一种探找超抗原T细胞识别表位的新方法

目的建立一种有效的探找超抗原Ｔ细胞识别表位的新方法。方法以检测超抗原合成肽或其在ＣＤ２８抗体辅助下诱导外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的增殖与否为指标，确定超抗原的合成肽是否含有超抗原Ｔ细胞识别表位。结果一个超抗原合成肽单独并不能活化ＰＢＭＣ，但在ＣＤ２８抗体的辅助下却可激活ＰＢＭＣ。结论超抗原合成肽结合ＣＤ２８抗体的方法对寻找超抗原Ｔ细胞识别表位是切实可行的。     

iRNA对家兔急性实验性血清病的免疫调节作用

本实验以一次性静脉注射BSA诱发的家兔急性实验性血清病(AESS)为模型。于免疫后连续4天用iRNA处理模型动物,观察了iRNA对AESS家兔的血清学和免疫病理学影响,并建立了家兔血清补体旁路活性的检测方法。结果表明:iRNA能降低AESS家兔循环特异性抗体和特异性免疫复合物水平,减轻血清补体消耗,减少肾小球内免疫复合物的沉积和炎性细胞的浸润,使肾炎病变得以缓解。提示:iRNA可能通过抑制特异性体液免疫应答,发挥对AESS的免疫调节作用,从而减轻其免疫病理损伤的程度。     

Pre－S_（2）蛋白T细胞识别的精细特异性

本文采用合成交叠肽扫描的方法在６种不同Ｈ－２单倍型小鼠确定了ｄ／ｙ二种亚型Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｔ细胞识别部位。发现：（１）在所观察的６种同类系小鼠均存在对Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白反应的亚型特异性，这可能与Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白分子Ｃ末端的多态性有关；（２）Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｔ细胞识别部位在５种同类系小鼠位于Ｃ末端３２个氨基酸残基顺序内，在另一种同类系小鼠则位于Ｎ末端顺序，这与我们先前的理论观测结果相一致；（３）进一步分析发现：不同Ｈ２单倍型小鼠对Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｔ细胞识别是ＭＨＣ分子依赖的；（４）２４－５５肽段的圆二色性表明该肽段内存在一个α－螺旋，可能是其作为Ｔ细胞识别部位的结构基础。以上结果对于设计新一代乙型肝炎疫苗有意义。     

人TNFα－EGF重组质粒的构建

本实验将编码人ＴＮＦａ分子上与其受体相关的部分核苷酸序列缺失，代之以人ＥＧＦ基因ｃＤＮＡ，实现基因重组。转化子经快速细胞破碎法初筛、经Ｄｏｔｂｌｏｔ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定，从中挑选出２０个人ＴＮＦａ－ＥＧＦ阳性重组质粒，为进一步获得重组嵌合人ＴＮＦａ－ＥＧＦ分子和ＴＮＦａ作用机制的深入探讨奠定了初步基础。     

应用人-鼠皮肤移植判断冻存人体皮肤的活力

目的：为了评价冻存皮肤的移植效果。方法：将－２０℃和液氮中保存１周、１月、２月失体皮复温后,测定皮肤的琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）活性,并作组织学检查。同时将冻存皮肤移植于Ｗｉｓｔａｒ鼠背部创面,术后第５天至完全排斥期间每天计算移植皮肤存活率。以新鲜皮肤为对照组。用统计学方法分析移植成活率与ＳＤＨ之间的关系。结果：移植５,６和７ｄ的皮片成活率与ＳＤＨ均呈显著正相关。结论：人－鼠皮肤移植模型是判断冻存皮肤移植效果有效的方法,既可反映皮肤移植的成活率,又可反映成活期。     

淫羊藿研究新进展

淫羊藿目前的研究主要集中在化学成分,药理作用,药用植物新资源,质量评价,生态生理,分子鉴定以及资源保护和人工栽培等方面.其中药理研究尤为突出,包括淫羊藿对心脑血管、免疫系统、抗肿瘤、阻止骨疏松、抗衰老以及生殖系统等方面的作用.综述了淫羊藿各个方面的最新进展[1-5],并对淫羊藿的今后发展作了展望.     

O139,O1群霍乱弧菌分子遗传特征研究

目的探讨Ｏ１３９群、Ｏ１群霍乱弧菌分子遗传特征及其相互关系。方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、ＤＮＡ序列分析及随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）,检测了３株Ｏ１３９群、３株Ｏ１群ＥｌＴｏｒ生物型和２株古典生物型霍乱弧菌。结果３株Ｏ１３９群和５株Ｏ１群霍乱弧菌均扩增出５６６ｂｐ的ＤＮＡ片段,ＤＮＡ序列源于霍乱肠毒素（ｃｔｘ）Ａ２Ｂ基因。ＲＡＰＤ产生的两种ＤＮＡ指纹图谱一致显示Ｏ１３９群与Ｏ１群ＥｌＴｏｒ生物型遗传特征极其相似,与古典生物型略有区别。结论Ｏ１３９群与Ｏ１群ＥｌＴｏｒ型存在密切的种系进化关系,前者可能由Ｏ１群ＥｌＴｏｒ生物型进化而来。     

一种快速分离细胞凋亡片段化DNA的简单方法--NP-40法

目的 鉴定细胞凋亡的一个重要生化指标是凋亡细胞的核ＤＮＡ通过琼脂糖凝胶电泳呈现典现的ＤＮＡ“梯状”图谱。传统分离凋亡细胞片段化ＤＮＡ的方法多采用酚／氯仿抽提。因此,有必要探寻一种更为灵敏、简单的分离凋亡片段化ＤＮＡ的新方法。方法 通过比较传统分离凋亡片段化ＤＮＡ的方法,并对ＨＥＲＲＭＡＮＮ等报告的方法加以改进。结果 本文介绍一种快速分离凋亡ＤＮＡ片段化的新方法（ＮＰ－４０法）。结论 这种简单、快速     

EXPRESSION OF HUMAN CD59 ANTIGEN ON MOUSE NIH3T3 AND EL-4 CELLS CONFERS PROTECTION AGAINST HUMAN COMPLEMENT ATTACK

ＣＤ５９分子是广泛分布于各组织细胞表面的１８ｋＤａ糖蛋白,通过肌醇磷脂酰聚糖（ＧＰＩ）锚固于细胞膜,具有抑制同源补体攻膜复合物（ＭＡＣ）形成和参与介导Ｔ细胞活化等多种功能。本文应用ＲＴ－ＰＣＲ方法,从Ｊｕ－ｒｋａｔ细胞的总ＲＮＡ中扩增得到３９６ｂｐ的ｃＤＮＡ片段,经测序证实该片段包括２５ａａ信号肽在内的全部的ＣＤ５９编码序列。进一步将此ＣＤ５９的ｃＤＮＡ重组于逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ,电穿孔转染ＰＡ３１７细胞,并用病毒上清感染小鼠成纤维母细胞ＮＩＨ３Ｔ３及小鼠胸腺瘤细胞ＥＬ－４。经Ｇ４１８加压筛选,ＦＡＣＳ检测获得表达ＣＤ５９的阳性细胞克隆。补体杀伤实验结果表明：表达ＧＰＩ－型ＣＤ５９分子的ＮＩＨ３Ｔ３和ＥＬ－４细胞对人血清补体溶破的抵抗作用较空载体转染的非表达细胞明显增强。证实了用逆转录病毒载体可成功地将人ＣＤ５９基因导入异源细胞,使表达ＣＤ５９的异源细胞获得抑制人补体溶破的功能。本研究为探讨ＣＤ５９分子与细胞活化的关系及其信号转导机制建立了良好的细胞模型,并为进一步应用于异种器官移植,或对由于ＣＤ５９遗传缺损所致ＰＮＨ进行基因治疗奠定了基础。     

宁夏HFRS疫源地宿主动物汉坦病毒的首次分离和鉴定

目的　对宁夏肾综合征出血热（ ＨＦＲＳ） 新发疫源地进行宿主动物汉坦病毒的分离和鉴定。方法　采用幼龄长爪沙鼠接种和ＶｅｒｏＥ６ 细胞培养的方法进行汉坦病毒分离。用单克隆抗体间接免疫荧光试验,属特异性逆转录聚合酶链反应（ＰＣＲ） 结合限制性内切酶分析和型特异性逆转录ＰＣＲ 进行分离株的鉴定。结果　从宁夏黑线姬鼠肺成功地分离了２ 株汉坦病毒。单克隆抗体间接免疫荧光试验表明２ 株病毒与汉滩型病毒反应谱相同。逆转录ＰＣＲ 试验表明,２ 株病毒均可被汉坦病毒属特异性引物以及汉滩型特异性引物扩增,属特异性逆转录ＰＣＲ 产物的限制性内切酶分析表明２株病毒与汉滩型病毒酶切图谱相同。结论　首次在宁夏疫区成功分离了汉坦病毒并鉴定其属于汉滩型病毒,为进一步研究和控制该地区ＨＦＲＳ 提供了科学依据。