施万细胞移植对电针损伤大鼠中脑新生髓鞘的影响

背景：髓鞘的再生预示着损伤神经组织的修复状态。目的：观察施万细胞移植于电针损伤的中脑后是否有新生的髓鞘再生。设计：完全随机设计。地点和对象：实验地点为北京市神经外科研究所；研究对象为Wistar大鼠，雌雄不限，体质量(180&;#177;20)g。随机分为单纯电针损伤组和施万细胞移植组，每组18只动物。干预：新生大鼠坐骨神经施万细胞体外培养，5溴-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植至电针损伤的大鼠中脑网状结构。免疫组织化学染色定位后行半薄切片天青-美蓝髓鞘染色，油镜下观察新生的髓鞘。主要观察指标：①移植的施万细胞在脑内的存活时间。②单纯电针损伤组和施万细胞移植组新生的髓鞘。结果：实验过程中单纯电针损伤组死亡5只，施万细胞移植组死亡6只，最终进入分析保持为每组18只。施万细胞移植后8个月仍可见BrdU阳性细胞并主要向大脑皮质迁移；在损伤的脑干区域内1个月就可见新生的髓鞘。结论：施万细胞移植可促进损伤的中枢神经系统再生。     

体外血清预培养促进神经干细胞增殖

背景:神经干细胞的临床应用前景广阔,寻找多种方法体外促进神经干细胞的增殖和分化为今后的发展方向。目的:介绍一种省时且经济的神经干细胞的培养方法。设计:观察对比实验。单位:北京市神经外科研究所。材料:选择4只孕14天Wistar大鼠,常温常湿环境饲养,体质量(180±20)g,均购自中国医学科学院动物所(实验动物许可证号码:SCXK1100-0006)。DMEM/F12(1∶1)以及B27购自Gibco公司;碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子购自PeproTech公司;巢蛋白单克隆抗体、胶质纤维酸性蛋白多克隆抗体、半乳酸脑苷多克隆抗体和微管相关蛋白2单克隆抗体购自Chemicon公司。胎牛血清购自Hyclone公司。方法:实验于2004-05/2004-10在北京市神经外科研究所损伤修复室完成。将Wistar大鼠脱臼处死,每次取4只胎鼠,将其脑组织置于Hank’s液中,解剖显微镜下剥离软脑膜及血管,眼科剪剪碎脑组织并收集细胞于2个离心管中离心,弃上清液。①根据给予血清预培养与否将细胞分成血清预培养组及对照组。血清预培养组细胞加入含100g/L胎牛血清DMEM培养液,培养48h后换含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12培养液;对照组细胞中直接加含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12培养液,37℃,体积分数为0.05的CO2培养箱培养1周。通过相差显微镜观察血清预培养组对照组培养48h后神经干细胞的生长情况。②用100g/L胎牛血清诱导分化后的第5天和第10天行nestin、胶质纤维酸性蛋白多克隆抗体、半乳酸脑苷多克隆抗体和微管相关蛋白2单克隆抗体免疫荧光染色,采用荧光显微镜观察检测两组神经干细胞的表达;对照组采用PBS缓冲液替代一抗,其它步骤同血清预培养组。主要观察指标:①相差显微镜下观察血清预培养组及对照组神经干细胞培养48h后的生长状况。②免疫荧光染色检测两组神经干细胞的表达。结果:①血清预培养组细胞经培养48h后,出现大量较规则的神经干细胞球,多数细胞球由8-10个细胞聚集而成。改用表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12培养液后,细胞球增殖很快;对照组细胞培养48h后只有不规则片状块,4-5d后才出现规则的小细胞球。②荧光显微镜观察可见两组细胞的分化速度和分化方向相同,在诱导分化后的第5天,nestin、胶质纤维酸性蛋白、半乳酸脑苷为阳性,微管相关蛋白2为阴性;在诱导分化后的第10天,nestin和胶质纤维酸性蛋白为阳性,半乳酸脑苷和微管相关蛋白为阴性。结论:血清预培养可使神经干细胞聚球速度加快,促进神经干细胞增殖。     

猫急性脑血管痉挛早期脑血流和脑组织谷氨酸的变化

目的观察猫大脑中动脉(MCA)受机械性刺激痉挛后早期(2h内)的血管直径、脑血流量和谷氨酸变化。方法6只猫开颅暴露右侧MCA,机械刺激MCA30min,测量刺激前后MCA直径的变化,监测皮层脑组织灌流指数,测定脑皮层细胞间隙中谷氨酸浓度的变化。结果机械性刺激MCA后,MCA直径缩小,为刺激前的68·2%。脑组织灌流指数下降到刺激前的48·7%。刺激结束后2h,MCA直径恢复正常。脑组织灌流指数恢复到刺激前的63·8%。机械刺激期间谷氨酸浓度迅速增加,可达到正常值的40倍,在撤除刺激后,谷氨酸浓度没有明显减少。结论机械性刺激可致脑血管痉挛,脑血流量降低,兴奋性氨基酸升高。     

高压氧治疗梅尼埃病的临床观察

梅尼埃病是一种特发性内耳疾病,基本病理病变为膜迷路积水。临床表现反复发作性旋转性眩晕、恶心、呕吐,波动性感音神经性听力损失,耳鸣和耳闷胀感,症状为单侧或双侧,病因不明的一种疾病。临床上在排除了颅脑、颈椎方面的疾病后,综合使用神经营养剂、镇静剂、脱水剂、血管扩张剂,甚至中医中药治疗,但大多数患者效果不满意且易复发。高压氧医学作为现代医学中一门新兴学科,已广泛应用于临床。     

β-catenin蛋白在成人脑干和幕上胶质瘤中的表达及其意义

目的 通过检测β-eatenin蛋白在正常脑组织、脑干和幕上胶质瘤中的表达,探讨Wnt/β-catenin信号转导途径在脑干和幕上胶质瘤发生中的作用.方法 采用免疫组织化学和Western blot方法检测β-catenin在6例正常脑组织、10例Ⅱ级脑干胶质瘤和10例Ⅱ级幕上胶质瘤中的表达.结果 β-catenin在正常脑组织中为胞膜表达,在脑干和幕上胶质瘤中为胞质表达.半定量分析β-catenin电泳条带表明其在三组中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Wnt/β-catenin信号转导途径虽然参与了脑干和幕上胶质瘤的发生,但尚不能认为其是导致脑干胶质瘤患者较幕上胶质瘤患者预后差的决定性因素.     

121例围产儿死亡病例临床分析

[目的]探讨围产儿死亡的主要原因,为制定有针对性的预防措施、有效降低围产儿死亡率提供依据.[方法]对2004年1月～2008年9月我院121例围产儿死亡病例的临床资料进行回顾性分析.[结果]2004年1月～2008年9月我院围产儿死亡发生率为9.26‰,死胎死产原因以先天畸形居首位,早期新生儿死亡原因以早产居首位.[结论]规范产前检查,积极开展遗传咨询、产前诊断,早期发现胎儿畸形,加强高危妊娠管理,减少早产,才能有效降低围产儿死亡率.     

HCMV感染孕妇外周血中胎儿细胞的分离

目的运用不连续密度梯度离心及免疫磁珠分离法分选孕妇外周血中的胎儿有核红细胞。方法取20名人巨细胞病毒抗原血症(pp65)阳性的孕妇外周EDTA抗凝血,经不连续密度梯度离心初步富集、免疫磁珠法分选及胎儿细胞。结果 20名pp65阳性孕妇外周血中分选到胎儿有核红细胞的有16例,10份正常妊娠妇女外周血细胞涂片中发现胎儿有核红细胞数9例。10份未妊娠妇女外周血细胞涂片中均未发现胎儿有核红细胞。结论不连续密度梯度离心及免疫磁珠分离法结合特异性抗体-HbF标记、识别能有效地分选出母血中胎儿有核红细胞,应用于进一步的无创性产前诊断,将有着良好的应用前景。     

乙交酯-丙交酯共聚物/神经生长因子复合支架植入大鼠损伤脊髓后的髓鞘再生

背景:前期体外实验已经证明神经生长因子乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架具有良好的细胞黏附亲和性;同时观察到其随时间推移可稳定释放神经生长因子.目的:将生物可降解材料乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架移植入大鼠脊髓半横断损伤动物模型中,观察其对脊髓损伤髓鞘再生的影响.设计,时间及地点:随机对照动物实验,于2006-05/07在首都医科大学附属北京市神经外科研究所损伤修复实验室完成.材料:乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架材料,其中0.02 g乙交酯-丙交酯共聚物中含有1 μg神经生长因子.方法:45只成年Wistar大鼠制备T8～9脊髓半横断损伤模型,随机分为单纯支架组20只和复合支架组25只,分别移植乙交酯-丙变酯共聚物支架和掺有神经生长因子的乙交酯-丙交酯共聚物支架.主要观察指标:于术后1,4,8和12周进行髓鞘碱性蛋白免疫组织化学及超微结构检测观察髓鞘再生的情况.结果:复合支架组苏木精-伊红染色观察脊髓损伤程度较单纯支架组明显减轻.复合支架组髓鞘碱性蛋白免疫组织化学阳性颗粒明显多于单纯支架组.透射电镜观察复合支架组大鼠新生髓鞘明显多于单纯支架组.结论:乙交酯-丙交酯共聚物联合神经生长因子促进髓鞘再牛的效果优于单纯乙交酯-丙交酯共聚物.     

应用动脉血乳酸评价连续性肾脏替代治疗的效果

目的：探讨进行CRRT治疗的伴急性肾功能不全的多脏器功能衰竭患者治疗前后动脉血乳酸的变化,评估CRRT对高乳酸血症的危重患者的治疗效果。方法：对25例CRRT治疗危重的患者,于治疗开始前、治疗后24h、48h、72h监测患者动脉血乳酸含量,同时检测动脉血pH值,氧合指数,血肌酐等,计算出危重患者APACHEⅡ评分进行分析比较。结果：成活组患者CRRT治疗前后动脉血乳酸含量,动脉血pH值和APACHEⅡ评分进行比较,动脉血乳酸含量和APACHEⅡ评分于治疗后24h有显著性改变。成活组和死亡组患者首次动脉血乳酸和APACHEⅡ评分进行比较,死亡组患者动脉血乳酸和APACHEⅡ评分均有统计学差异。结论：用血乳酸评估应用CRRT治疗患者病情的严重性和预后等同于APACHEⅡ评分,并且更方便快捷。     

Kielland产钳“改良牵引法”用于持续性枕横位低位产钳助产术的研究

目的:探讨改进Kielland产钳助产操作牵引方法。方法:随机选取符合纳入标准的Kielland产钳助产275例,其中145例牵引方法采用"改良牵引法"(研究组),130例牵引方法采用"王历牵引法"(对照组)。比较两组的母婴并发症发生情况。结果:两组产钳助产成功率均为100%。研究组的阴道壁裂伤、产后出血发生率低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05);两组的宫颈裂伤发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。对照组中有3例会阴Ⅲ度裂伤。研究组的面部皮肤损伤发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01);两组的窒息率比较,差异无统计学意义(P0.05),但对照组有1例新生儿颅内出血导致新生儿重度窒息。结论:Kielland产钳"改良牵引法"可减少产钳助产术后的母婴损伤。