肝细胞培养过程中酸碱度和溶解氧的关联控制

目的在生物型人工肝支持系统(BAL)中,设计一种能够精确控制溶解氧(D0)与酸碱度(pH)的控制方案.方法根据肝细胞培养过程中所需要的物料衡算,采用比例积分(PI)算法结合开关量控制、预测控制等方案,通过工控机构建关联控制系统,使得D0与pH的值相互关联.结果DO控制范围0%～200%,精度达到±5%;pH控制范围6～8,精度达到±0.05.结论经实验证实,本控制方案工作稳定,无静态误差,解决了培养过程中DO与pH相互影响的问题,可用于BAL中对肝细胞培养环境的控制.     

血管紧张素原基因的六种单核苷酸多态与原发性高血压的相关性

目的　研究血管紧张素原 (angiotensinogen,AGT)基因 6个位点的单核苷酸多态及其构成的单倍型与中国汉族人原发性高血压的相关性。方法　采用多重SNa Pshot反应 ,在 185例原发性高血压患者和185名健康对照者中 ,对 AGT基因启动子区域的 G- 2 17A、G- 15 2 A、A- 2 0 C、G- 6 A及第 2外显子的T174 M和 M2 35 T多态进行基因分型。结果　 6种单核苷酸多态的基因型分布及其等位基因频率在原发性高血压组和对照组中差异无显著性 (P>0 .0 5 )。单倍型分析提示由 - 15 2 A,- 2 0 C,- 6 A和 2 35 T等位基因构成的 H4单倍型在原发性高血压组中明显增加 ,与对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论　AGT基因G- 15 2 A,A- 2 0 C,G- 6 A和 M2 35 T多态可能对中国汉族人原发性高血压的发病起了重要作用。     

CVB3-VP1基因免疫诱导特异性抗病毒免疫应答及保护作用

目的 :构建表达柯萨奇病毒B3(CVB3)主要包膜蛋白VP1的基因疫苗 ,并研究该疫苗诱导CVB3特异性免疫应答及免疫保护的作用。方法 :抽提CVB3RNA ,以RT PCR扩增VP1基因 ,克隆于真核表达载体 pcDNA3中 ,构建质粒pcDNA3 VP1。将该质粒转染Hela细胞 ,观察其表达情况 ;以 5 0 μgpcDNA3 VP1质粒DNA肌注免疫BALB/c小鼠 3次 ,检测CVB3特异性体液和细胞免疫应答。间隔 4wk以 5×LD50 的CVB3攻击小鼠 ,观察攻击后小鼠的存活情况。结果 :构建了重组质粒 pcDNA3 VP1,并在体外获得有效表达。以该质粒肌肉免疫BALB/c小鼠 ,可诱生高水平的IgM和IgG ,VP1多肽特异性淋巴细胞增殖反应及CTL活性均显著高于 pcDNA3免疫的对照组。病毒攻击试验表明 ,pcDNA3 VP1免疫组33.3%小鼠可长期存活 ,其心肌组织未见明显的病理学改变 ;而对照小鼠平均仅存活 6 .7d ,心肌显示大量的局灶性坏死和炎性细胞浸润。结论 :pcDNA3 VP1免疫可诱生CVB3特异性体液及细胞免疫应答 ,保护免疫小鼠抵抗CVB3的致死性攻击     

CⅡTA M1-RNA对MHCⅡ类分子表达的抑制作用

目的探讨MHCⅡ类分子转录激活因子（CⅡTA）的M1-RNA对细胞表面MHCⅡ类分子表达的抑制。方法M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位，设计并克隆针对CⅡTA第452、629位点的M1-RNA（分别为M1-452-GS、M1-629-GS）及其相应的CⅡTA靶基因，分别插入pUC19、pGEM-7zf（＋）载体，进行细胞外切割活性筛选。将细胞外切割作甩明显的M1-629-GS亚克隆入psNAV载体（psNAV-M1-629-GS，pA629）并稳定转染ECV304细胞株，流式细胞术检测经典的MHCⅡ（HLA-DR、-DP、-DQ）类抗原表达，RT-PCR检测CⅡTA的mRNA水平。结果pA629阳性ECV304细胞株与对照组比较，HLA-DR、-DP抗原表达分别降低了89．21％及92．31％；同时CⅡTA的mRNA含量降低（P〈0．05）。结论CⅡTA的M1-RNA（M1-629-GS）降低了自身mRNA含量，从而阻止其调控的MHCⅡ类分子的表达。     

戊型肝炎病毒归科的形态学证据

采用超簿切片制样及负染色免疫电镜方法，对经细胞培养自戊型肝炎病人分离的８７Ａ株病毒进行了形态及形态发生的研究。结果显示，感染细胞胞浆局灶性空泡液泡病变区明显而普遍；病毒呈晶格样排列，在胞浆内装配成熟，与粗面内质网、病毒性包涵体、微丝等密切相关；病毒毒粒无囊膜，大小约３０ｎｍ呈圆形，表面形态不规整，电致密度不均一，偶见“凹杯形”、“刺突”等表面超微结构；感染细胞核呈现扭曲变形，异染色质趋边等显著受累及病变。其形态及形态发生特征表明其应为嵌杯病毒科新属—嗜肝ＲＮＡ病毒属的成员，而部分核苷酸序列分析也支持其为戊型肝炎病毒。     

促肝细胞生长素诱导人肝癌细胞（BEL－7402）凋亡

本文从细胞学、ＤＮＡ凝胶电泳、流式细胞术三方面研究促肝细胞生长素（ｐＨＧＦ）在体外对肝癌细胞增殖活性的影响。结果表明：ｐＨＧＦ对肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞增殖有抑制作用，并存在剂量和时间相关性。其４８ｈ的半数抑制浓度（ＩＤ５０）为０．３７ｍｇ／ｍｌ±０．０４ｍｇ／ｍｌ。而３７℃灭活的ｐＨＧＦ对ＢＥＬ－７４０２细胞增殖在１５ｈ无抑制作用，在２４和４８ｈ抑制作用很弱（ＩＤ５０＞１．５ｍｇ／ｍｌ）。ＤＮＡ凝胶电泳结果表明，ｐＨＧＦ可诱导ＢＥＬ７４０２细胞产生细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）。流式细胞术（ＦＣＭ）结果显示：ｐＨＧＦ抑制ＢＥＬ－７４０２细胞增殖过程是先使细胞停留在Ｇ０／Ｇ１期，继而诱导细胞产生凋亡。后两项结果均显示ｐＨＧＦ对人肝癌细胞凋亡的诱导里时间和剂量相关性。     

5-羟色胺在大鼠腰骶髓后连合核和中间带外侧核参与盆腔内脏炎性痛调控的形态学研究

本研究运用荧光金(FG)逆行束路追踪与5-HT1A受体免疫荧光组织化学染色技术相结合,观察了大鼠腰骶髓后连合核(DCN)和中间带外侧核(IML)内感受盆腔内脏伤害性信息并向外侧臂旁核(LPB)发出投射的神经元呈5-HT1A受体免疫反应阳性。将FG注入一侧LPB后,可在腰骶节段(L6-S2)观察到大量的FG逆标神经元,这些FG逆标神经元主要集中于DCN和IML内,以同侧为主;5%福尔马林注入大鼠结肠后,Fos蛋白阳性神经元主要分布于腰骶髓DCN和IML,以同侧为主,在同侧脊髓背角I层、II层和深层也有少量的分布。另外,在腰骶髓DCN和IML内,还可观察到大量5-HT1A受体阳性的神经元胞体、纤维和终末,同时有部分Fos蛋白阳性的FG逆标神经元呈5-HT1A受体阳性。上述结果提示,大鼠腰骶髓DCN和IML内的5-HT能终末可能对盆腔内脏伤害性信息的传递发挥调控作用。     

医学毕业生心理调查分析及对策

目的调查分析医学毕业生心理,采取教育对策。方法应用Zung焦虑抑郁自评量表(SAS、SDS)对医学院校187名应届医学毕业生进行抽样调查。结果本组SAS、SDS标准分平均值为37.04±9.08与40.18±10.57;SAS男性37.07±9.38,与女性略同;SDS男性40.55±10.95高于女性39.90±10.30,差异不显著。SAS、SDS≥50的高分人数57例,占30.46%,其中≥50轻度焦虑抑郁为19.24%,≥60重度焦虑11.22%;男、女性别组焦虑抑郁者分别为25例与33例,各占28.09%与33.67%,女性轻度抑郁比例多于男性,差异显著。结论本组医学生情绪状态整体水平尚可,少数学生偏离正常。女性焦虑抑郁人数分布高于男性。应加强素质教育,开展心理咨询,完善就业工作体制,拓宽就业渠道。     

超声波介导的基因输送技术

近年来超声波介导的基因输送技术由于其相对安全性和操作上的简单得到关注。本文对超声波导致的声致穿孔的机制,空化核的作用——增强基因输送的效率,以及细胞和在体基因输送效率作了综述,讨论了超声波介导的基因输送效率的影响因素。此方法充满希望并且载药的空泡可以作为一种新型药物载体在超声作用下实现药物的靶向输送     

实验性抑郁症大鼠缰核和海马BDNF基因表达

目的：研究抑郁症大鼠缰核和海马BDNF基因的表达情况。方法：采用长期未预知应激刺激致大鼠抑郁症模型，运用open-field和forced swinmming test法观察大鼠行为学变化。运用免疫组化法检测缰核和海马BDNT基因的表达。结果：与正常对照组相比，抑郁症模型组大鼠海马和缰核均表现为BDNF阳性细胞数量明显减少。结论：实验性抑郁症大鼠缰核、海马BDNF基因表达水平降低。