张应力对小鼠蝶枕软骨联合细胞增殖及低氧诱导因子-1α表达的影响

目的:了解循环张应力对小鼠颅底蝶枕软骨联合细胞(SOSCs)增殖及低氧诱导因子-1α表达的影响.方法:采集1 d龄小鼠的SOSCs进行体外培养,对第三代细胞加载牵张形变率分别为3％、6％、9％,频率为1 Hz,持续时间为1 h的循环张应力;用流式细胞术测算细胞增殖指数,用蛋白免疫印迹技术分析Hif-1α的表达水平.用按...     

奥拉西坦通过SDF-1α/CXCR4通路促进脑梗死大鼠神经新生与迁移

目的]探究奥拉西坦通过基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)/C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)通路促进脑梗死大鼠神经新生与迁移的机制。 [方法]100只SD大鼠随机分为对照组、脑缺血(CI)组、奥拉西坦(200 mg/kg)组和奥拉西坦(200 mg/kg)＋AMD3100(5 mg/kg)组,每组25只。采用电凝法制作局部永久性脑缺血大鼠模型。造模后1、7、14天进行神经功能缺损评分,TTC染色检测脑梗死体积,尼氏染色检测梗死区细胞存活,Western blot检测缺血区SDF-1α、CXCR4蛋白水平。造模后1～7天,连续腹腔注射BrdU(50 mg/kg),14天后,免疫荧光双标染色检测SVZ区BrdU＋Nestin＋、BrdU＋DCX＋细胞数量。造模前5天,大鼠SVZ区注射携带GFP的反转录病毒,14天后,免疫荧光双标染色检测梗死区GFP＋DCX＋、GFP＋MAP-2＋、GFP＋GFAP＋细胞数量。将C17.2细胞分为对照组、氧糖剥夺(OGD)组、奥拉西坦组(终浓度为200 mg/L)和奥拉西坦(终浓度为200 mg/L)＋AMD3100(终浓度为100 μmol/L)组。采用OGD制作细胞缺血模型,12 h后,免疫荧光双标染色检测BrdU＋/Nestin＋、BrdU＋/MAP-2＋细胞数量,Transwell实验检测细胞迁移,Western blot检测细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平。[结果]动物实验结果显示,与对照组相比,CI组大鼠mNSS评分升高,脑梗死体积增大,梗死区细胞存活数量减少,SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高,SVZ区GFP＋DCX＋、GFP＋MAP-2＋、GFP＋GFAP＋细胞数量增多(P＜0.05);与CI组相比,奥拉西坦组大鼠mNSS评分降低,脑梗死体积减小,梗死区细胞存活数量增多,SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高,SVZ区GFP＋DCX＋、GFP＋MAP-2＋、GFP＋GFAP＋细胞数量增多,梗死区GFP＋DCX＋、GFP＋MAP-2＋、GFP＋GFAP＋细胞数量增多(P＜0.05);与奥拉西坦组相比,奥拉西坦＋AMD3100组大鼠mNSS评分升高,脑梗死体积增大,梗死区细胞存活数量减少,CXCR4蛋白水平降低,SVZ区GFP＋DCX＋、GFP＋MAP-2＋、GFP＋GFAP＋细胞数量减少(P＜0.05)。细胞实验结果显示,与对照组相比,OGD组细胞BrdU＋/Nestin＋、BrdU＋/MAP-2＋数量、细胞迁移数增多,细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高(P＜0.05);与OGD组相比,奥拉西坦组细胞BrdU＋/Nestin＋、BrdU＋/MAP-2＋数量、细胞迁移数增多,细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高(P＜0.05);与奥拉西坦组相比,奥拉西坦＋AMD3100组细胞BrdU＋/Nestin＋、BrdU＋/MAP-2＋数量、细胞迁移数减少,细胞培养上清液中CXCR4蛋白水平降低(P＜0.05)。 [结论]奥拉西坦可能通过激活SDF-1α/CXCR4通路,促进SVZ区神经干细胞迁移至缺血区,以促进脑梗死大鼠神经新生和神经功能恢复。     

道地药材天麻DNA真伪鉴定试剂盒的研制与评价

目的 建立一种将DNA提取技术与PCR技术相结合的天麻DNA真伪鉴定试剂盒,并对试剂盒性能进行方法学评价。方法 通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)查找天麻及其常见伪品紫茉莉根、大丽菊块茎、马铃薯的ITS2序列,应用DNAMAN进行多序列比对,NCBI-Primer-Blast设计天麻特异性引物。改良植物常用DNA提取的CTAB法,确保提取出高效的正品天麻及其常见伪品的基因组DNA,应用紫外分光光度法测其浓度及纯度。优化PCR反应体系,确定试剂盒的组成与反应条件,随机抽样检测市售天麻样品。结果 应用所研制的试剂盒提取样品DNA,纯度OD260 /OD280值为(1.87±0.13),灵敏度为10 ng·μL^-1,3次重复性检测结果相同,反复冻融 5、10、15、20次对检测效果无影响,于-20 ℃可保存1年,检测10个市售天麻样品,其中7个是正品,3个是伪品。结论 道地药材天麻DNA真伪鉴定试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性和稳定性均良好,检测结果准确,适用于天麻及其常见伪品的快速鉴别。     

响应曲面法优化金水六君煎回流提取工艺

目的：优选金水六君煎中阿魏酸和橙皮苷回流提取工艺。方法：在单因素试验基础上,以提取时间、液料比、提取次数为影响因素,以阿魏酸和橙皮苷提取率为考察指标,采用响应曲面法优化金水六君煎回流提取工艺。结果：金水六君煎的最佳回流提取工艺为提取1.5 h、液料比12∶1,提取2次。在此工艺条件下,重复3次试验,阿魏酸提取率为60.59%,RSD为0.34%;橙皮苷提取率为59.67%,RSD为2.18%。结论：响应曲面法优化得到的金水六君煎最佳回流提取工艺参数稳定可靠,具有可行性和实用性。     

女性缺血性心脏病的研究现状及展望

心血管系统疾病在女性中的发病率逐年升高,已成为女性死亡的最主要原因,却没有引起足够的重视,由于女性心血管病患者的临床症状及发病机理具有一定特异性,临床诊断与治疗过程往往被延误。因此更好的理解性别差异在诊断心血管疾病中的作用是改善女性冠心病患者预后的第一步。该文对女性心血管病的临床症状、发病机理、临床诊断等方面进行阐述。     

PD-1及其配体PD-L1/PD-L2在寄生虫感染免疫中的作用

程序性死亡-1(programmed death1,PD-1)及其配体PD-L1(ligand1of programmed death-1)/PD-L2(ligand2of programmed death-1)是继CTLA-4/CD28后发现的B7/CD28家族分子,能负调控T细胞的活化和细胞因子的分泌,在寄生虫感染免疫、肿瘤免疫和自身免疫性疾病中有重要的临床应用前景。该文对PD-1的生物学特点及其与配体的作用途径等进行综述。     

铁蛋白降低的男性定期单采血小板捐献者的铁代谢指标的变化

目的 探究铁蛋白＜30 jg/L出现储存铁降低的男性定期血小板献血者的铁代谢指标的变化情况.方法 测定北京市红十字血液中心137例男性铁蛋白水平＜ 30 μg/L的定期血小板献血者铁代谢相关指标,包括游离铁(Fe)、血红蛋白(Hb)、不饱和铁结合力(UIBC)、总铁结合力(TIBC)、转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA...     

RNAi下调survivin表达诱导成人神经细胞瘤细胞凋亡

目的利用RNA干扰技术下调凋亡抑制因子survivin在人成神经细胞瘤细胞系SH-SY5Y中的表达,并评价其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法将设计合成的寡核苷酸片段退火后连入pBSHH1构建survivin的短发夹RNA表达质粒pBSHH1-survivin;通过RT-PCR和Western印迹评价其对SH-SY5Y细胞内源性survivin表达的抑制作用;运用Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及AnnexinFITC染色检测survivin表达下调对SH-SY5Y细胞凋亡的影响。结果酶切和DNA测序证实survivin的短发夹RNA表达质粒构建成功;RT-PCR和Western印迹表明质粒转染SH-SY5Y细胞后能明显下调survivin的表达;Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及AnnexinⅤFITC染色显示下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡。结论成功构建了有效针对survivin的短发夹RNA表达质粒;下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡。     

《中华人民共和国药典》2020年版收录的中药材与中药制剂的系统分析

对2020年版《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）》收录的药材和饮片数量、药材与饮片基原物种数与 入药部位、成方制剂和单方制剂的数量及组成进行统计和分析,结果载入网站（http://itcm.hzau.edu.cn/yd/zgyd.htm）供参考查 询。分析显示：（1）《中国药典》（一部）共收录616种药材与饮片以及47种植物油脂与提取物。616种药材和饮片按其来源 可分为植物类、动物类、矿物质类、微生物类、人工合成或配置原料类、人源制品、兼具动物与植物来源类等。47种植物 油脂与提取物中,46 种为以植物来源制成的药材,剩余 1 种为动物来源,即水牛角浓缩粉。（2）616 种药材和饮片中,有 421 种（占比 73.60%）药材源于单一的基原物种, 96种（占比 16.78%）药材具有 2种基原,40种（占比 6.99%）药材具有 3种基 原,11种（占比1.92%）药材具有4种基原,2种（占比0.35%）药材具有5种基原,2种（占比0.35%）药材具有6种基原。47种植 物油脂与提取物中,有 34种具有单一基原,基原数为 2和 3的植物油脂与提取物各有 5种。（3）《中国药典》（一部）共收录 1 605种成方和单方制剂。除未公布组成的云南白药和云南白药胶囊外,其余1 603种复方制剂和单方制剂一共涉及14 329种 药材。2020年版《中国药典》成方和单方制剂使用频次最多的前20种药材为甘草、当归、茯苓、川芎、黄芩、白芍、黄芪、 陈皮、地黄、白术、丹参、冰片、桔梗、大黄、熟地黄、木香、红花、麦冬、党参以及白芷。结果提示2020年版 《中国药 典》 亦存在药材饮片与处方药材不完全对应、炮制品收录不完整等问题。通过系统分析 《中国药典》 收录中药材的总体信 息及其与处方间的相互关系,可为进一步研究中药材生产与完善处方药材的记录提供参考。     

云南沉香果壳的化学成分研究

目的研究云南沉香Aquilaria yunnanensis果壳的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC技术进行分离、纯化,结合理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从云南沉香果壳的95%乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部位中分离得到13个化合物,分别鉴定为trans-linalool-3,6-oxide-7-O-β-D-(6′-O-acetyl)-glucoside(1)、苯乙基-8-O-β-D-(6′-O-乙酰基)-葡萄糖苷(2)、芒果苷(3)、鸢尾酚酮-3,5-C-β-D-二葡萄糖苷(4)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、山柰酚-3-O-β-D-(6″-对-香豆酰基)-葡萄糖苷(8)、香叶醇-1-O-β-D-葡萄糖苷(9)、3-[2-甲酰基-5-(羟甲基)-1H-吡咯-1-基]戊二酸(10)、大麻酰胺D(11)、淫羊藿次苷D_2(12)、松柏苷(13)。结论化合物1为新的单萜苷类化合物,命名为云南沉香苷C,化合物2为新天然产物,7、9～13为首次从沉香属植物中分离得到,所有化合物均为首次从该植物中分离得到。