NK4基因重组慢病毒载体的构建及在肝癌细胞中的表达

目的 构建共表达人NK4基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组慢病毒载体,转染人高侵袭转移肝癌细胞LM3(HCCLM3),观察其转染效率及表达情况.方法 采用DNA重组技术,将NK4基因克隆至带EGFP的慢病毒表达载体pLenti6.3-内部核糖体进入位点序列(IRES)-EGFP中,并用脂质体介导法将慢病毒包装系统和带NK4基因的质粒pLemi6.3-NK4-IRES-EGFP共转染293T细胞,包装慢病毒并测定滴度.以不同感染复数(MOI)的重组慢病毒感染293T细胞,筛选最适MOI,以最适MOI重组慢病毒感染HCCLM3细胞,观察转染效率.Western blot法测定细胞中NK4蛋白表达水平.结果 成功构建共表达NK4基因和EGFP基因的慢病毒载体pLenti6.3 -NK4 -IRES-EGFP,并对其包装、纯化及浓缩后测定病毒滴度为1.08×108 TU/mL.重组慢病毒感染HCCLM3细胞筛选其最适MOI为7.转染后HCCLM3细胞中可见明显的NK4蛋白表达,而未转染细胞中无NK4蛋白的表达.结论 成功构建了NK4基因的重组慢病毒载体,有效地转染HCCLM3细胞后可高表达NK4蛋白.     

超短种植体在上颌后牙区骨量严重不足中的应用

背景：目前大量研究证实短种植体与常规种植体的成功率无明显差异,但对于超短种植体应用在上颌后牙骨量严重不足中的临床效果并不明确。目的：短期观察超短种植体应用在上颌后牙区骨量严重不足中的临床效果。方法：纳入18例上颌后牙骨量严重不足患者,其中男10例,女8例,年龄25-68岁,平均余留牙槽骨高度为3.19 mm,均进行超短种植体植入结合上颌窦内提升治疗。通过用锥形束CT观察种植体修复后12 个月的骨结合能力,以及种植体周围边缘骨水平变化的情况。结果与结论：18例患者均完成12个月随访,植入的21颗种植体均获得良好骨结合,完成义齿修复,均未发生软组织炎症。随访修复后12个月,21枚种植体近、远中边缘骨高度变化分别为(-0.21±0.78),(-0.16±0.55) mm;种植体近、远中边缘骨高度与修复后即刻比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。表明在上颌后牙骨量严重不足的情况中应用超短种植体可取得良好的骨结合,同时能够维持种植体边缘骨量稳定,但仍需长期临床观察。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

腹部开放伤后海水浸泡致犬小肠缺血与缺血再灌注损伤的初步研究

目的 探讨腹部开放伤后海水浸泡致犬肠功能损伤的机制.方法 20只实验犬致伤后随机分为对照组(n=10)和海水浸泡组(n=10).对照组致伤后直接观察,海水浸泡组致伤后立即放人人工配制的海水中.于致伤前(0 h)及致伤后4、8、12、24 h测定实验犬的动脉血压和胃肠黏膜pH值.24 h后取小肠组织测定丙二醛(MDA)、一氧化氮/一氧化氮合酶(NO/NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果 海水浸泡组动脉血压明显下降,4 h后与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).海水浸泡组肠黏膜pH值在4 h后开始下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);12 h升高,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).海水浸泡组肠组织MDA、NO/NOS含量海水浸泡组与对照组比较均显著升高(P<0.05),SOD含量则明显降低(P<0.05).结论 肠道缺血和缺血再灌注损伤可能是海水浸泡导致实验犬肠损伤的原因之一.     

COMBINED DETECTION OF CYCLIN D1, P27 AND DNA CONTENT IN ESOPHAGEAL CANCER

With the development of histological and cytological techniques, the proteins involved in the cell cycle regulation have been observed in the incoordinate growth and proliferation of tumor. Therefore, it is believed that the occurrence and development of tumor are closely related with the disordered regulation of cell cycle, which is performed by positive and negative regulators. The positive regulators include cyclins and the corresponding cyclin dependent kinase (CDK) while the negative one…     

骆驼蓬全草提取物的抗肿瘤作用

目的研究骆驼蓬全草的不同体积分数的乙醇的提取物Ⅰ(alcohol extractⅠ,AEⅠ)、Ⅱ(alco-hol extractⅡ,AEⅡ)和水提取物(water extract,WE)对人宫颈癌细胞Hela和人肺癌A549细胞的抑制作用。方法用体外细胞培养和MTT法检测骆驼蓬全草的不同体积分数的乙醇的提取物Ⅰ、Ⅱ和水提取物对Hela和A549细胞增殖的抑制作用。结果与结论AEⅠ、AEⅡ和WE对Hela细胞的半数抑制质量浓度分别为187.31、195.32、118.50 mg.L-1。AEⅠ、AEⅡ和WE对A549细胞的半数抑制浓度分别为243.76、225.65、123.99 mg.L-1。AEⅠ、AEⅡ和WE对Hela细胞和A549细胞均有抑制作用,其抑制作用的强度与药物质量浓度成正比,同质量浓度下WS的抑制作用最强。     

Interon-gamma enhances the antitumor effect of all-trans retinoic acid on hepatocellular carcinoma cells by inhibiting the expression of nuclear factor-kappaB

Objective： To explore the combination effects of all-trans retinoic acid （ATRA） with interferon-gamma （IFN-γ） on human hepatocarcinoma cell line SMMC-7721 and the mechanism of action. Methods： SMMC-7721 cells were divided into treated group and control group. The cells were treated with ATRA or ATRA＋ IFN-γ in the former and added with PBS in the latter. The inhibition rate of SMMC-7721 cell proliferation was detected by MTT, the cell change in morphology was observed by electron microscope. The apoptosis was detected by flow cytometry and the expression changes of nuclear factor-kappaB （NF-κB） was analyzed by Western blotting when the SMMC-7721 cells were treated with ATRA and IFN-γ. Results： The SMMC-7721 cell proliferation was suppressed and apoptosis was induced after the cells were treated with ATRA treatment, and these effects were enhanced when ATRA was combined with IFN-γ. The expression of NF-κB was reduced after SMMC-7721 cell was treated with ATRA, and reduced significantly when the cells were treated with the combination of ATRA and IFN-γ. Conclusion： IFN-γ can enhance the inhibiting effects of ATRA on cell proliferation and inducing apoptosis on SMMC-7721 cell and these effects might be mediated by inhibiting the expression of NF-κB.     

新生儿肺炎常见病原体及临床特征探讨

目的:探讨新生儿肺炎常见病原体及相关临床特征.方法:回顾性分析720例肺炎患儿的临床资料,对导致肺炎的常见病原体进行探讨,总结患儿临床特征.结果:金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌与阴沟肠杆菌为新生儿肺炎常见的病原体,感染肺炎克雷伯杆菌的患儿体重低,多在出生后的24h内入院.结论:新生儿肺炎常见病原体主要为革兰阴性杆菌,对医院内病原体的传播与感染应做好监督与防控,以期将新生儿感染率降低到最小.     

危重症甲型H1N1流感患者的观察与护理

甲型H1N1流感是一种由新型甲型H1N1流感病毒引起的急性呼吸道传染病,其临床表现与季节性流感相似,重症患者起病急,病情发展迅速,可继发严重肺炎、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）、肺出血、胸腔积液、全血细胞减少、肾功能衰竭、败血症、休克及Reye综合征、呼吸衰竭和多器官损伤等,导致患者死亡（[1]）.     

利用基因芯片筛查大肠癌肿瘤相关基因

目的探讨大肠癌肿瘤相关基因的差异表达。方法采用含有8064个人类靶基因的基因表达谱芯片筛选大肠癌组织同正常大肠黏膜的差异表达基因,并用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对其中4条差异表达基因加以验证。结果大肠癌差异表达基因有1807条,发现上调表达的基因有936条,下调表达的基因有871条,其中癌基因及抑癌基因共57条。这57条基因中,36条基因表达上调．21条基因表达下调。结论大肠癌的发生发展与多个原癌基因及抑癌基因的差异表达有关。     

社区获得性肺炎患者血清及血小板γ-谷氨酰转肽酶活性和总抗氧化力水平的变化

目的观察社区获得性肺炎（CAP）患者血清及血小板γ-谷氨酰转肽酶（GGT）活性和总抗氧化力（T-AOC）水平的变化。方法以徐州医学院附属医院呼吸科2010年9月至2011年9月收治的90例CAP患者和30例体检健康者为研究对象。CAP患者根据外周血血小板计数分为继发血小板增多组（血小板计数〉300×10^9／L）40例和血小板不增多组（血小板计数≤300×10^9／L）50例。检测研究对象的血清GGT、T-AOC及血小板GGT、T．AOC的水平。结果CAP患者人院时血清GGT活性和血小板GGT活性[（45．6±25．4）U／L;（179．9±41．3）mU／10^9pit]均较对照组[（17．9±3．7）U／L;（49．5±8．0）mU／10^9pit]高;血清T—AOC入院时[（12．6±1．6）U／mL]比对照组[（17．8±2．1）U／mL]低;血小板T-AOC入院时[（61．6±21．5）mU／10^9plt]高于对照组[（48．6±9．9）mU／10^9plt];血小板T-AOC出院时[（40．7±14．2）mU／10^9plt]比入院时[（61．6±18．3）mU／10^9plt]和对照组[（48．6±9．9）mU／10^9plt]均低,差异均有统计学有意义（P〈0．05）。血清T．AOC血小板增多组[（12．9±1．1）U／mL]比血小板不增多组[（12．3±1．7）U／mL]高;血小板T—AOC血小板增多组[（53．0±12．0）mU／10’plt]比血小板不增多组[（68．6±19．7）U／10^9plt]低,血清GGT血小板增多组[（52．5±31．6）U／L]比血小板不增多组[（39．7±15．8）U／L]高,血小板GGT血小板增多组[（166．4±39．3）mU／10^9plt]比血小板不增多组[（190．6±39．9）mU／10^9plt]低,差异均有统计学意义（P均〈0．05）。人院时血小板计数与血小板T-AOC、GGT呈负相关,相关系数分别为-0．316（P=0．003）,-0．308（P=0．002）。结论在炎症反应过程中血小板活化与氧化应激有关;血小板在炎症反应过程及维持氧化抗氧化平衡中发挥作用。