热毒宁注射液化学成分研究(Ⅱ)

目的研究中药复方热毒宁注射液化学成分。方法综合应用硅胶、ODS、Sephadex LH-20和Toyopearl HW-40柱色谱以及反相MPLC、HPLC等现代色谱技术进行分离和纯化,根据化合物的光谱数据和理化性质鉴定化合物结构,并通过观察细胞病变效应(CPE)和检测细胞存活率的方法,对分离得到的咖啡酰奎宁酸类化合物进行了体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)作用研究。结果从热毒宁注射液中分离得到16个化合物,分别鉴定为5-O-咖啡酰奎宁酸(1)、5-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(2)、4-O-咖啡酰奎宁酸(3)、4-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(4)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸(5)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(6)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(7)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(8)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸(9)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸甲酯(10)、断马钱子酸(11)、马钱子苷半缩醛内酯(12)、7-表-马钱子苷半缩醛内酯(13)、E-aldosecologanin(14)、Z-aldosecologanin(15)、5H,8H-pyrano[4,3-d]thiazolo[3,2-a]pyridine-3-carboxylic acid(16)。化合物1~10具有较强的体外抗RSV的效果,其中化合物1~4的EC50值在10~30μmol/L,选择指数(SI)大于30;化合物5~10的EC50值小于10μmol/L,SI大于100。结论化合物1~16均为首次从热毒宁注射液中分离得到,咖啡酰奎宁酸类化合物可能为热毒宁注射液抗病毒的主要药效物质基础之一。     

亚高温热疗联合多西紫杉醇对人乳腺癌细胞增殖的影响

目的 观察亚高温热疗联合多西紫杉醇化疗是否具有协同抗肿瘤效应,并探讨其作用机制.方法 首先采用MTT法观察多西紫杉醇对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖的影响,并筛选出有效浓度.将体外培养的MCF-7细胞分为空白对照组、多西紫杉醇组及热疗+多西紫杉醇组,热疗+多西紫杉醇组又根据热疗温度(包括39.0℃、39.5℃、40.0℃、40.5℃、41.0℃)不同细分为5个亚组.各组MCF-7细胞分别经相应干预后,利用流式细胞仪检测上述各组细胞凋亡情况及对细胞生长周期的影响.采用Western blotting技术检测各组细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)蛋白、凋亡基因Bcl-2、Bax蛋白、热休克蛋白70(HSP-70)及多药耐药基因(MDR)产物P糖蛋白(P-gp)表达情况.结果 热疗联合多西紫杉醇干预可促进MCF-7细胞凋亡增加,如41.0℃热疗+多西紫杉醇组凋亡率[(37.12±6.73)％]显著高于多西紫杉醇组凋亡率[(19.16±3.42)％];热疗联合多西紫杉醇干预可诱导MCF-7细胞生长周期停滞在G2/M期,如41.0℃热疗+多西紫杉醇组G2/M期细胞比例[(38.18±4.72)％]显著高于多西紫杉醇组[(26.63±4.08)％].热疗+多西紫杉醇组MAPK通路蛋白表达较多西紫杉醇组显著增强,Bcl-2蛋白表达则明显降低,而Bax蛋白表达有轻微升高.热疗+多西紫杉醇组细胞热休克蛋白70(HSP-70)、P-gp蛋白表达均较多西紫杉醇组明显增强.结论 亚高温热疗联合多西紫杉醇干预能抑制人乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,具有协同抗肿瘤效应,其治疗机制可能与激活细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38蛋白有关,另外亚高温热疗联合多西紫杉醇干预能增强MCF-7细胞HSP-70及P-gp蛋白表达,这可能会导致肿瘤细胞化疗耐药性产生.     

角质细胞生长因子对1C6细胞和4C18细胞的促增殖作用

目的观察角质细胞生长因子(KGF)对胸腺上皮来源1C6细胞和4C18细胞的促增殖作用。方法鼠胸腺上皮髓质和皮质来源的1C6细胞、4C18细胞和鼠腹腔巨噬细胞来源的RAW细胞,分别经含不同浓度(25、50、100、200、400、800ng/ml)的KGF和不含KGF的完全培养液(对照组)作用24、48和72h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖率,并绘制细胞增殖率曲线。结果 MTT法检测显示,在低浓度(200ng/ml)时,1C6细胞增殖率随KGF浓度增加不断升高;KGF浓度为200ng/ml时,1C6细胞增殖率达最高值;在高浓度(200ng/ml)时,1C6细胞增殖率随KGF浓度的增加逐渐下降;与对照组比较,浓度为100、200、400ng/ml的KGF分别作用24、48和72h对1C6细胞均具有明显的促增殖作用(均P0.05)。在低浓度(100ng/ml)时,4C18细胞增殖率随KGF浓度增加不断升高;KGF浓度为100ng/ml时,4C18细胞增殖率达最高值;在高浓度(100ng/ml)时,4C18细胞增殖率随KGF浓度的增加逐渐下降;与对照组比较,浓度为50、100、200、400ng/ml的KGF分别作用24、48和72h对4C18细胞均具有明显的促增殖作用(均P0.05)。但不同浓度的KGF对RAW细胞均未见促增殖作用。结论 KGF对胸腺上皮来源的1C6细胞和4C18细胞均具有明显的促增殖作用。     

丙型肝炎病毒阳性血清体外感染人肝细胞的研究

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)抗体(Ab)阴性,HCV-RNA阳性血清建立体外感染肝细胞模型.方法 HCV Ab阴性,HCV-RNA阳性的窗口期血清与人肝细胞共同培养,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色、Western blot、共聚焦显微镜和透射电镜等方法检测细胞内HCV核酸复制、蛋白质表达及超微结构改变.结果 细胞与病毒共同培养7～45 d,细胞内和/或培养上清中可间断检出HCV正、负链RNA;细胞浆内有HCV 核心和NS3抗原的表达;细胞超微结构有改变,并于感染后第24天时观察到类似病毒样颗粒.结论 窗口期血清中的HCV能在人肝细胞7701中复制一段时间.     

肝静脉与门静脉的解剖及其在经颈静脉肝内门体分流术中的应用

目的：探讨肝静脉与门静脉的解剖及在经颈静脉肝内门体分流术（TIPS）中的应用。方法：在PUBMED、CNKI及维普等数据库中,查阅近年来国内外有关肝静脉、门静脉的正常解剖与变异及其在TIPS中应用的文献,进行分析总结。结果：肝静脉系统主要由肝右静脉、肝中静脉、肝左静脉3支组成,肝左静脉发生变异最多,肝中、右静脉变异相对少见。门静脉在肝门处进入肝脏,以分为左支和右支两主干这一类型居多,其解剖形态因地区、种族等因素而有差异。肝静脉和门静脉呈向后向上与向前向下的空间关系,经典TIPS是从肝右静脉距下腔静脉入口约2cm处向门静脉分叉部或右支内穿刺建立分流道。结论：肝静脉、门静脉的正常解剖与变异及其空间关系对顺利完成TIPS的操作至关重要。熟悉肝静脉、门静脉正常解剖和变异可提高TIPS的成功率,减少和避免并发症的发生。     

雌激素缺乏导致的骨质疏松发病过程中骨髓间充质干细胞FasL表达降低对CD4+T淋巴细胞凋亡的影响

 目的：研究雌激素在骨质疏松发病过程中导致骨髓间充质干细胞（BMMSCs）Fas配体（FasL）表达降低对CD4+T淋巴细胞凋亡的作用。方法：选用8周龄健康雌性小鼠行双侧卵巢切除术(OVX),建立绝经后骨质疏松模型。选用同一批次周龄相同、体重相近的健康小鼠行双侧卵巢附近脂肪组织部分切除,建立假手术组（sham）,Micro-CT确定模型成功建立。流式细胞术对BMMSCs行表型鉴定,将OVX组、sham组和sham+雌激素刺激组BMMSCs与激活的T淋巴细胞共培养,以Annexin V/7-AAD/CD4流式细胞仪计数3组共培养体系中CD4+T淋巴细胞的凋亡差异,用实时荧光定量PCR和Western blotting检测OVX组、sham组及不同浓度雌激素刺激BMMSCs后FasL的表达情况。结果：流式检测显示sham+雌激素刺激组CD4+T淋巴细胞凋亡程度大于sham组(P<0.05),sham组CD4+T淋巴细胞凋亡程度大于OVX组(P<0.05),实时荧光定量PCR及Western blotting显示OVX组FasL mRNA及蛋白水平表达都较sham组低。在一定范围内不同浓度雌激素刺激下的sham组BMMSCs中FasL mRNA及蛋白表达与雌激素浓度呈梯度上升。结论：雌激素能够调控BMMSCs中FasL的表达,雌激素调控BMMSCs表达FasL能够影响CD4+T淋巴细胞凋亡的改变,这可能与绝经后骨质疏松发病相关。     

化疗及序贯放疗后手术治疗局部晚期食管癌30例分析

目的探讨应用紫杉醇＋顺铂方案化疗及序贯放疗后,再行手术治疗局部晚期食管鳞癌的近期疗效。方法局部晚期食管鳞癌患者30例,应用紫杉醇＋顺铂方案化疗2个周期后,序贯常规剂量分割放疗40Oy,放疗结束4周行食管癌切除＋重建消化道术;评定术前放、化疗疗效,观察放、化疗不良反应及手术切除率、病理客观缓解率、并发症发生率、术后病死率。结果30例均完成术前放、化疗,临床有效率为83．3％;2例不接受手术者继续放、化疗,余28例手术治疗者中1例侵犯主动脉未能切除,27例行根治性切除,手术切除率96．4％;术后并发肺部感染8例,吻合口瘘2例,声音嘶哑1例,吻合口狭窄1例,围手术期死于急性呼吸窘迫综合征1例。结论局部晚期食管鳞癌患者在紫杉醇＋顺铂方案化疗及序贯放疗后行手术治疗,可提高临床有效率和手术切除率。     

96例口服农药自杀患者特征分析及干预

目的 通过对急诊96例口服农药自杀患者回顾性分析,探讨自杀患者性别、年龄等结构特征,为自杀的预防及干预提供依据.方法 收集急诊科2008 年1 月1 日～2009 年12 月31 日收治的96 例口服农药自杀患者,对其性别、年龄、季节分布及原因进行分析,并对相关数据行统计学分析.结果 自杀患者中男性43 例(44.8%),女性53 例(55.2%),发病年龄以19～49.9 岁阶段最多(69 例),与其他年龄组相比差异有统计学意义(P＜0.01＝,发病季节主要分布于6～8月份,自杀原因以家庭纠纷居首位.结论 构建和谐社会,避免家庭矛盾,加强自杀高危人群健康教育,妥善进行农药管理,是预防口服农药自杀的重要措施.     

加强设备配置管理,遏制“以械养医”

本文针对"就医贵"中可能出现的"以械养医"现象进行了分析和探讨,并结合国内外的有效管理经验提出了建议。     

跟骨骨折手术治疗及保守治疗效果评价

目的对比分析手术与保守方式治疗跟骨骨折的临床疗效。方法将88例跟骨骨折患者分为观察组和对照组,各44例,对照组行保守治疗,观察组行手术治疗,比较两组的临床疗效。结果观察组治疗优良率明显高于对照组(P0.05);观察组治疗后Bohler角、Gissane角及跟骨宽度均优于对照组(P0.05)。结论手术方式在跟骨骨折治疗方面价值较高。