冠心病患者循环中EPCs与VEGF的关系及临床意义

目的: 研究冠心病患者循环中血管内皮生长因子(VEGF)与内皮祖细胞(EPCs)的关系及临床意义.方法: 55例入选者均经冠状动脉造影根据有无冠状动脉狭窄而分为两组:冠心病组30例,对照组25例.采集入选者外周血,体外培养扩增内皮祖细胞,7 d后通过倒置相差显微镜计数内皮祖细胞克隆形成单位(EPC-CFU)评估外周血EPC水平,同时用ELISA法检测血浆中VEGF水平,分析冠脉组病人VEGF与EPCs的关系.结果: 冠心病组VEGF水平低于对照组[(19.6±6.9 )pg/mL vs (35.4±9.4)pg/mL,P<0.001)];冠心病组血循环中EPC-CFU数量也较对照组降低(12.4±4.2 vs 19.0±5.1,P<0.001);血循环EPCs数量与VEGF浓度成正相关(r=0.493,P< 0.01).结论: VEGF的下降可能是导致血循环中EPCS的减少的原因,可能参与了冠心病的发生和发展.     

辛伐他汀对高脂血症大鼠氧化应激状态的干预研究

目的：观察高脂血症大鼠氧化应激状态的变化及辛伐他汀对它的影响．方法：40只雄性SD大鼠随机分组,对照组16只给予正常饮食,24只大鼠喂食高脂饲料（30g／kg胆固醇、2g／kg去氧胆酸钠、100g／kg猪油、1g／kg丙基硫氧嘧啶、867g／kg基础饲料）8wk后分为3组：模型8wk组（n=8）,模型16wk组（n=8）继续喂饲高脂饲料,辛伐他汀组（n=8）喂饲高脂饲料并给予辛伐他汀（每日10mg／kg）混悬液灌胃,模型16wk组及对照组给予等体积生理盐水灌胃,各组自由饮水进食．实验8wk分别处死对照组及模型8wk组大鼠各8只．实验16wk处死各组动物．留取血清及左心室组织,测定血清总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,戊二醛（MDA）,谷胱苷肽过氧化物酶（GPx）及过氧化物歧化酶（SOD）活性．结果：与对照组相比,模型8wk组血清总胆固醇升高,血清及心肌组织MDA含量增加,GPx活性降低（P均〈0．05）,但甘油三酯及血清和心肌组织SOD活性没有统计学差异（P均〉0．05）;与模型8wk组相比,模型16wk组胆固醇和甘油三酯继续升高,血清及心肌组织MDA含量增加,SOD和GPx活性降低（P均〈0．05）;与模型16wk组相比,辛伐他汀组胆固醇和甘油三酯均降低（P均〈0．05）,血清及心肌组织MDA含量减少,SOD和GPx活性升高（P均〈0．05）．结论：高脂血症大鼠存在氧化应激,给予辛伐他汀可减轻氧化应激损伤,从而可能减缓动脉粥样硬化的形成．     

转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响

目的 研究转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响,探讨maspin基因抑制胃癌浸润转移的机制.方法 构建 maspin/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株MKN28和SGC7901,用RT-PCR和Western blot检测maspin基因,uPA和uPAR表达的变化.结果 经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒maspin/PCR2.1.成功转染到MKN28和SGC7901细胞中并表达,uPA和uPAR的mRNA和蛋白表达均降低.结论 成功构建了maspin/PCR2.1表达载体,maspin基因可在靶细胞表达,并能抑制uPA和uPAR的表达.     

RNAi沉默survivin基因表达对膀胱癌EJ细胞增殖的影响

目的 通过RNA干扰(RNAi)阻断EJ细胞中survivin基因的表达,研究survivin基因沉默后对细胞生长和细胞凋亡的影响.方法 将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer2.0线性质粒以T4 DNA连接酶连接,重组质粒经酶切、DNA测序鉴定后,用脂质体法转染EJ细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果.MTT法检测细胞生长的影响,流式细胞仪检测转染后EJ细胞的凋亡变化.结果 酶切及测序证实设计合成的DNA片段已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.0-SVV1、pSilencer2.0-SVV2重组载体均能有效地阻断EJ细胞中survivin基因的表达,使survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),后者抑制效果更佳.转染后的EJ细胞生长速度明显变慢.转染pSilencer2.0-SVV2实验组细胞的凋亡增加了17.0%.结论 重组真核载体能有效抑制EJ细胞的survivin表达,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.     

肢体动脉瘤样骨囊肿的手术治疗

目的评价肢体动脉瘤样骨囊肿的手术治疗及疗效。方法总结1991年2月至2004年2月经我院手术治疗的肢体动脉瘤样骨囊肿患者20例,其中男12例,女8例;年龄11~44岁,平均22.1岁。手术方法均采用病损局部开窗配合高速磨钻切刮术,术后腔内用石炭酸、75%酒精灭活。病损切刮术后骨缺损填充采用自体骨10例,异体脱钙骨2例,人工骨4例,骨水泥填塞4例。对于已经发生或可能发生病理性骨折的病损术后采用内固定,对于病损较小,不影响骨骼强度者不用内固定。本组15例行内固定术,5例未作内固定。结果20例患者均未出现感染或皮缘坏死等手术并发症。其中11例获随访,随访时间2~5年,平均2.6年。11例患者病损区植骨均愈合,患肢功能恢复良好,无一复发。结论动脉瘤样骨囊肿采用病损局部开窗配合高速磨钻切刮术,病损腔内灭活,可降低局部复发率。     

益生菌改善孕期应激子代大鼠异常行为和海马损伤

目的：在怀孕期间孕妇极易对外界刺激产生应激反应,影响自身健康和胎儿发育。目前针对孕妇在孕期的应激反应没有很好的治疗方式,本研究旨在探索益生菌对孕期应激子代异常行为和海马损伤的作用。方法：将SD孕鼠分为对照组、应激组、益生菌组,每组6只。对照组不做任何处理;应激组在母鼠怀孕第15～20天进行束缚应激;益生菌组在母鼠怀孕第15～20天进行束缚应激的同时给予双歧杆菌三联活菌胶囊,子代继续给予益生菌饲喂直至生后60 d(P60)。子代大鼠在出生后60～70 d完成旷场实验、高架十字迷宫实验、新物体识别实验和Barnes迷宫实验等行为学检测。采用尼氏染色反映海马神经元受损的情况;免疫组织化学染色检测小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白1(ionized calcium binding adapter molecule 1,IBA-1)的表达,以反映小胶质细胞活化情况;ELISA检测血浆TNF-α、IL-1β的含量;蛋白质印迹法检测Bax、Bcl-2及caspase-3的表达。结果：应激组子代大鼠在旷场中央区滞留时间明显少于对照组(P<0.01),益生菌组在旷场中央区滞留时间明显长于应激组(P&l...     

不同检测系统17项常规生化结果的比对和偏倚评估

目的探讨不同检测系统间常规生化结果的可比性,为不同实验室检验结果的互认和实验室认可提供依据。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的EP9-A2文件,以Modular PPI检测系统为目标,用患者新鲜血清对不同自建检测系统的17项常规生化结果与目标系统进行比对,计算自建检测系统（y）和目标检测系统（x）之间的相对偏差,以美国临床医学检验部门修正法规（CLIA’88）允许总误差的1／2为标准,判断检验结果的可比性。结果自建检测系统1的总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）、1-谷氨酰基转移酶（GGT）、三酰甘油（TG）、总钙（TCa）、无机磷（IP）与目标系统不具可比性,自建检测系统2的白蛋白（Alb）、TBil、DBil、TG、IP与目标系统不具可比性,自建检测系统3的所有17个项目与目标系统均具可比性。结论自建检测系统与目标系统的常规生化结果依项目不同存在不同程度的偏差。当用2个以上的检测系统检测同一检验项目时．应进行方法比对和偏倚评估,以实现检验结果的可比性。     

试论中医阴阳平衡法治疗恶性肿瘤

阴阳失衡,机体内环境稳态的破坏是恶性肿瘤发生、进展的重要原因;调整阴阳的动态平衡是中医治疗肿瘤的重要法则。     

SB328437干预小鼠变应性鼻炎模型的实验研究

目的探讨趋化因子受体3(CCR3)拮抗剂SB328437在小鼠变应性鼻炎模型中的防治作用。方法将30只6～8周BALB/c小鼠随机分为变应性鼻炎组(A组)、SB328437治疗组(B组)和正常对照组(C组),每组10只。以卵清白蛋白(OVA)致敏建立变应性鼻炎模型,B组每次激发前0.5h以SB328437 0.8 mL腹壁皮下注射,10μL滴鼻。比较各组小鼠变应性鼻炎症状评分、鼻黏膜嗜酸性粒细胞(EOS)计数、血清IgE含量以及鼻黏膜CCR3荧光强度。结果A、B、C组的症状评分分别为(7.6±1.9)、(0.7±0.6)和(0.5±0.3)分,A组与B、C组的差异均有统计学意义(P值均<0.01),B组与C组的差异无统计学意义(P>0.05)。A、B、C组的EOS计数分别为7.8±1.8、1.6±0.9和0.5±0.3,A组与B、C组的差异均有统计学意义(P值均<0.01),B组与C组的差异无统计学意义(P>0.05)。A、B、C组血清总IgE分别为(120.59±7.92)、(71.77±6.54)和(18.68±4.76)ng/mL,3组间的差异有统计学意义(P<0.01)。B组鼻黏膜CCR3荧光强度低于A组。结论SB328437可抑制小鼠变应性鼻炎,有可能成为变应性鼻炎免疫治疗的一种新方法。     

铜绿假单胞菌氨基糖苷类药物修饰酶基因研究

目的 调查铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特性及氨基糖苷类药物修饰酶基因表达。方法 用Phoenix^TM-100系统鉴定细菌和药敏试验。用琼脂扩散法检测20株多重耐药铜绿假单胞菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星4种药物的敏感性。采用聚合酶链反应（PCR）扩增4种氨基糖苷类药物修饰酶基因,并使用DNA测序加以证实。结果 190株铜绿假单胞菌对氯霉素、四环素、复方磺胺耐药率最高,均为98．9％;对亚胺培南、美洛培南的耐药率分别为15．3％和6．8％。从20株菌中检出aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和ant（2″）-Ⅰ3种修饰酶基因,阳性率分别为10％、60％和65％,未发现ant（3″）-Ⅰ基因。20株菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素和奈替米星的耐药率分别为35．0％、90．0％、70．0％、60．0％。结论 本地区铜绿假单胞菌对氨基糖苷类药物的耐药与修饰酶基因的传播表达有关。