细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌Tox基因影响

目的探讨细胞壁缺陷对白喉棒状杆菌毒力基因及其表达的影响。方法以非高渗分离培养法诱导并获得产毒性白喉棒状杆菌稳定L型纯培养物，提取白喉棒状杆菌稳定L型的染色体DNA，用Tox基因特异性引物进行PCR扩增，并进行序列测定和分析。分别采用对流免疫电泳（CIEP）和十二烷基磺酸钠-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测白喉棒状杆菌稳定L型可溶性代谢产物中的白喉毒素蛋白质。结果白喉棒状杆菌在氨苄青霉素作用下可发生细胞壁缺陷而成为L型，该稳定L型的传代培养物可仍然保留同其亲代细菌型一致的Tox基因及其核苷酸序列；但在其可溶性代谢产物中并未检测到白喉毒素蛋白质。结论白喉棒状杆菌稳定L型虽然保留了Tox基因但并不能表达白喉毒素蛋白质，提示细胞壁缺陷可影响Tox基因在宿主菌细胞内的表达。     

重新审视和定位院长领导力的外延

在医院院长管理实践中,有一些心态和技巧对管理的结果有着不可忽视的影响,这种心态和技巧有规律地出现,称之为领导力的外延。医院院长领导力的外延主要包括几个方面:一是保持适度压力,二是寻找二次落点,三是学会适时放弃,四是利用分人思维,五是勇于面对责备和不理解。     

肥胖相关性肾病的诊断

随着经济的快速发展及人们生活方式的改变,儿童及成人肥胖症发病率逐年上升,肥胖相关性肾病(ORG)日趋增多。ORG诊断首先要具备肥胖体征,但应注意国际、国内诊断成人肥胖的体质量指数(BMI)标准不同,儿童青少年更应根据不同年龄、性别的BMI分类标准作出判断。其次肾脏病理为肥胖相关的局灶节段性肾小球硬化伴肾小球肥大;或单纯肥胖相关肾小球肥大。结合出现蛋白尿伴或不伴镜下血尿等肾脏受累表现,除外糖尿病肾病、高血压性肾病、先天性肾发育不良等疾病可作出诊断。     

重组乙型肝炎疫苗(酵母)按不同免疫程序接种成人的免疫原性研究

目的探讨重组乙型肝炎(乙肝)疫苗(酵母)对成人的免疫原性。方法在济阳县乡村随机整群选择健康的15~40岁乙肝病毒(HBV)易感者591人,按0、1、6个月和0、6个月免疫程序,接种广东省深圳康泰生物制品有限公司生产的重组乙肝疫苗(酵母),每剂10μg/1.0ml。结果全程免疫后1个月时,0、1、6个月和0、6个月两种免疫程序的有效乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)阳转率分别为95.91%、86.08%,两种免疫程序产生有效抗-HBs,抗体几何平均浓度(GMC)分别为332.5毫国际单位/毫升(mIU/ml)(95%CI为279.17mIU/ml~396.03mIU/ml)和227.4mIU/ml(95%CI为186.34mIU/ml~277.51mIU/ml)。0、1、6个月免疫程序的有效抗-HBs阳转率和GMC均高于0、6个月程序,差异有显著的统计学意义。结论10μg/ml重组乙肝疫苗(酵母)接种15~40岁人群的免疫原性良好,其长期效果需进一步随访。     

海藻糖在气管低温保存中的保护机制

目的探讨海藻糖在气管低温保存中的保护作用和机制。方法新鲜配制4组保存液，其中：Ⅰ组LPD；Ⅱ组LPD 10％DMSO；Ⅲ组LPD 0．15M海藻糖；Ⅳ组LPD 10％DMSO 0．15M海藻糖。切取SD大鼠气管后立即分别放入含上述4种溶液的冻存管，在程序降温仪降至-80℃后投入液氮中保存。20d后对气管标本进行HE染色和Bcl-2、Pax蛋白检测(免疫组化)，并将其异位移植到Wistar大鼠腹腔，15d后取出移植气管，观察组织学变化。结果4种保存液低温保存气管20d后，Ⅲ组和Ⅳ组气管结构完整，软骨细胞Pax蛋白表达较低，尤其Ⅳ组保存效果最好，同种异体异位移植后生长良好。各组Bcl-2蛋白表达无明显区别。结论在气管低温保存中海藻糖的保护作用主要是通过对软骨细胞的保护实现的，抑制软骨细胞Pax基因的表达是其中的保护机制之一。海藻糖和DMSO合用保护作用更好。     

利用稻瘟霉分生孢子跟踪分离面包海星中的海星皂苷活性成分

目的研究面包海星中的海星皂苷活性成分。方法以稻瘟霉模型进行活性监测，采用多种层析手段和波谱技术对海星皂苷活性成分跟踪分离并鉴定其结构。结果分离获得14个海星皂苷，鉴定了其中12个结构(1～12)，包括7个新的海星皂苷(6～12)。其中大多对稻瘟霉显示活性且对K-562和BEL-7402肿瘤细胞株显示显著或中等强度的细胞毒性，2个皂苷有溶血作用。结论利用稻瘟霉模型对海星皂苷活性成分进行跟踪分离是可行的，该研究也为进一步开发抗肿瘤新药提供了有价值的先导化合物和科学依据。     

婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶肿瘤靶向性基因治疗系统的构建(英文)

目的构建婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶靶向性基因治疗系统。方法 PCR 扩增 CD 基因,EcoR Ⅰ,BamH Ⅰ对 CD 基因和 pGEX-1LamdaT 质粒同时进行双酶切,获得4.9 kb、1.3 kh 两个 DNA 片段。T4 DNA 连接酶连接这两个片段构建重组的CD/pGEX-1LamdaT 质粒,然后用电穿孔法将重组质粒转染婴儿双歧杆菌。从阳性转染的婴儿双歧杆菌中提取重组质粒,双酶切后检测切取片段长度,采用 Sanger 双脱氧链终止法对提取的重组质粒中的插入片段进行测序。结果从阳性转染的婴儿双歧杆菌中获得了6.2 kb大小的重组质粒,该质粒经双酶切后,得到了4.9 kb 和1.3 kb 两个长度的片段,其长度分别与 pGEX-1LambdaT 及 CD 基因的长度相同。测序结果显示,提取的重组质粒中插入的基因片段全长及核苷酸序列与 CD 基因完全相同。结论外源性 CD 基因被准确插入 pGEX-1LambdaT 质粒并转入婴儿双歧杆菌中,婴儿双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶靶向性基因治疗系统被成功构建。     

塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2细胞生长抑制及放射增敏研究

Objective To investigate the growth inhibition and radiosensitization of Celecoxib in hu-man nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-2. Methods CNE-2 growth inhibition by Celecoxib was eval-uated by MTT method. Apoptosis-related changes in morphology were observed by transmission electron mi-croscopy (TEM). Cell cycle distribution and apoptosis rate were measured by flowcytometry (FCM). The ex-pression of COX-2 protein was observed by SP method after the treatment of Celecoxib. Cells were randomly planted into four groups: irradiation control(Ci), drug group(Cd), irradiation group(R), and Celecoxib plus irradiation group(D+R). Single irradiation of 2,4,6,8,and 10 Gy were administered for colonogenic assay. Cell cycle distribution and apoptosis rate were analyzed at 6 Gy irradiation. Results The growth of CNE-2 cell was inhibited by celecoxib in a dose-and time-dependent manner, the IC50 was 80 μmol/L After the treatment, cell ratio of GO and G, phases was increased (47.03±2.76 vs 56.17±1.95, t=4.68, P= 0.010), whereas the ratio of S and G2/M phases was decreased (33.07±1.86 vs 24.87±1.76, t=5.54, P = 0.010; 19.30±0.53: 17.73±0.83, t=2.75, P=0.050), and the apoptosis rate was increased (1.57±0.47:10.47±0.31, t = 27.39, P = 0.000) in a dose-dependent manner. Apoptosis with nuclear chromatin condensation, fragmentation and cell shrinkage was found by TEM. SP method showed that Celeib decreased COX-2 expression (17.48±0.34 vs 12.82±0.51,t=13.20,P =0.00). The sensitivity ratio(D0) was 1.15. FCM showed that the percentage of cells in G2/M phase was significanty more in R and D+R groups than in Ci and Cd groups (68.00±1.65,54.27±5.74,17.60±0.80,14.86±1.23, t=47.70,P=0.000; t=11.63, P=0.000), and also significantly different between R group and D + R group (t=3.99, P= 0.020). The apoptosis rate was higher in R and D + R groups than Ci and Cd groups(4.83±0.97,9.50± 1.35,1.33±0.86 and 2.28±0.42,t=4.67,P=0.010;t=8.81, P=0.000), D + R group than R group(t =4.85,P=0.010). Conclusions Celecoxib can markedly inhibit the growth and induce apoptosis in CNE-2 cells,which may depend on COX-2 pathway. Celeeoxib potently enhances the radiosensitivity of CNE-2 cells,which may due to the repair inhibit of radiation-induced DNA damage, inhibit of cell proliferation,and enhancement of cell apoptosis after irradiation.     

心安颗粒中苦参碱含量测定方法的研究

目的:对心安颗粒中指标成分苦参碱含量测定方法进行研究。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱 Phenomenex Luna C_(18)(4.6mm×150mm,5μm);流动相为甲醇-水-三乙胺(50∶50∶0.04);流速1.0mL·min~(-1),检测波长220nm。结果:本法平均回收率97.00%(n=6)。结论:建立了一种操作简便、重复性良好的高效液相色谱法测定心安颗粒中苦参碱,该法可用于心安颗粒质量控制。     

川芎配方颗粒剂的制备工艺研究

目的　通过考察川芎配方颗粒剂的含量稳定性,确定最佳制剂工艺。方法　将制剂置于恒温恒湿条件下,按规定时间取样,考察主要有效成分含量。结果　制剂Ⅱ含量稳定性优于制剂Ⅰ。结论　将川芎挥发油制成β环糊精包合物,稳定性好,可推广至其它中药配方颗粒剂的制备。