当归、枳壳挥发油HPLC指纹图谱的研究

目的:研究不同批次当归、枳壳药材经CO2超临界混合萃取的挥发油的指纹图谱,为科学评价和有效控制其质量提供实验依据.方法:采用高效液相色谱,条件为伊利特ODS 2 C18(4.6 mm ×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长325 nm.结果:建立了11个不同批次的当归、枳壳混合提取挥发油的指纹图谱,以蒿本内酯峰为参照峰,共标定了13个共有峰,利用化学对照品指认了其中2个色谱峰;该指纹图谱可鉴别当归、枳壳经水蒸汽蒸馏法得的挥发油.结论:方法准确可靠,可用于控制淫藤骨痹康方中的挥发油的质量.     

五味子超临界萃取物对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤后生存状态和活力的保护作用

目的:研究五味子超临界萃取物对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)所致的PC12细胞损伤后生存状态和活力的保护作用。方法:体外培养PC12细胞,建立Aβ引起的细胞损伤的AD细胞模型,采用MTT法和LDH法检测细胞生存活力。结果:五味子超临界萃取物能降低LDH含量,升高细胞线粒体脱氢酶的活性,增加活细胞数。结论:五味子超临界萃取物能减轻Aβ25-35损伤后的PC12细胞的受损程度,保护细胞膜,提高细胞生存活力。     

清热养阴除湿丸治疗强直性脊柱炎对外周血细胞因子的影响

目的:探讨清热养阴除湿丸治疗活动期强直性脊柱炎(AS)的作用机理。方法采用随机分组、对照,将120例活动期AS患者分为两组,并设健康志愿者30例为正常组。试验组90例予清热养阴除湿丸12g,口服3次/d,对照组30例给予柳氮磺吡啶(SSZ)1g,口服2次/d,治疗6个月。检测治疗前后外周血中IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α水平,同时观测血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、Bath AS活动指数(BASDAI)、Bath AS功能指数(BASFI)改善情况。用放射免疫法检测血清中IL-1、IL-6、TNF-α表达,用酶联免疫法检测血清IL-10表达。结果:治疗前试验组、对照组两组与正常组比较IL-6、TNF-α水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后试验组IL-6、TNF-α水平下降,与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗后IL-6、TNF-α水平与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组、对照组两组ESR、CRP、BASDAI、BASFI治疗前后比较均有改善,差异有统计学意义(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清热养阴除湿丸对降低AS患者外周血中IL-6、TNF-α的水平有一定作用,并可有效降低ESR、CRP,改善疾病活动指标。作用机理可能与降低异常升高的细胞因子,减少致炎因子的产生,调节免疫失衡有关。     

桑黄总三萜的提取及其体外抗脑胶质瘤U251活性

目的:优化药用真菌桑黄总三萜的超声提取工艺并测定其对脑胶质瘤U251生长的抑制作用.方法:采用正交设计试验对超声辅助提取过程中影响桑黄总三萜得率的乙醇体积分数、超声时间、超声温度和料液比等因素进行优化;采用MTT比色法测定桑黄总三萜对U251细胞株增殖的抑制率,应用倒置相差显微镜观察桑黄总三萜对肿瘤细胞形态结构的影响.结果:超声辅助提取桑黄总三萜的最佳工艺条件为70％乙醇,超声提取20 min,温度60℃,料液比1∶25.在此条件下,桑黄总三萜提取率可达9.40 mg·g-1.桑黄总三萜对脑胶质瘤U251细胞株有抑制增殖作用,且表现出浓度依赖关系,倒置相差显微镜下可见部分细胞形成凋亡小体.结论:采用超声辅助提取桑黄总三萜时间短、得率高,是一种高效、快捷的方法,桑黄总三萜可抑制脑胶质瘤U251细胞株的增殖,诱导肿瘤细胞凋亡.     

柱前衍生化高效液相色谱法测定清开消炎片中猪去氧胆酸的含量

目的建立柱前衍生化高效液相色谱法测定清开消炎片中猪去氧胆酸含量。方法以0.1%18-冠醚-6乙腈溶液为催化剂,0.6%1-溴乙酰基对硝基苯乙腈溶液对清开消炎片中的猪去氧胆酸进行衍生化,采用高效液相色谱法测定;以Waters Symmetry 5C1(8250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱;流动相:乙腈-水(60:40);流速:1.0mL·min-1;柱温:35℃;检测波长:254nm。结果空白无干扰,线性关系良好。结论该方法简便、快捷、重复性好,能准确测定清开消炎片中猪去氧胆酸的含量,为清开消炎片的质量控制提供了依据。     

灵芝孢子油体内抗Friend鼠白血病病毒的实验研究

目的探讨灵芝孢子油体内抗Friend鼠白血病病毒(Friend murine leukemia virus,Fr.MuLV)感染的疗效和作用机制。方法用Fr.MuLV感染BALB/C雌性小鼠,造模小鼠ig给药21d,比较各组动物的体质量、脾指数、胸腺指数,CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等指标变化情况。结果小鼠感染Fr.MuLV后体质量严重减轻,脾明显肿大,胸腺萎缩,CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值均显著降低。灵芝孢子油50、100、200mg/kg剂量均可显著改善体质量增长抑制、脾肿大及胸腺萎缩(P0.01),100、200mg/kg剂量组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值均有明显升高(P0.01、0.05)。结论灵芝孢子油对Fr.MuLV感染小鼠有保护作用,能够改善体质量增长抑制,抑制脾肿大及胸腺萎缩,升高感染小鼠的T淋巴细胞。     

杜仲苷对炎性环境下软骨细胞的增殖和Ⅱ型胶原蛋白分泌的影响

目的：观察杜仲苷对IL-1β刺激大鼠体外软骨细胞的增殖及Ⅱ型胶原蛋白分泌的影响。方法：利用IL-1β刺激建立体外大鼠软骨细胞炎性模型,实验分为空白组、IL-1β组、10μM杜仲苷组、100μM杜仲苷组、500μM杜仲苷组、1000μM杜仲苷组;空白组加入10%FBS培养液,IL-1β组加入10ng/mL IL-1β＋10%FBS培养液,4个不同浓度杜仲苷组分别加入10μM、100μM、500μM、1000μM杜仲苷＋10ng/mL IL-1β＋10%FBS培养液,分别培养48小时,采用CCK8检测软骨细胞增殖活力及Ⅱ型胶原蛋白的分泌。结果：IL-1β组的OD值低于空白组（P〈0.05）;4个不同浓度杜仲苷组的OD值均高于IL-1β组（P〈0.05）,且存在一定的量效关系;4个不同浓度杜仲苷组的Ⅱ型胶原蛋白表达均高于IL-1β组（P〈0.05）,且存在有一定的量效关系。结论：杜仲苷可以提高体外大鼠软骨细胞炎性环境下的增殖活力,促进Ⅱ型胶原蛋白的分泌,表明杜仲苷对体外大鼠软骨细胞有一定的抗炎保护作用。     

温度对山茱萸开花与结果习性的影响

目的研究温度对山茱萸开花与结果习性的影响。方法对所选定的不同海拔高度的12株20~50年树龄的山茱萸为研究对象,进行定株、定时观察与记载。结果当日均温持续稳定在8℃以上约3~5d,花蕾将开始绽放;当日均温稳定在12℃以上3~5d,小花将开始开放;当日均温稳定在23℃以下时,果实纵、横径生长均较快。结论对制订山茱萸标准操作规程(简称SOP)及指导合理生产具有实际意义。     

卵巢肿瘤内部血流阻力指数与Ki67及Snail表达的关系

目的 研究卵巢肿瘤内部血流阻力指数(RI)与肿瘤组织内的Ki67及Snml表达间的关系.方法 选择2005年10月至2006年10月复旦大学附属妇产科医院妇科收治的住院手术卵巢肿瘤患者共96例,术前应用彩色多普勒超声血流显像(CDFI)检测肿瘤内部RI,术后应用免疫组织化学方法检测其中36例卵巢良性肿瘤和47例卵巢上皮性癌中Ki67及Snail的表达.结果 良性卵巢肿瘤内部RI显著高于卵巢上皮性癌(0.61±0.19对0.38±0.09.P<0.01).Ki67及Snail在卵巢上皮性癌中的表达要显著高于良性肿瘤(分别为70.2%时13.9%,55.3%对8.3%,P<0.01),且在内部血流RI<0.4的卵巢肿瘤中的表达要高于RI≥0.4者[分别为58.0%对27.3%(P<0.01),44.0%对21.2%(P<0.05)].结论 卵巢肿瘤内部血流RI与肿瘤组织内的Ki67及Snail表达有关;RI<0.4的肿瘤为恶性的可能性要大于RI≥0.4者.