蛞蝓胶囊致畸和致突变实验研究

目的 探讨蛞蝓胶囊是否具有致畸和致突变的毒理作用。方法 本研究采用大鼠致畸胎、艾姆斯(Ames)试验、小鼠骨髓细胞微核试验、体外细胞染色体畸变试验检测的蛞蝓胶囊致畸胎、致突变性。结果 蛞蝓胶囊各剂量对孕鼠体重、胚胎早期发育、胚胎生长发育、以及胎鼠的骨骼发育和内脏器官发育等均无不良影响。无论加与不加S9,各剂量组诱变TA98、TA100种菌落数均未超过自然回变菌落数,与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。与对照组相比,各剂量组对小鼠的微核率无明显的影响(P>0.05)。蛞蝓胶囊对培养的哺乳动物体细胞染色体结构无致畸变作用。结论 蛞蝓胶囊各剂量均无致畸和致突变的作用,说明在临床应用剂量范围内是安全的。     

研究生创新能力评估体系的建立

阐述了建立研究生创新能力评估体系的目的与意义 ,建立评估体系的基本思路 ,评估因素、评估指标和评估体系的确定 ,采用模糊数学方法量化研究生的创新能力 ,使评估体系更加客观、便于操作。     

普罗布考对巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶9的抑制作用

通过观察普罗布考对THP 1细胞基质金属蛋白酶 9表达的影响 ,初步探讨普罗布考稳定斑块的分子机制。运用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹、明胶酶图等方法 ,检测氧化型低密度脂蛋白诱导后的人单核细胞 巨噬细胞系THP 1细胞基质金属蛋白酶 9mRNA表达、蛋白分泌和酶活性。实验发现 ,在氧化型低密度脂蛋白 (80mg L)刺激下 ,THP 1细胞基质金属蛋白酶 9的表达和酶活性明显增强 ;予普罗布考 2 0、4 0、6 0 μmol L处理 ,均能在对细胞活性无影响的前提下 ,显著抑制基质金属蛋白酶 9的蛋白分泌量及明胶降解活性 ,且这种作用呈浓度依赖性增强 ,其中 6 0 μmol L的普罗布考抑制基质金属蛋白酶 9的蛋白分泌和明胶降解活性分别达 74 .0 %± 2 .4 %和 4 8.0 %±5 .1% (P <0 .0 5 )。实验结果说明 ,普罗布考能有效抑制巨噬细胞的基质金属蛋白酶 9的蛋白分泌及其活性 ,这一作用可能是其抗动脉粥样硬化和稳定斑块的重要机制之一。     

高原世居藏族健康成人心率及心率变异性分析

目的评价高原世居藏族健康成人心率及心率变异性时域指标的特点。方法对100例高原世居藏族健康成人,75例西宁地区藏族健康成人和100例西宁地区汉族健康成人进行全程24h动态心电图检查,分析心率指标(24h总心搏数、24h最小心率、24h最大心率和每分平均心率)和心率变异性(Heartratevariability,HRV)时域指标(SDNN、SDANN、SDNNindex、rMSSD和pNN50)。结果高原世居藏族健康成人心率指标:24h总心搏数、24h最大心率、每分平均心率均低于西宁地区藏、汉族健康成人。高原世居藏族健康成人的心率变异时域指标rMSSD、pNN50高于西宁地区藏、汉族健康成人。结论高原世居藏族健康成人心率偏慢,世居藏族迷走神经活性略高。     

三磷酸腺苷结合盒转运体A1在泡沫细胞胆固醇流出中的作用

以THB-1细胞源泡沫细胞为研究对象，观察三磷酸腺苷结合盒转运体A1在单核-巨噬细胞源泡沫细胞胆固醇流出中的作用。实验采用流式细胞术检测的方法，来判断三磷酸腺苷结合盒转运体A1激动荆22(R)-羟基胆固醇和抑制剂4，4-二异硫氰酸二丙乙烯2，2-二磺酸(4，4’-diisothiocyanostilbene-2，2’-disulfonic acid,DIDS)对THP-1细胞源泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的影响。实验结果发现，22(R)-羟基胆固醇作用THP-l细胞源泡沫细胞不同时间后，能明显增加细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1的蛋白表达，流式细胞术检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的平均荧光强度从0h的31．1增加到24h的45．2；而DIDS作用THP-1细胞源泡沫细胞不同时间后，能明显降低细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1的蛋白表达，平均荧光强度从0h的29．4降低到24h的10．4。胆固醇流出实验发现，22(R)-羟基胆固醇作用THP-1细胞源泡沫细胞不同时问后，能明显增加细胞胆固醇流出：而DIDS作用THP-1细胞源泡沫细胞不同时间后，能明显降低细胞胆固醇流出。这些结果表明，三磷酸腺苷结合盒转运体A1在THP-1细胞源泡沫细胞胆固醇流出中起着重要的作用。     

替米沙坦对血管紧张素Ⅱ所致血管内皮细胞游离钙离子的抑制作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对细胞钙库的应激效应及替米沙坦对此的拮抗作用。方法预防性实验分组:正常对照组、AngⅡ0.1μmol/L组和替米沙坦60、300、1000μg/L预处理组;治疗性实验分组:正常对照组、AngⅡ0.1μmol/L组和AngⅡ+替米沙坦60、300、1000μg/L组。分别检测各组试验前胞内钙离子浓度,记为0 h。体外培养的人大动脉血管内皮细胞预防性给予替米沙坦60、300、1000μg/L培育30 min后,加入AngⅡ0.1μmol/L;或AngⅡ0.1μmol/L培育30 min后,再加入替米沙坦60、300、1000μg/L,分别于共同作用0.5、2、8和24 h采用激光共聚焦扫描显微镜成像法检测胞浆游离钙离子浓度。结果预防性实验:与正常对照组相比,替米沙坦60、300、1000μg/L作用细胞30 min对胞浆游离钙离子浓度无明显影响,加入AngⅡ0.1μmol/L后,胞浆游离钙离子浓度立即(0 h)显著升高,均显著高于正常对照组(P<0.05),但显著低于AngⅡ组,并且替米沙坦预处理浓度越高抑制作用越强(P<0.05),作用时间对此无影响。治疗性实验:AngⅡ0.1μmol/L先诱导30 min后,再加入替米沙坦60μg/L对升高的胞浆游离钙离子浓度无抑制作用;替米沙坦300μg/L作用2 h或替米沙坦1000μg/L作用0.5 h才显示其抑制作用(P<0.05),但均显著高于同一时间点的正常对照组。替米沙坦的作用时间对此无影响。结论 AngⅡ能诱导内质网钙库向胞浆释放游离钙离子,而替米沙坦能有效拮抗AngⅡ对内质网的应激作用及促使胞浆游离钙离子重新被内质网重吸收。预防性给予替米沙坦的拮抗作用较治疗性给予的拮抗作用显著。     

院前急救对急产产妇并发症的影响分析

目的:探讨院前急救对急产产妇并发症的影响。方法:选取2017年1月至2018年5月本院50例急产产妇作为研究对象,根据是否入院分娩分为已产组和临产组,每组25例,已产组行院外分娩,临产组行院前急救院内分娩,比较两组产妇并发症发生率及总有效率。结果:临产组产褥感染、软产道裂伤及产后大出血等并发症发生率均显著低于已产组,产妇急救总有效率显著高于已产组,两组比较存在显著性差异(P <0.05)。结论:及时有效的院前急救可有效减少急产产妇并发症,提高急救效果。     

动脉粥样硬化靶向性磁共振造影剂的合成及理化特性鉴定

目的 将具有动脉粥样硬化病变靶向性的寡核苷酸适配子与超顺磁性氧化铁颗粒偶联,合成新型靶向性纳米磁共振造影剂。方法 采用壳聚糖共沉淀法包裹Fe3O4;傅里叶变换红外光图谱法判断包裹效果后,与寡核苷酸适配子偶联;聚丙烯酰胺凝胶电泳考察偶联情况;透射电镜法、X射线衍射分析法和MPMS XL-7磁学性质测量法评估其理化性质。结果 壳聚糖包裹形成的超磁性纳米Fe3O4颗粒能高效与寡核苷酸适配子偶联;形成的纳米颗粒粒径为10~20 nm;T2弛豫率为0.284 2×106 mol-1·s-1,质量饱和磁化强度为108 emu·g-1 Fe。结论 超顺磁性氧化铁与具有动脉粥样硬化病变靶向性的适配子偶联,形成的靶向性纳米体系符合磁共振铁造影剂的要求。     

Caveolin-1对胃癌细胞系MGC803细胞生长的影响

目的:研究Caveolin-1对胃癌细胞增殖、分化的影响,以探讨Caveolin-1作为基因治疗的候选基因的可能性．方法:运用基因重组技术,将人全长 Caveolin-1基因稳定转染胃癌细胞系MGC803．建立能稳定表达Caveolin-1的胃癌细胞系．同时建立空载体转染的MGC803细胞系作为空白对照,另用PD98059处理48 h作为阳性对照．以重组细胞系作为研究模型,通过免疫细胞化学及Western blot确认Caveolin-1蛋白在被转染细胞中的稳定表达．运用光学显微镜观察转染前后MGC803细胞形态的变化;另运用细胞计数检测了Caveolin-1对MGC803细胞生长的影响,流式细胞术分析了Caveolin-1对MGC803 细胞周期分布的影响．结果:Western blot结果显示,基因转染组及阳性对照组细胞中Vaveolin-1表达比未处理组细胞中明显增强(P<0．001,q值分别为23．067 与13.3376),且基因转染组中Caveolin-1表达比阳性对照组更强(P<0．00l,q=9．7294);基因转染后的MGC803细胞形态发生明显变化,由异形性明显、核大、胞质很少、核分裂明显变得形态较一致、胞质丰富、核／质比明显变小、核分裂相很少见;基因转染后细胞的群体倍增时间明显延长,由46．67 h延长至65．46 h,差异有统计学意义(P<0．05,q =4．8695):基因转染后细胞周期分布发生了明显变化,G0／G1期细胞数明显增多(P<0．01, q=9．1824),S期细胞数明显减少(P<0．01,q= 7．827),G2／M期细胞数无明显变化(P>0．05), Caveolin-1基因转染组与阳性对照组间细胞周期分布的变化也有明显差异性(其中G0／G1期 P<0．01,q=4．9323;S期P<0．05,q=3．3295)．结论:Caveolin-1既能诱导MGC803细胞分化又能将其阻滞于G0/G1期,通过延长细胞群体倍增时间而抑制胃癌细胞的体外增殖．     

囊泡-囊泡素1在清道夫受体AⅠ转基因小鼠动脉粥样硬化发生中的作用

研究囊泡/囊泡素1与清道夫受体A的相互作用及在动脉粥样硬化发生发展中的作用.将16只正常小鼠随机分为正常对照组和高脂组,16只清道夫受体AⅠ转基因小鼠随机分为转基因组和转基因高脂组.正常对照组和转基因组用基础饲料喂养,高脂组和转基因高脂组用高脂饲料喂养.24周后用免疫组织化学法检测小鼠主动脉血管上囊泡素1的表达,计算机图像分析观察主动脉斑块面积及内膜/中膜厚度,电镜观察囊泡在主动脉内皮细胞膜上的表达.结果发现,高脂组、转基因组、转基因高脂组小鼠的内膜厚度和中膜厚度明显增加,是正常对照组的2～4倍,3组均可见明显动脉粥样硬化斑块形成.正常小鼠主动脉血管表达高水平的囊泡及囊泡素1,而转基因鼠囊泡及囊泡素1表达明显减少.转基因鼠经高脂喂养后,上述表现更加明显.以上结果提示转基因清道夫受体AⅠ小鼠动脉粥样硬化的发生可能与其动脉内皮细胞上囊泡/囊泡素1下调有关.