LC-MS/MS法同时测定人尿液中5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶浓度及其尿药排泄研究

目的:建立5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶尿药浓度的LC-MS/MS同时测定方法,研究胃癌患者口服替吉奥胶囊后其活性代谢物5-氟尿嘧啶和增效剂吉美嘧啶的人体尿药排泄特征.方法:尿液样品酸化后用异丙醇-乙酸乙酯(15:85)提取,采用Hedera ODS-2色谱柱分离,流动相为甲醇-0.01%的乙酸水溶液(35:65);质谱采用电喷雾离子源和负离子多反应离子监测方式.6名胃癌患者单次口服替吉奥胶囊60mg后,测定尿药浓度,评价其尿药排泄特征.结果:5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶的最低定量下限分别为0.15μg·mL-1和0.10μg·mL-1;高、中、低浓度的日间与日内精密度均小于15%.6名胃癌患者单次口服替吉奥胶囊后尿液中5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶的平均累积排泄率分别为4.9%和18.1%.结论:建立的LC-MS/MS分析方法适用于尿药排泄研究.     

靶向结缔组织生长因子shRNA慢病毒表达载体的构建及病毒包装

目的构建靶向结缔组织生长因子（CTGF）的shRNA慢病毒载体并检测其介导的RNA干扰（RNAi）对人视网膜色素上皮细胞（ARPE-19）CTGF表达的影响,为进一步研究CTGF在增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）中的功能奠定基础。方法设计并合成三对针对CTGF的siRNA,通过WesternBlot筛选有效靶点,合成有效靶点的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与线性化的pGC-LV-GFP载体连接,通过PCR筛选阳性克隆并进行DNA测序鉴定;将重组CTGFshRNA的质粒与病毒包装的辅助质粒共转染295T细胞,将包装产生的慢病毒感染ARPE-19细胞,WesternBbt检测CTGF的表达。结果通过双酶切和基因测序证实靶向CT-GF的shRNA慢病毒载体构建成功,Western Blot证实经慢病毒感染后的ARPE-19细胞中的CTGF的蛋白水平明显减低。结论成功构建了靶向CTGF的shRNA慢病毒表达载体,体外感染ARPE-19细胞可有效降低CTGF蛋白的表达,为深人研究CTGF在PVR中的功能提供了有力的工具。     

我院国家基本药物应用情况分析

目的:促进我院国家基本药物的应用。方法:对我院2010年国家基本药物品种覆盖率、使用金额及比例等进行统计、分析。结果:我院2010年国家基本药物品种覆盖率、使用金额及比例均偏低,但使用金额及比例呈增长趋势。结论:我院国家基本药物应用正逐步规范化,但远未达到国家要求,还有待进一步推广。     

甲磺酸胺银杏内酯B的大鼠胚胎-胎仔发育毒性实验研究

目的：在器官发生期对怀孕大鼠连续给予甲磺酸胺银杏内酯B,观察是否有母体毒性和胚胎毒性。方法：甲磺酸胺银杏内酯B以250、125、62．5mg·k^-1于妊娠第6～15天连续口服灌胃给药,观察孕鼠饮水、摄食、生长等一般状况。每周称重2次,妊娠第20天处死孕鼠,记录黄体数、胎盘重、着床数、死胎数、活胎数、胎仔性别及体重等,观察活仔外观异常。各窝1／2胎仔作骨骼畸形检查,另1／2胎仔作内脏检查。结果：甲磺酸胺银杏内酯B原料高、中、低剂量用药组,母体未出现临床中毒症状,但高剂量甲磺酸胺银杏内酯B组后期体重增加幅度明显低于溶剂对照组。高、中剂量组的着床总数、活胎数、吸收胎数、子宫总重、胎盘总重、黄体数、胎鼠顶臀长、胎鼠体重等与对照组相比有明显差异,低剂量组的各项指标未见统计学差异。高、中剂量组的骨骼畸形也较对照组明显增多,而低剂量组与溶剂对照组相比无显著差异。结论：对母体一般状况和子代发育均安全的剂量为62．5mg·kg^-1。     

新型苯并噻唑衍生物YLT322诱导结直肠癌细胞的凋亡作用及机制研究

目的:YLT-322是本实验室合成的一种新型的苯并噻唑衍生物,已有文献证实其可以通过线粒体途径诱导肝癌细胞Hep G2凋亡,对多种癌细胞都有效果。本实验拟通过一系列生物实验来考察YLT-322对结直肠癌细胞的作用。方法:作者对多种癌细胞进行初筛,筛选出两种效果较好的结直肠癌细胞进行细胞毒性试验,平板克隆形成,Hoechst等实验,以证实YLT-322对结直肠癌有良好的抑制作用。结果:YLT-322实验组比对照组的细胞凋亡明显增多,且与剂量和作用时间成正比。说明YLT-322的确对结直肠癌有抑制作用。结论:YLT-322对结直肠癌细胞有诱导凋亡的作用,作为一个新型的小分子抑癌药物,具有很大的开发价值。     

不同职业入伍的新兵社会状况及心理素质的研究

目的 研究不同职业入伍新兵的社会状况和心理素质特点.方法 整群抽取某部2630名集训新兵进行社会状况分析,并应用症状自评量表(SCL-90)、艾森克成人个性问卷(EPQ)、自我和谐量表(SCCS)、简易应对方式问卷(CSQ)、社会支持量表(SSRS)进行心理调查.结果 收回有效问卷2599份,城镇入伍、双亲家庭、高中以上文化、主动入伍、要求进步的新兵中入伍前职业是学生者较多;农村入伍、单亲家庭、初中以下文化、被动入伍的新兵中其他职业入伍者较多(P<0.05).SCL-90:学生新兵强迫、人际关系敏感、抑郁、焦虑、敌对、精神病性因子得分低于其他职业新兵(P<0.05,P<0.01);EPQ:学生新兵内外向因子得分高于其他职业新兵,而神经质和精神质得分低于其他职业新兵(P<0.01);SCCS:学生新兵自我不和谐、自我刻板性因子得分低于其他职业新兵,而自我灵活性得分高于其他职业新兵(P<0.01);CSQ:学生新兵积极应对得分高于其他职业新兵(P<0.01);学生新兵SSRS各因子得分均高于其他职业新兵(P<0.01).结论 学生新兵心理素质较好,可塑性强,入伍前职业是影响新兵心理素质的重要因素之一;新兵入伍后应结合入伍动机、目的、家庭状况,从自我和谐、积极应对、主动寻求支持等方面加强新兵的个性塑造.     

海洛因对大鼠谷氨酸脱氢酶基因表达的影响

目的:研究海洛因对大鼠谷氨酸脱氢酶(GDH)基因表达的影响。方法:40只成年♂Wistar大鼠随机分为4组:对照组腹腔注射(ip)生理盐水9d;给药3d组ip海洛因3d;给药9d组ip海洛因9d;停药组ip海洛因9d后停药8d。采用生化自动分析系统检测血浆及组织中GDH活性,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测组织中GDHmRNA的含量。结果:血浆中GDH活性在海洛因给药期间逐渐增高,停药8d后仍无明显降低;大脑组织GDH活性在海洛因给药3d、海洛因给药9d及停药8d后均显著低于对照组(P<0·01);肝脏GDH活性在海洛因给药过程中降低(P<0·01),停药8d后恢复到对照组水平;小肠GDH活性在海洛因给药9d后显著高于对照组(P<0·05),停药8d后小肠GDH活性继续升高并明显高于对照组(P<0·01)和海洛因给药9d组(P<0·05)。大脑、肝脏和小肠GDHmRNA含量分别与其GDH活性变化趋势一致。结论:海洛因对大鼠不同组织GDH基因表达影响不同。     

韭子增强非特异性免疫和体液免疫作用的实验研究

目的: 研究中药韭子对机体非特异性免疫作用和体液免疫作用的影响.方法: 建立环磷酰胺所致免疫低下动物模型,采用中性红法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,从而研究对非特异性免疫功能的影响;用溶血空斑形成细胞测定法研究对体液免疫功能的影响.结果: 韭子可有效地纠正免疫功能低下,显著提高巨噬细胞的吞噬功能以及使抗体生成细胞数增多,使两者恢复至正常水平.结论: 韭子可有效地恢复和增强免疫功能低下小鼠的非特异性免疫和体液免疫功能.     

CT平扫在脑静脉及静脉窦早期血栓形成中的诊断价值

目的研究CT平扫在脑静脉及静脉窦血栓（CVT/CVST）中的影像表现,提高对CVT/CVSTCT平扫影像征象的认识。方法回顾性分析10例CVT/CVST患者的头颅CT平扫的影像学表现,并与患者MRI、MRV图像进行对比分析。结果头颅CT平扫可准确诊断大部分的CVT/CVST患者,其特有征象出现率较高,10例病例中,出现条索征7例,静脉性脑梗死3例,脑出血3例,脑梗死合并脑出血的1例,直接征象出现率达70%,间接征象出现率达70%,直接征象及间接征象同时出现达60%。结论 CT平扫对早期CVT/CVST是一种快速、有效、准确的检查方法。     

阿司匹林增加高脂喂养Wistar大鼠胰岛素敏感性和Mfn2mRNA的表达

目的 研究阿司匹林对高脂喂养Wistar大鼠胰岛素敏感性和线粒体功能的影响。方法 24只Wistar大鼠,♂,分为对照组(NC)、高脂组(HF)和阿司匹林组(AF)(n=8),喂养8周后,以高胰岛素-正常葡萄糖钳夹测定大鼠胰岛素敏感性,取空腹血清测定大鼠谷草转氨酶(ALT)、谷丙转氨酶(AST)、高密度脂蛋白(HDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBS),空腹胰岛素(FINS)的水平;将大鼠肝脏组织进行固定、包埋、切片和HE染色,观察肝脏组织学变化;取肝脏组织,测定肝糖原含量;提取肝细胞线粒体并分离线粒体超氧化物歧化酶,测定线粒体超氧化物歧化酶活性(SOD),以及提取肝组织总RNA,应用RT-PCR测定肝脏组织Mfn2 mRNA的表达。结果 与NC组大鼠比较,HF组大鼠肝脏指数、TG、FBS、ALT、AST、INS明显升高(P<0.05),GIR和SOD显著降低(P<0.05),肝脏组织Mfn2 mRNA表达显著降低,肝细胞体积增大,胞质中有脂滴空泡;AF组大鼠上述各指标差异无统计学意义,显微结构无显著变化。结论 阿司匹林可以改善高脂诱导的胰岛素抵抗及抑制脂肪肝的形成,这一作用可能是部分通过促进肝细胞Mfn2表达、改善线粒体功能实现的。