HP450和CytP450在大鼠急性肝炎中的变化

目的研究四氯化碳、醋氨酚、半乳糖胺诱发大鼠急性肝炎时肝脏微粒体中ＨＰ４５０及ＣｙｔＰ４５０的变化。方法采用［３Ｈ］ｍｅｐｙｒａｍｉｎｅ为放射性配体，利用受体－配体结合技术检测ＨＰ４５０，用差示光谱法检测ＣｙｔＰ４５０，同时采用荧光法检测外周血液中组织胺水平。结果在３种肝毒剂诱发大鼠发生急性肝炎时，大量肝脏微粒体中ＨＰ４５０的水平显著降低，大鼠肝脏微粒体中的ＣｙｔＰ４５０含量也明显下降，ＨＰ４５０和ＣｙｔＰ４５０的降低具有一致性，此外还发现急性肝炎动物血清中的组织胺水平明显高于正常组（Ｐ＜０．０１）。结论大鼠肝脏微粒体中ＨＰ４５０的水平在急性肝炎中显著降低，可能与受体的“下行调节”及肝毒物质降低ＣｙｔＰ４５０有关，检测人体肝脏组织中ＨＰ４５０水平、外周血中ＨＰ４５０的酶促反应中间代谢物、代谢终产物，是否可作为判断人体急性肝炎时肝脏损害程度的一个特异性指标，值得进一步研究与探讨。     

芹菜素抗肺癌SPC-A1细胞增殖和诱导凋亡作用

目的：探讨芹菜素对人非小细胞肺癌SPC-A1细胞增殖和凋亡的影响。方法：体外常规培养人肺癌细胞株SPC-A1细胞,用5~80 μmol·L^-1不同浓度芹菜素作用SPC-A1细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术FITC-Annexin V/碘化丙啶（PI）双标记染色法检测细胞凋亡率。结果：芹菜素对SPC-A1细胞增殖的抑制作用呈时间和浓度依赖性,芹菜素干预24,48,72 h的IC₅₀值分别为319.02,37.23,18.59 μmol·L^-1;Hoechst 33258染色后倒置荧光显微镜下观察可见芹菜素给药后出现细胞数逐渐减少,凋亡细胞核固缩,染色质凝集,着色深而呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示芹菜素可诱导SPC-A1细胞出现不同程度的凋亡。结论：芹菜素能抑制人非小细胞肺癌SPC-A1细胞的增殖和诱导其凋亡。     

溶栓颗粒含药血清对TNF-α损伤血管内皮细胞VEGF表达影响的研究

目的：探讨溶栓颗粒含药血清对TNF-α损伤血管内皮细胞VEGF表达的影响。方法：用TNF-α损伤大鼠脑皮质微血管内皮细胞（BMECs）造模,用含大、中、小剂量溶栓颗粒和中等剂量阿托伐他汀的大鼠血清干预受损的BMECs,应用HE染色观察细胞形态变化,免疫组化法观察血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。结果：TNF-α可以造成BMECs损伤,表现细胞数量下降、皱缩;受损细胞的VEGF表达明显增多。含大、中剂量溶栓颗粒和阿托伐他汀的大鼠血清能减少VEGF表达,阿托伐他汀的这一作用与大剂量溶栓颗粒相当。结论：溶栓颗粒可以减少因炎性介质TNF-α增加而受损的血管内皮细胞的VEGF表达,可能是其减缓动脉粥样硬化形成的作用机制之一。     

红花组分HSYA对人胃腺癌BGC-823移植瘤裸鼠VEGF蛋白、KDR与缺氧诱导因子表达的影响

目的:研究红花组分羟基红花黄色素A(HSYA)对人胃腺癌皮下移植瘤裸鼠血管内皮生长因子(VEGF)蛋白、含激酶插入区受体(KDR)和缺氧诱导因子(HIF-1α)mRNA与蛋白表达的影响。方法:采用BALB/C nu/nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株BGC-823于右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、对照组、HSYA高、低剂量组(0.056g/L、0.028g/L),观察抑瘤作用,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测瘤组织VEGF与HIF-1α蛋白以及血清VEGF蛋白表达;蛋白印迹(Western blotting)法测定瘤组织KDR磷酸化蛋白的表达;实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)法检测瘤组织KDR及HIF-1αmRNA表达。结果:HSYA低剂量组抑瘤明显,该组瘤组织及血清VEGF蛋白表达降低,瘤组织KDR磷酸化蛋白表达减弱,与模型组比较差异明显(P0.05,P0.01);HIF-1α蛋白表达较模型组瘤组织明显减少(P0.01)。KDR mRNA表达与模型组相比减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论:一定浓度的HSYA抑制肿瘤生长的可能机制与抑制VEGF、HIF-1α蛋白的表达,减弱KDR蛋白磷酸化及其基因表达,从而抑制内皮细胞活化阻碍肿瘤血管新生以及降低肿瘤缺氧微环境对血管生成的诱导有关。     

UPLC法测定生、制白术配伍枳术丸中10种成分

目的建立UPLC法测定生、制白术配伍枳术丸中橙皮苷、柚皮苷、芸香柚皮苷、柚皮素、橙皮素、辛弗林、荷叶碱、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ中的含有量。方法枳术丸甲醇提取物的分析采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm);流动相0. 1%甲酸-0. 1%甲酸乙腈,梯度洗脱;体积流量0. 4 m L/min;柱温30℃;283 nm波长下测定橙皮苷、柚皮苷、芸香柚皮苷、柚皮素、橙皮素、辛弗林、荷叶碱、白术内酯Ⅱ;220 nm波长下测定白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ。结果 10种成分在各自范围内线性关系良好(r>0. 999 0),平均加样回收率97. 5%~100. 6%,RSD 1. 89%~3. 16%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于枳术丸的质量控制。     

湖北产石松千层塔烯(serratene)三萜化学成分的研究

目的 对产于湖北随州的石松Lycopodium japonicum的化学成分进行研究.方法 用硅胶、反相硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC多种方法分离纯化,通过理化性质和波谱数据解析化合物的结构.结果 从石松全草的甲醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为21-表千层塔烯二醇(1)、千层塔烯二醇(2)、α-芒柄花醇(3)、serrat-14-en-3β, 21β, 24-triol(4)、3β, 21α-dihydroxyserrat-14-en-16-one(5)、石松三醇(6)、石松四醇(7)、3α, 21β, 24-trihydroxyserrat-14-en-16-one(8).结论 化合物1～8均为千层塔烯(serratene)三萜,为石松属植物中的特征性化学成分.化合物5为该植物中首次分得.     

周边型小肺癌的几个临床问题

我科共手术治疗原发性肺癌 5 87例 ,包括周围型小肺癌 49例 ,其中腺癌 2 9例 ,鳞癌 9例 ,腺鳞癌 3例 ,大细胞癌 2例 ,未分化小细胞癌 6例。pTNM分期 ,Ⅰ期 (T1N0 M0 ) 3 2例 ,Ⅱ期 (T1N1M0 ) 9例 ,ⅢA期 (T1N2 M0 ) 8例。共实行 5 2术次 ,( 3例I期腺癌术后复发二次手术 )。结果鳞癌的 5年生存率优于腺癌和其他组织类型肺癌 ;同组织类型小肺癌比较 ,N0 优于N1,N1优于N2 。既便是早期小肺癌 ,尤其是腺癌 ,预后也不全令人乐观。初步研究结果提示 ,小肺癌并不全是早期肺癌 ,术后的综合治疗仍是不可缺少的。     

甲基转移酶抑制剂抑制弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖及机制研究

目的:探索甲基转移酶抑制剂DCG066对人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞TMD-8的有效杀伤浓度,进而对其作用机制进行研究.方法:通过CCK-8实验探索DCG066对TMD-8细胞的有效杀伤浓度,通过免疫荧光实验分析DCG066处理后TMD-8活细胞及死细胞的分布,通过流式细胞术检测DCG066对TMD-8细胞凋亡的诱导、细胞...     

活血复肾胶囊对慢性肾衰竭大鼠微炎症状态的影响

目的探讨活血复肾胶囊对慢性肾衰竭过程中微炎症状态的影响。方法采用腺嘌呤制作大鼠慢性肾衰竭模型,将大鼠分为3组：正常对照组（A组）10只、模型对照组（B组）10只、活血复肾胶囊治疗组（C组）10只,采用自身对照方法,观察3组大鼠治疗4周前后血肌酐,尿素氮,C-反应蛋白及肿瘤坏死因子的改变。结果B组存在肾功能损害,C-反应蛋白及肿瘤坏死因子明显增高。采用活血复肾胶囊治疗后C组与B组相比,C-反应蛋白及肿瘤坏死因子水平明显下降。结论在慢性肾衰竭大鼠模型中,存在微炎症状态;活血复肾胶囊可能具有调节慢性肾衰竭微炎症状态的作用。     

新生大鼠海马神经元的原代培养与鉴定

目的:探讨建立简便高效的大鼠海马神经元原代培养的纯化方法。方法:(1)离体培养新生24 h内SD乳鼠海马神经元,每天在倒置相差显微镜下进行神经元的形态学观察;(2)MTT法检测培养不同时间段神经元的活力变化,并绘制生长曲线;(3)纯化培养9 d神经元利用免疫荧光染色法检测β-微管蛋白Ⅲ(β-tublinⅢ)的表达率。结果:(1)倒置相差显微镜下观察原代培养的海马神经元,刚分离种植时可见神经细胞为圆形,24 h大多数细胞贴壁,3 d细胞突起增大、增粗,培养5~7 d神经元胞体丰满,突起交织成的网络更密集,培养14~16 d后,神经元开始退化;(2)生长曲线结果发现海马神经元体外培养经历了4个时期,即生长潜伏期、对数生长期、平台期、生长停滞期;(3)经β-tublinⅢ鉴定海马神经元纯度为(93.0%±2.5%)。结论:本实验方法步骤简便,可获得纯度较高的海马神经元,为研究与海马神经元相关的疾病提供了实验基础。