Comparison of the unlabeled and labeled pre-mRNA splicing assays in vitro

Pre-mRNA splicing is a fundamental process required for the expression of most metazoan genes. It is carried out by the spliceosome that catalyzes the removal of non-coding intron sequences to ligate exons into mature mRNA prior to transport and translation. The purpose of our study is to explore whether the in vitro unlabeled pre-mRNA splicing assay could be performed as an alternative method of splicing reaction other than the radiolabeled one. Two different splicing methods in vitro , P labeled and unlabeled pre-mRNA as the substrates in the reaction, were investigated. The radiolabeled products were visualized by autoradiography while the unlabeled products were observed by Ethidium Bromide (EB) staining. As a result, although there are more unspecific bands in the EB staining assay than 32P labeled one, the RNA products of in vitro splicing could be observed clearly. This suggests that the unlabeled pre-mRNA splicing assay can be an optional substitution for the isotope-labeled assay.     

IV型II类反式激活因子基因新变异体的克隆、鉴定和功能测定

为获取有功能的IV型II类反式激活因子基因 (CIITA IV ) ,诱导肿瘤细胞表达MHCII类分子 ,从IFN γ刺激的THP 1细胞中以RT PCR获得CIITA IV ,将其连接到pGEMT easy载体。对所构建的pcDNA3 1 CIITA IV型表达载体进行反复测序后发现 ,所获得的CIITA IV基因存在结构变异 ,在 2 87位插入了 3个核苷酸TAG ,使 2 86 2 88位的AAG改变成为ATAGAG(2 86 2 90 ) ,并引起其他 8个座位核苷酸 (及推导的氨基酸残基 )发生改变。将表达载体转入原先不表达MHCII类分子的HeLa细胞中 ,检测到所获得的IV型CIITA变异体具有诱导人II类分子HLA DR表达的能力。空载体和CIITA IV基因导入的HeLa细胞中 ,DR阳性细胞百分率分别为 0 0 1 %和 37 6 4 %。该基因已从GenBank得到登录号 ,表明这是一个具有诱导HLA DR分子表达功能的IV型CIITA新基因。     

阴道炎患者HPV6/11-DNA定量分析

目的：了解女性阴道炎患者人乳头瘤病毒6／11型（HPV6／11）的感染情况。方法：荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）技术检测258例门诊患者阴道分泌物中HPV6／11的病毒拷贝数。结果：共检出HPV6／11阳性者94例,阳性率36．43％,拷贝数在10^5以上者78例,占阳性者中82．98％,40岁以上年龄组阳性率高且病毒复制量均在10^5以上。结论：（1）中老年阴道炎患者就诊晚,感染重。（2）FQ－PCR检测HPV敏感,快速,准确,特别是其定量特点对临床很有意义。     

卵巢癌患者手术前后IL-2,sIL-2R及mIL-2R水平改变的临床意义

探讨卵巢癌患的细胞状态以及ＩＬ－２血清游离白细胞介素－２受体,外周血单个核细胞膜结构型白细胞介素－２受体与临床的关系。方法＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法测３１例卵巢癌患ＩＬ－２产生水平,ＥＬＩＳＡ法检测血清ｓＩＬ－２Ｒ水平,ＡＰＡＡＰ免疫组化检测外周血单个核细胞膜结合型ＩＬ－２Ｒ表达细胞。     

Abmessung und Analyse der Bezugsfl(a)che von Acetabulum-Prothese-Transplantation in unterschiedlichen K(o)rperlagen

Ziel ist die Analyse der Neigungslage des Beckens im Liegen und im Stehen bzw.die Beobachtung der Stabilit(a)t der Beckenfl(a)che als Beckenfl(a)che für die Acetabulum-Prothese Transplantation. 72 Testpersonen wurden je nach Status ihres Pfannengelenks in 3 Gruppen eingeteilt:Gruppe 1 "mit gesundem Pfannengelenk", Gruppe 2 "mit Arthritis" und Gruppe 3 "nach Implantation der Hüftendoprothese". Unter dem Einsatz von 3D- Digital-Instrument wurde die Fl(a)chen-Neigung vor dem Becken jeweils im Liegen und im Stehen gemessen und die Messwerte wurden verglichen. Die Fl(a)chen-Neigungen vor dem Becken bei allen 3 Gruppen (mit gesundem Pfannengelenk/mit Arthritis/nach Operation) im Liegen sind: 6.37°± 3.70°, 6. 47°± 3.52° und 4.56°±2.39°. Im Stehen sind es 7.33°±3.08°, 6.60°±3.45° und 6.74°±3.43°. Der Fl(a)chen-Neigungsunterschied vor dem Becken im Liegen und im Stehen hat keine grosse Bedeutung (P＞0.05).Die (A)nderung der Fl(a)chen-Neigung vor dem Becken vom Liegen bis zum Stehen ist kleiner als 2.5°.Die Fl(a)che vor dem Becken (pelvic anterior plane, PAP) als Bezugsfl(a)che für Hüftpfanne-Prothese Transplantation bei klinischer Operation ist stabil und verlaβlich.     

骨髓增生异常综合征治疗新药开发

骨髓增生异常综合征(MDS)是克隆性造血干细胞疾病,临床表现呈现多样性和异质性,以血细胞减少为特征,少数有进展为急性白血病的危险。近十年出现了多种新的治疗方案,本文综述近年上市的以及目前处于临床研究阶段的治疗MDS的新药开发进展。     

腕管镜及改良小切口松解法治疗糖尿病腕管综合征的疗效分析

目的 探讨腕管镜腕管松解术和改良小切口腕管松解术治疗糖尿病腕管综合征的临床疗效和安全性差异.方法 回顾性分析腕管综合征合并糖尿病患者86例,其中43例患者行双孔道腕管镜腕管松解术(A组),43例患者行改良小切口腕管松解术(B组),随访10 ～ 24个月,统计两组患者的手术时间、住院时间、恢复工作时间、术后并发症和临床疗效.结果 A组和B组患者的优良率分别为93.02％和90.70％,两组的优良率比较差异无统计学意义(P＞0.05);A组患者的住院时间[(5.5±2.7)vs(6.8±2.9)d]及术后恢复工作时间[(19.3±3.1)vs(21.5±3.3)d]少于B组,差异有统计学意义(P＜0.05),而两组患者的手术时间、术后并发症发生率比较均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 腕管镜腕管松解法和改良小切口腕管松解法均是治疗糖尿病腕管综合征的有效且安全的手术方法,腕管镜腕管减压术患者住院时间短、术后恢复快,对于机体修补能力较差的糖尿病患者更为适合.     

卵巢上皮性癌组织APE1和P53的表达及其耐药性

目的: 探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)基因和P53在卵巢上皮性癌中的表达相关性,探讨两者与卵巢癌化疗耐药的相关性.方法: 应用免疫组织化学法对原发性卵巢癌组织120例中脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶(APE1)和P53表达状况进行测定.结果: P53表达与APE1表达强度和亚细胞定位无相关性(P>0.05).APE1/p53不同表达状态的卵巢癌组织对铂类为基础的化疗敏感性有统计学差异(P<0.05).结论:APE1和P53在铂类的耐药性产生过程中发挥重要作用,对预测化疗药物敏感性具有一定的临床指导价值.     

白三烯拮抗剂ONO-1078对电刺激迷走神经、辣椒素和P物质引起的豚鼠心血管反应的作用(英文)

阐明ONO-1078(ONO,4-氧-8-[对-(4-苯丁氧基)苯甲酰氨基]-2-(5-四唑基)-4H-1-苯并毗喃)对神经原性刺激诱导心血管反应的作用.方法:观察豚鼠心房和心室伊文思蓝渗出以及平均主动脉压(MAP)变化.结果:在阿托品(1 mg·kg~(-1),iv)预先处理后,电刺激迷走神经(ESV,10 Hz,5 ms,2或10 V,90 s)显著增高伊文思蓝渗出;辣椒素和P物质也增加染料渗出并降低平均动脉压(MAP).ONO(0.03,0.1 mg·kg~(-1),iv)抑制ESV的反应,在刺激强度低(2 V)时更明显;ONO 0.03 mg·kg~(-1)减弱辣椒素引起的微血管渗漏和低血压,但对P物质无影响.结论:ONO-1078可能通过抑制感觉神经肽释放而调节神经原性炎症时的心血管反应.     

干眼影响因素的临床分析

目的 分析干眼发病分布状况、相关危险因素和临床特点等,为干眼的预防和临床诊断治疗提供依据。方法 对眼科门诊112例干眼患者作问卷调查,并进行泪液分泌实验、泪膜破裂时间测定和角膜荧光素染色检查。结果 112例患者中男31例,女81例;干眼患者检出率随年龄增长呈上升趋势;长期局部应用滴眼药、过度用眼、慢性眼表疾病、结缔组织病、糖尿病等与干眼症发病密切相关。结论 干眼症的发生与性别、年龄等多种因素相关,预防性治疗对于干眼症状的缓解具有重要意义。