Site-specific mutagenicity of stereochemically defined 1,N2-deoxyguanosine adducts of trans-4-hydroxynonenal in mammalian cells

Trans-4-hydroxynonenal (HNE) is a toxic compound produced endogenously during lipid peroxidation. HNE is a potent electrophile that is reactive with both proteins and nucleic acids. HNE preferentially reacts with deoxyguanosine to form four stereoisomeric HNE-deoxyguanosine (HNE-dG) adducts: (6R, 8S, 11R), (6S, 8R, 11S), (6R, 8S, 11S), and (6S, 8R, 11R). These adducts were synthesized into 12-mer oligodeoxynucleotides, inserted into a DNA shuttle vector and evaluated for the ability of each stereoisomer to induce mutagenesis when replicated through mammalian cells. The resultant mutagenicity of these adducts was related to their stereochemistry, in that two of the HNE-dG adducts, (6R, 8S, 11R) and (6S, 8R, 11S), were significantly more mutagenic than the (6R, 8S, 11S) and (6S, 8R, 11R) HNE-dG adducts. These data conclusively demonstrate that HNE-derived DNA adducts can be mutagenic in mammalian cells and their ability to cause mutations is dictated by their stereochemistry.     

基于椭圆方程的三维心脏超声图像的位移场估计

三维超声心动图技术能使医生直观地看到心脏整体和各部分的运动，在临床得到重视。在三维超声心动图技术中，如何定量的描述心脏中某个组织的运动状况极具临床意义。本研究提出了一种基于椭圆偏微分方程的二尖瓣三维运动估计方法。该方法直接在三维超声图像的位移场上进行了运动估计，避免了传统运动估计方法，如光流法，需要标定的缺点。本研究首先建立一个二次误差指标函数，然后利用变分法导出了三维空间下的一组椭圆型偏微分方程。这类方程有着比较成熟的数值解法，利用了有限差分法，对多个三维超声数据立方体进行了计算，结果证明这类方法是有效的。     

Comparison of the unlabeled and labeled pre-mRNA splicing assays in vitro

Pre-mRNA splicing is a fundamental process required for the expression of most metazoan genes. It is carried out by the spliceosome that catalyzes the removal of non-coding intron sequences to ligate exons into mature mRNA prior to transport and translation. The purpose of our study is to explore whether the in vitro unlabeled pre-mRNA splicing assay could be performed as an alternative method of splicing reaction other than the radiolabeled one. Two different splicing methods in vitro , P labeled and unlabeled pre-mRNA as the substrates in the reaction, were investigated. The radiolabeled products were visualized by autoradiography while the unlabeled products were observed by Ethidium Bromide (EB) staining. As a result, although there are more unspecific bands in the EB staining assay than 32P labeled one, the RNA products of in vitro splicing could be observed clearly. This suggests that the unlabeled pre-mRNA splicing assay can be an optional substitution for the isotope-labeled assay.     

大鼠重组IgE Fc区CH2-3的原核表达及活性研究

目的 研究大鼠IgE的Fc区CH2-3的生物学活性。方法 构建大鼠IgE的Fc区CH2-3的原核表达质粒pBAD／gⅢA／Ch2-3，并转化入TOP10中，阿拉伯糖诱导表达、周质腔抽提、Ni-NTA金属鳌合柱纯化获得大鼠IgE的Fc区CH2-3，细胞及动物水平检测蛋白质生物学活性。结果 原核系统表达出大鼠IgE的Fc区CH2-3，它能够阻断OVA激发的RBL-2H3的脱颗粒反应，阻断被动皮肤实验。结论 大鼠IgE的Fc区CH2-3能够封闭IgE高亲和力受体，阻断过敏反应。     

SARS病毒S1蛋白重组C端片段免疫效果的实验研究

为获得纯化的重组SARS病毒S1蛋白C端 ,研究其刺激机体产生针对SARS病毒免疫应答的规律和机制 ,将编码SARS病毒S1蛋白C端 311个氨基酸残基的基因克隆 ,并在原核表达系统中表达 ,纯化获得了的重组蛋白。利用SARS患者恢复期的血清 ,对纯化的重组S1蛋白进行血清学分析。结果表明 ,本研究中克隆表达的重组蛋白序列与公布的SARS病毒S1蛋白C端的序列相同 ,其编码的重组蛋白相对分子质量约为 5 90 0 0Mr。SARS患者恢复期的血清均与重组蛋白反应 ,在5 9 0 0 0Mr处形成特异性的反应条带 ,而来自SARS流行前的正常人对照血清则不能与重组蛋白反应。在本研究中获得的重组蛋白可以为研究SARS病毒识别宿主细胞受体的过程及其机制提供条件。     

彩色多普勒超声对肠套叠的诊断价值与治疗体会

肠套叠是外科常见急腹症之一，临床以小儿为多见，若不能及时诊治，可并发肠坏死和中毒性休克，甚至危及生命。我科自1998年至2007年12月，采用彩色多普勒超声对124例（共132人次）进行诊治，收到满意疗效，现将其诊断价值和治疗体会报告如下。     

体外培养大鼠脊髓运动神经元的存活率及形态观察

观察体外培养的大鼠脊髓运动神经元(SMN)的存活率、形态学特征及生长规律。对今后进一步研究脊髓损伤、运动神经元病有一定的指导意义。1材料与方法1·1实验动物:胚胎16 d的SD大鼠。1·2主要试剂:15%有血清L-15培养基、无血清L-15培养基、poly-L-lysine、层黏连蛋白(lam in in)、m etrizam ide、阿糖胞苷、DAB等(S igm a公司),小牛血清白蛋白、小牛血清(华美生物工程公司),胆碱乙酰转移酶多克隆抗体(ChAT)(武汉博士德公司)。1·3实验仪器:离心机、超净台、CO2恒温培养箱、24孔培养板、倒置显微镜(OLYMPUS)、图像分析系统(OLYMPU…     

CTT triplex系统各基因座位等位基因在葡萄胎基因组中的分布及其意义

我们对采用PCR和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别出的37例DNA完全来自父方的遗传学完全性葡萄胎(g-CHM)进行基因组中CTTtriplex系统各基因座位(CSF1PO、TPOX和TH01)等位基因分布的分析,并初步研究了这些等位基因分布与临床预后的关系。结果显示,在37例g-CHM中,CSF1PO座位中3个等位基因(11,12和14)和TPOX座位中的1个等位基因(11)的出现率与它们在北京地区人群中的基因频率差异显著;g-CHM中CSF1PO、TPOX和TH01基因座位杂合度显著低于北京地区人群的杂合度(P值均远小于0.01);在23例良性g-CHM和10例侵袭性g-CHM中:CSF1PO座位的等位基因10、11在良性中的出现率高于在侵袭性g-CHM中(P=0.026148),等位基因12在良性中的出现率低于在侵袭性g-CHM中(P=0.023879);TPOX座位的等位基因8在良性中的出现率高于在侵袭性g-CHM中(P=0.004322),而等位基因11在良性中的出现率低于其在侵袭性g-CHM中(P=0.008671)。上述结果提示,葡萄胎基因组中存在某些等位基因分布与在人群中的分布不同,而且葡萄胎是否具有侵袭性也和某些等位基因的出现率过高或过低有相关性,这些与侵袭性有关的等位基因可能成为预测葡萄胎是否具有侵袭性的标志物。     

湖南省两地区成瘾物质使用状况调查报告：使用率及相关因素

本文采用整群抽样的方法，对湖南两地区城乡共２３７７人（１５岁以上）的成瘾物质使用状况进行调查，其中男１１７９（４９．６％）人，女１１９９（５０．４％人），平均年龄男女分别为４１．２（ＳＤ＝１７．５）和４３．４（ＳＤ＝１８．６）。结果表明，饮酒率男性为５７．５％，女性为１７．３％，吸烟率男女分别为６８．２％和１１．７％；饮酒者多集中在每月饮１次左右的人群中（男５７．９％，女７７．９％），但吸烟者多集中在每日吸２０支及以上（男５２．４％，女４２．９％）的人群中。除解热镇痛剂外，男性各种精神活性物质的使用频率及剂量皆男高于女性，开始使用的年龄及成瘾的年龄男性低于女性；性别、使用频度、最早使用的年龄、婚姻与饮酒、吸烟量关系最为密切。有１４人使用过鸦片类物质，４人使用过兴奋剂。作者讨论了我国成瘾物质使用的特点，指出经济水平、社会文化背景等因素与我国社会性成瘾物质的使用有密切关系。