江西省丙型肝炎病毒的基因型分布

目的：探讨江西地区HCV基因型分布。方法：限制性片断长度多态性分析（RFLP）分析89例HCV－RNA阳性病人HCV的基因型。结果：89例HCV－RNA阳性中,HCVⅡ型81例,占91．01％（81／89）;HCVⅢ型7例,占7．87％（7／89）;HCVⅡ／Ⅲ混合型1例,占1．12％（1／89）。HCVⅡ型81例中,急性丙型肝炎5例,慢性丙型肝炎75例,占92．6％,肝功能正常,HCV慢性携带1例。HCVⅢ型7例中,急性丙型为3例,慢性再型肝炎4例,占57％,HCVⅡ／Ⅲ混合型1例,为急性丙型肝炎。结论：江西省丙型肝炎基因基以Ⅱ型为主,占91．1％,与HCVⅢ相比较,HCVⅡ型感染与慢性肝炎有更密切关联。     

膀胱癌高危乳头瘤病毒定位研究及临床意义

目的：进一步探讨高危ＨＰＶ１６、１５与膀胱癌的病因学关系。方法：运用改良的原位杂交技术对５２例福尔马林固定石蜡包理膀胱乳头状移行细胞癌组织进行高危ＨＰＶＤＮＡ定位检测。结果：ＨＰＶ ＤＮＡ的阳性信号存在于肿瘤细胞核内,呈点状,也可为点片状,位于乳头癌全层,癌旁不典型增生上皮、癌旁正常的上皮组织及Ｂｒｕｎｎ氏巢可同时有高危ＨＰＶ的点片状表达。５２例膀光乳头状移行细胞癌中高危型ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ阳     

顺行和逆行取栓对静脉瓣膜及血管壁的影响

目的：比较顺行取栓与逆行取栓在猪腋静脉急性血栓形成对于其瓣膜功能和静脉壁形态的影响。方法：分别结扎猪的腋静脉的近远端,于结扎段内注入凝血酶原,放置６ｈ使形成血栓。随机分配为顺行取栓和逆行取栓组,对血栓段进行取栓。取栓后２４ｈ行取栓静脉插管逆行造影以评估瓣膜功能;切取此段静脉作ＣＤ８＾＋细胞免疫组化和苏木精－伊红（ＨＥ）染色以对比血管内膜及平滑肌的损伤程度。结果：逆行与顺行取栓在所有的例数中都成功地     

Ⅰ、Ⅱ期原发乳腺癌肿瘤浸润距离的前瞻性研究

对 2 4例 、 期原发乳腺癌进行研究 ,通过自肿瘤缘至乳头中心每隔 0 .5 cm作切片 ,确定肿瘤浸润距离 ,观察到肿瘤大小 ,肿瘤分期与浸润距离无明显相关关系。同时通过肿瘤位置与乳头浸润关系的研究 ,研究结果表明肿瘤位置距乳头越近 ,乳头受累机率越大 ( P<0 .0 5 )。 、 期乳腺癌肿瘤浸润距离均局限在 2 .5 cm以内。临床手术中无需过分扩大手术切除范围 ,应根据肿瘤浸润距离及肿瘤与乳头的位置关系采用不同的术式。     

新城疫病毒NP蛋白的真核表达载体的构建

目的 研究新城疫病毒核衣壳蛋白基因的生物学作用及其抗人喉鳞癌的作用。方法 利用含有新城疫病毒Ｖ４株核衣壳蛋白基因ｃＤＮＡ的原核质粒ｐＵＶＮＰ４及真核质料ｐｃＮＤＡ３,采用基因重组技术构建了含有ＣＭＶ含动子、ＢＧＨｐｏｌｙＡ信号序列的表达新城疫病毒核衣壳蛋白的真核表达质粒。结果 酶切分析表明重组质粒中含有新城疫病毒Ｖ４株核衣壳蛋白基因。结论 重组质粒为表达新城疫病毒核衣壳蛋白基因的真核质粒。     

丙型肝炎病毒基因Ⅱ型感染对干扰素治疗的应答反应

对31例丙肝病人进行基因分型及干扰素治疗.其中27例HCV基因Ⅱ型感染病人治疗结束时的应答率为92.6%(生化)及63%(病毒),一年的稳定应答率为26%(生化及病毒学),不应答率为8.4%.结论:国人HCVⅡ型感染对干扰素治疗有良好的近期应答,如何提高稳定应答率,减少复发是临床研究应注意的问题.     

鼠源性单克隆抗体F(ab′)2片段制备工艺

目的制备符合临床应用质量标准的鼠源性mAb F(ab′)2片段.方法采用胃蛋白酶消化小鼠腹水抗体,疏水作用色谱法纯化F(ab′)2片段的新工艺,替代原有的木瓜蛋白酶消化IgG,阴离子交换色谱法纯化的旧工艺.结果新工艺所制备的F(ab′)2 片段经SDS-PAGE检测纯度达98%以上,ABC免疫组化法测定免疫活性为1∶8000,回收率大于 50%,核酸含量及热原均合格,整个工艺流程可在48 h内完成.结论新工艺制备人用鼠源性mAb F(ab′)2片段更简便高效、安全实用,能够适应中试放大及大规模生产的要求.     

PEG6000沉淀结合差速离心方法浓缩水中脊髓灰质炎病毒

建立一种简便,有效的从细菌培养物中纯化ＰＶ１病毒的方法用于水病毒消毒实验。方法ＰＶ１Ｈｅｎａｎ株在Ｈｅｐ－２细胞中增殖后用聚乙二醇６０００沉淀结合差速离心的方法纯化病毒,ＲＴ－ＰＣＲ和透射电镜鉴定提纯病毒的形态学和分子生物学特性。结论ＰＥＧ６０００结合差速离心的方法较之蔗糖密度梯度区带离方法易于操作且比单独ＰＥＧ沉淀有更高的纯化系数,是一种简便,有效的方法。     

多重聚合酶链反应快速检测脑膜炎中的病原体

目的 建立脑膜炎多重PCR检测系统,以在一次扩增中快速、特异地同时检出新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌,用于脑膜炎病原体感染的快速诊断。方法 根据新型隐球菌URA保守序列、脑膜炎双球菌基因组中特定的H.8外膜蛋白基因序列、结核分枝杆菌基因组中的IS986插入基因序列片段,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用多重PCR技术,同时检出脑脊液中的新型隐球菌、结核杆菌、脑膜炎双球菌。结果 应用多重PCR反应体系,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果：我重PCR扩增的预期结果为：单一菌感染出现一条特异性扩增区带;混合感染应出现2条或3条特异性扩增区带,经实验达到预期的扩增结果;对15份已明确诊断的脑脊液标本,分法均能扩增出预期的目的片段。符合率达100%,对20例临床脑脊液标本的PCR扩增结果分别为：新型隐球菌15%（3/20）、结核肝菌20%（5/20）、脑膜炎双球菌10%（2/20）。结论 多重PCR有效地为临床病原体的混合感染,以及原因不明的脑膜炎患的快速诊断,提供了快速、准确的诊断手段。有效地减少了脑膜炎的误诊和漏诊,更提高了检验效率。     

乳腺病变组织中BcL-2,p53蛋白的表达

目的　观察 Bcl- 2 ,p5 3蛋白在浸润前系列乳腺病变(包括正常乳腺组织、导管增生、不典型导管增生、小叶增生、导管原位癌 )组织中的表达 .方法　采用免疫组化方法检测15例正常乳腺组织、18例导管增生、10例不典型导管增生(atypical ductal hyperplasia,ADH)、10例小叶增生 ,45例导管原位癌 (ductal carcinoma in situ,DCIS)的 Bcl- 2和 p5 3蛋白的表达 .结果　 Bcl- 2蛋白在正常乳腺组织、导管增生、ADH、小叶增生组织中均阳性 ,而 p5 3蛋白染色阴性 .DCIS病例中 ,Bcl- 2蛋白表达阳性 34例 (76 % ) ,而 p5 3蛋白阳性 11例(2 4% ) .Bcl- 2蛋白表达与 DCIS组织学分级密切相关 (P<0 .0 1) ,6 7% DICS病例表现为 Bcl- 2 + / p5 3-表达表型 ,还有33%不同于正常的表型 (包括所有 Bcl- 2 - / p5 3+表型 )多代表差分化病例 .结论　 Bcl- 2蛋白在正常乳腺组织、导管增生、ADH、小叶增生组织中均有表达且高于乳腺 DCIS.大部分DCIS病例表现为 Bcl- 2 + / p5 3-表型 ,与正常乳腺上皮、良性增生病变一致