例(痰瘀互结证组24例,非痰瘀互结证组15例)进行了3个时点的重复测量。冠心病痰瘀互结证组与健康人组比较,舌苔面积、舌苔G值、齿痕数量、齿痕面积、裂纹数量、裂纹长度、瘀斑数量、瘀斑面积、点刺数量、点刺面积差异有统计学意义;冠心病痰瘀互结证组与非痰瘀互结证组比较,齿痕数量、齿痕面积、瘀斑数量、瘀斑面积、点刺数量、点刺面积差异有统计学意义,但相同证候类型患者舌象指标在3个时点比较,除痰瘀互结证组点刺数量、点刺面积外,其余指标差异均无统计学意义。结论舌诊参数提供了中医诊断客观化、量化的指标,可以作为诊断冠心病痰瘀互结证的参考依据。     

针刺左侧侠溪穴对大脑中动脉血流速度及PI、RI的影响

目的:观察针刺左侧侠溪穴对大脉中动脉(MCA)血流速度及PI、RI的影响,建立基本数据库,为临床安全使用该穴提供参考数据。方法:选取30名健康青年,分为男、女两组进行实验,通过经颅多普勒超声仪(TCD)记录针刺左侧侠溪穴时双侧大脑中动脉在针刺前5 min,进针时,留针15 min,留针30 min,出针时,出针后5min的收缩期最大血流速度(Vs)、平均血流速度(Vm)、舒张期最大血流速度(Vd)、阻抗指数(RI)及搏动指数(PI)的变化。结果:针刺左侧侠溪穴,男性双侧MCA在进针时、留针15 min的Vs、Vd、Vm均较进针前5 min增高,且左侧较右侧变化明显,持续时间长。双侧PI、RI值无显著变化。女性双侧MCA的Vs、Vd、Vm在各个时间点均无显著改变,仅左侧参数较右侧略有升高。双侧PI、RI值差异无统计学意义。结论:针刺左侠溪穴对男性双侧MCA的血流速度有增加作用。未引起女性双侧MCA血流速度的变化,且对血管的顺应性及弹性无影响。     

NADH通过SIRT1/Nrf2通路缓解小鼠抗结核药物性肝损伤及凋亡

目的 探究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)通过SIRT1/Nrf2通路调控小鼠抗结核药物性肝损伤和凋亡的机制。方法 将24只6周龄SPF级雄性小鼠按体质量随机分成4组：ADLI组[90 mg/(kg·d)异烟肼+135 mg/(kg·d)利福平+315 mg/(kg·d)吡嗪酰胺灌胃]、对照组[与抗结核药物性肝损伤(ADLI)组等体积生理盐水灌胃]、NADH组(对照组基础上应用30 mg/kg NADH灌胃)和NADH干预组(ADLI组基础上应用30 mg/kg NADH灌胃),每组6只，连续灌胃7 d,收集血清和肝组织。qRT-PCR法和Western blot法分别检测SIRT1/Nrf2通路中的沉默信息调节因子1(SIRT1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和凋亡相关指标B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、人胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA和蛋白表达情况；HE染色法观察小鼠肝脏组织形态；称取小鼠肝脏质量，将其质量除以体质量获得肝脏指数；微板法检测肝损伤指标谷氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平...     

阿尔茨海默病相关认知障碍患者营养不良影响因素初步分析

目的分析阿尔茨海默病相关认知障碍患者营养风险/不良的影响因素, 并进一步分析此类患者营养状况与痴呆精神行为症状(BPSD)严重程度的相关性。方法连续性收集2021年6月1日至2022年8月31日首都医科大学附属北京天坛医院阿尔茨海默病生物标志物与生活方式研究队列中的247例阿尔茨海默病相关认知障碍患者的临床资料。根据微型营养评定量表(MNA)评分将患者分为营养良好组(128例)和营养不良组(119例)。采用假设检验和单因素Logistic回归分析比较2组患者在性别、入组年龄、体重指数、腰臀比、受教育年限、是否有嗅觉减退、是否合并≥2种慢性疾病、胃肠道疾病史、是否有BPSD以及在简易精神状态检查量表(MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、神经精神问卷(NPI)、日常生活活动能力评定量表(ADL)、照料者负担量表(CBI)评分和膳食多样化评分(DDS)得分上的差异。将单因素分析中差异有统计学意义的指标纳入多因素Logistic回归分析, 进一步分析阿尔茨海默病相关认知障碍患者营养不良的独立影响因素。采用Spearman相关分析检验NPI评分与MNA评分的相关性。结果与营养良好组相比...