肝移植治疗原发性肝癌的存活率及预后因素分析

目的：探讨肝移植治疗肝细胞型肝癌的术后存活率及其影响因素。方法：回顾分析8年来89例接受肝移植治疗且随访时间≥6 个月的肝细胞型肝癌患者的临床资料。计算患者术后1,2,3年生存率,并通过单因素和多因素分析寻找影响存活率的影响因素。结果：89例患者肝移植术后1,2,3年存活率分别为91.2%,68.5%,59.4%;单因素分析显示,肿瘤最大径、门静脉癌栓、肿瘤分化程度和肿瘤TNM 分期是影响存活率的重要因素;Cox 风险模型多因素分析显示,肿瘤最大径、肿瘤分化程度和肿瘤TNM 分期均是影响存活率的独立危险因素。结论：肝移植是目前治疗肝细胞型肝癌的有效方法;肿瘤最大径>5 cm、肿瘤分化程度差和肿瘤TNM分期高均会严重影响患者的存活率。     

无创基因检测(NIPT)对胎儿染色体异常筛查的临床应用

目的 探讨无创产前基因检测(NIPT)在预测胎儿染色体异常中的临床应用价值。方法 选取2016年4月～2018年4月在福建省宁德市闽东医院行NIPT的单活胎孕妇6 357例,按孕周分为早、中、晚孕期组,按孕龄分为高、低龄组,低龄组又按申请理由分唐氏筛查高风险组、临界风险组、单项指标或中位数倍数(MOM值)异常组,B超软指标异常组和直接选择NIPT组,对于结果异常者签署知情同意书行羊膜腔穿刺术。结果 ①6 357例孕妇共检出染色体异常76例,早、中、晚孕期组阳性率分别为2.17%,1.23%和0.70%,三者之间差异无统计学意义(χ²=2.265～6.052,均P>0.05); ②6 357例孕妇按孕龄和申请理由分组,各组阳性率分别为1.45%,1.07%,0.97%,0.60%,1.29%和1.15%,各组之间差异无统计学意义(χ²=0.017～1.809,均P>0.05); ③76例NIPT结果异常孕妇有64例接受了羊膜腔穿刺羊水细胞染色体检查,其中21,18和13-三体的诊断率分别为90%,100%和100%,符合率分别为88.9%,88.9%和50%; 性染色体的诊断率为83.9%,符合率61.5%; 其它染色体异常诊断率为58.3%,符合率为0。结论 ①不同孕期NIPT的阳性率之间无差异,孕妇可以尽早行NIPT,为后续介入性诊断争取时间; ②不同申请理由NIPT的阳性率之间无差异,高龄和错过唐筛时间的孕妇可将NIPT作为筛查胎儿染色体异常的首选,而唐筛高风险、临界风险、单项指标或MOM值异常的孕妇可将NIPT作为二线筛查,从而避免不必要的羊膜腔穿刺; ③NIPT不仅对21和18-三体具有较高的特异度和敏感度,对13-三体、性染色体也有一定的预示作用,可作为产前检测胎儿染色体异常的辅助手段。     

PD-1与其他蛋白质的互作网络分析及验证

目的构建程序性死亡-1(PD-1)及其配体与其他蛋白质的相互作用网络,加深对PD-1信号通路研究的认识,为PD-1及其相关配体的基础及临床应用研究提供理论资料。方法通过PubMed检索PD-1及其配体的研究文献,基于文献挖掘对已报道的与PD-1及其配体存在相互作用的蛋白质进行统计,并以这部分蛋白质进行二次检索及文献挖掘统计,最后用软件Cytoscape构建相互作用网络并进行分析;寻找网络中与细胞迁移有关的分子及其与PD-L1之间的关系,并利用荧光定量PCR及迁移试验进行验证。结果在构建出的PD-1/PD-L1及PD-1/PD-L2分子互作网络中分别共计122个、126个分子,这些分子在T细胞受体信号通路、细胞黏附、JAK-STAT信号通路及细胞因子间相互作用等众多生物过程中起到重要作用;基于互作网络显示,PD-L1会间接影响到CXCR4的表达,这一推测被荧光定量PCR及迁移试验结果所支持。结论通过生物信息学手段对互作网络蕴含的信息进行挖掘发现,PD-1/PD-L1通路与PD-1/PD-L2通路的作用机制存在差异。同时,利用基于文献挖掘及生物信息学的方法研究PD-1信号通路是1种可以合理利用生物文献数据,为实际试验提供指导的好方法。     

大鼠颅脑损伤后大脑中动脉形态结构的变化

目的探讨颅脑损伤后大鼠损伤侧和对侧大脑中动脉形态结构及管壁细胞Cx40、Cx43的改变。方法成年SD大鼠45只按随机数字表发随机分为正常组（9只）、假手术组（9只）及损伤组（27只）,损伤组又根据伤后时间分为伤后6 h、24 h、72 h三个亚组（每亚组9只）。利用液压冲击法建立大鼠颅脑损伤模型,通过显微镜和透射电镜观察损伤侧和对侧大脑中动脉形态学改变,免疫组化法检测管壁细胞Cx40、Cx43表达水平改变。结果颅脑损伤后,大鼠损伤侧大脑中动脉随时间进程出现不同程度的内皮细胞形态结构改变、内弹力膜皱缩、平滑肌细胞水肿变形,进而管腔出现不同程度的狭窄甚至闭塞;损伤对侧大脑中动脉也出现形态结构改变,但发生较晚,程度较轻。与对照组相比,损伤组大鼠损伤侧和对侧大脑中动脉血管壁细胞Cx40、Cx43表达均明显增加（P〈0.05）,伤后24 h达高峰。结论颅脑损伤后不仅损伤区域大血管受损,远隔区域大血管亦可见损伤性改变。     

新甲型H1N1流感轻症病例血清免疫学特征分析

目的探讨新甲型H1N1流感轻症病例血清免疫学特征。方法选择新甲型H1N1流感轻症病例26例,留取外周血清分别进行MIP-1α,IFN-γ,TNF-α,IL-8检测,并与新甲型H1N1流感轻症病例25例治疗康复后作比较;同时选取健康21例外周血清做对照研究。结果新甲型H1N1流感轻症病例外周血清中细胞因子MIP-1α,IFN-γ,IL-8分泌表达与康复组对照有差异性(t=2.16～47.15,P<0.05),而TNF-α表达无差异性(t=0.72,P>0.05);而康复组与健康组比较表达无差异性(t=0.75～1.75,P>0.05)。结论新甲型H1N1流感轻症病例细胞因子MIP-1α,IFN-γ,IL-8分泌表达增强,可能与病毒感染有关,治疗康复后与健康人表达一致。     

人FcεRIα亚基的细胞外区的克隆表达和抗血清的制备及功能

为获得有生物活性的FcεRIα亚基细胞外区及多克隆抗体 ,并探知其功能 ,构建FcεRIα亚基的细胞外区的原核表达载体PBAD/gIIIA/FcεRIα,经表达、纯化后用斑点杂交法检测其活性。纯化制品免疫兔子获得抗血清 ,并研究抗血清对FcεRI的作用。结果发现 ,经原核表达出的FcεRIα亚基的细胞外区能与IgE结合 ;获得具有特异性抗FcεRI的抗血清 ,可能抑制嗜碱粒细胞脱颗粒。实验提示原核表达系统能产生有生物学活性的FcεRIα亚基的细胞外区 ,用其制备的抗血清能够识别FcεRIα亚基的细胞外区 ,可能抑制嗜碱粒细胞脱颗粒 ,为研究FcεRIα表达调节、对其的封闭作用及研究过敏性疾病的发病机制奠定物质基础     

内毒素致伤大鼠肺组织促炎与抗炎细胞因子mRNA表达的时相性研究

目的 研究不同剂量内毒素致伤大鼠肺组织促炎和抗炎细胞因子mRNA表达的时相性,并探讨这些细胞因子在全身炎症反应失控和急性肺损伤中的可能作用。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同剂量脂多糖(LPS)致伤大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-4、IL-10和IL-13的mRNA表达。结果 随着LPS剂量增加,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10和IL-13的mRNA表达均增强(与生理盐水对照组比较,P均<0.01);LPS≥6 mg/kg组上述细胞因子表达显著高于此剂量以下组(P均<0.01)。表达峰值时间:TNF-α为1 h,IL-6为4 h,其他均在2 h。结论 内毒素致急性肺损伤中,TNF-α是早期表达的促炎细胞因子,而IL-6在炎症进一步发展中发挥作用;抗炎细胞因子IL-4、IL-10、IL-13高表达亦可能促进炎症的放大而不是起保护作用。     

Wistar大鼠脑和脊髓微血管周细胞的分离、培养、鉴定及其功能差异的比较

探讨Wistar大鼠脑微血管周细胞（brain microvascular pericyte,BMP）和脊髓微血管周细胞（spinal cord microvascular pericyte,SCMP）之间的差异。运用超高速离心法获取脑和脊髓微血管,再用周细胞培养基培养,使周细胞爬出,然后用NG2和PDGFRβ鉴定周细胞,用鬼笔环肽着染F-actin,用流式细胞仪测定细胞周期,用免疫印记分析实验测定周细胞功能蛋白。结果表明：两种周细胞的形态有明显差异,BMP表达的F-actin显著多于SCMP,两种周细胞的细胞周期无显著差异,BMP相比于SCMP表达更多量的α-SMA、NG2和PDGFRβ。更多的了解两种周细胞的异同点,为研究其在中枢神经系统生理和病理状态下的作用奠定基础。     

型别特异性丙型肝炎病毒嵌合抗原在血清分型中的应用

目的克隆表达型别特异性丙型肝炎病毒HCV 1b、2a嵌合抗原,并用于HCV血清分型检测。方法分别对HCV 1b、2a的C区和NS4区进行表位预测,选取优势表位序列连接后,于PGEX-4T-2载体中克隆表达嵌合的HCV 1b、2a抗原,应用竞争抑制酶联法对44份HCV 1b和18份2a血清进行血清分型检测。结果 62例血清样品中50例能分型,其中1b型34例,2a型16例,其分型率为80.6%(50/62),与基因型的符合率为90.0%(45/50)。结论丙型肝炎病毒HCV 1b、2a嵌合抗原用于HCV的血清分型检测,具有较高的准确率和分型率,可用于HCV血清分型检测。     

三维经食管超声心动图在室壁瘤切除术中的应用

目的 通过三维经食管超声心动图(3D-TEE)来准确定量心肌梗死后室壁瘤形成患者手术前后的左心室形状、大小、收缩功能,并且评估室壁瘤累及范围和大小及二尖瓣反流情况,寻找一种便捷、准确、实时并且在术中不会影响到手术视野的评估室壁瘤切除术的方法.方法 室壁瘤切除术患者32例,手术前麻醉状态下、术后即刻行3D-TEE检查,获取并分析左心室容积、功能及室壁瘤体积的图像与数据,所得图像通过Qlab软件脱机后处理分析,得到左心室功能数据.通过3D-TEE指导室壁瘤形成患者术前手术方案的制订并评估术后即刻治疗效果.结果 通过3D-TEE检查室壁瘤切除术后左心室收缩末期容积(LVESV)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室射血分数(LVEF)、每搏量及心指数分别为(109.65±13.23)ml、(59.70±12.59)ml、(49.95±7.17)%、(45.88±6.60)ml、(2.17±0.44)L·(min·m2)-1,术前分别为(150.82±23.60)ml、(113.03±24.32)ml、(24.38±6.16)%、(36.01±9.62)ml、(1.57±0.63)L·(min·m2)-1,手术前后比较差异显著,均具有统计学意义(t=12.27、15.24、17.04、5.95、6.07,P均<0.001);室壁瘤所占左心室百分比明显减小或室壁瘤消失;室壁运动积分术前为(4.11±0.39)分,术后为(3.52±0.31)分,两者比较差异有统计学意义(t=5.01,P＜0.05).结论 3D-TEE检查能够在术中定量评价室壁瘤形成患者的左心室容积和功能.术中应用3D-TEE作为导航,有助于外科医师的判断和处理,更好地提高患者远期治疗效果.