紫外线照射后哺乳动物细胞DNA的期外合成

本实验用~3H-TdR掺入,液体闪烁测量法测定细胞DNA期外合成的方法,测定了小鼠和大鼠的肠淋巴结细胞、人和大鼠外周血淋巴细胞、S-180V肿瘤细胞等经紫外线照射后的UDS,观察到UDS掺入量随辐照度增加而增加。在同一辐照剂量下,以小鼠肠淋巴结细胞的UDS值最高,其次是人外周血淋巴细胞和S-180V肿瘤细胞,而大鼠外周血淋巴细胞和肠淋巴结细胞最低。     

PGA指数和透明质酸在诊断慢性乙肝肝纤维化中的价值

目的：寻找一种简便实用的诊断慢性乙型肝炎纤维化的方法。方法：以78例经肝穿刺病理证实的慢性乙型肝炎为对象，测定并比较了由PT、GGT、ApoA1组成的PGA指数和HA、LN、PⅢP、C－IV与肝内纤维化程度(S)和炎症活动度（G）的关系。结果：（1）LN、PⅢP、C－IV在轻度慢性乙肝时无明显升高，在中度慢性乙肝时明显高于正常，但与轻度慢性乙肝无差异，而PGA指数和HA不仅在轻度慢性乙肝时显著升高，而且在轻中度间差异明显.因重度慢性乙肝和活动性肝硬化时，五项指标均显著增高。（2）在G2－4期，HA、LN、PⅢP、C－IV均明显高升，但在G1期，只有PGA指数高于正常，且各期间差异显著。（3）在S1－2期，只有PGA指数、HA、C－IV明显上升，但C－IV的上升幅度远低于PGA指数和HA。（4）加以PGA＞4．5或HA＞200μg／L作为判断临界值，则两者判断肝纤维化的敏感性均＞94％，精确性＞91％，特异性＞86％，如两者结合，则分别达到98．3％、95．2％和96．4％。结论：PGA指数和HA均是反映慢性乙型肝炎患者肝内纤维化程度的良好指标，两者联合检测则可达到最大的价值效益比。     

微卫星改变与肺癌发生发展的关系

目的 :研究肺癌组织中第 3号染色体短臂 (3P)和第 9号染色体短臂 (9P)上微卫星标志物的改变与肺癌发生发展的关系。方法 :应用聚合酶链反应 (PCR)结合微卫星银染法检测 5 6例肺癌和 2 3例良性肺部病变 3P和 9P上的微卫星标志物的改变。结果 :5 6例肺癌组织标本中 3P上有微卫星改变 2 6例 ,检出率 46% ,9P上有微卫星改变的 2 3例 ,检出率为 41% ,5 6例肺癌组织中 ,3P和 9P上有微卫星改变的 3 9例 ,检出率 69 6% ,2 3例肺部良性疾病组织中均未出现微卫星标志物改变。肺癌组织标本中 3P上的微卫星改变与肺癌的分化程度有关 ,低分化肺癌的微卫星改变较高、中分化肺癌的微卫星改变明显增多 (P <0 .0 1)。而 9P上的微卫星改变与淋巴结转移有关 ,有淋巴结转移的肺癌组织标本上微卫星改变较不伴淋巴结转移的微卫星改变检出率明显增多 ,(P <0 .0 5 )。结论 :3P和 9P上的微卫星改变与肺癌发生、发展和转移密切相关 ,检测肺癌组织 3P和 9P上的微卫星改变对肺癌的早期诊断和判断有无淋巴结转移有一定的价值     

人肿瘤特异抗原MAGE-3基因疫苗的构建和表达

目的：克隆肿瘤特异性共享抗原mage-3基因，制备基于α－病毒复制酶的高效黑色素瘤特异性基因疫苗。方法：用RT-PCR方法从黑色素瘤细胞系LB373中制备mage-3基因，以含α－病毒复制酶的哺乳细胞高效表达质粒pSMART2a为载体，构建重组DNA疫苗。重组子用载体中的T7和T3启动子序列为测序引物进行自动测序。再将鉴定过的重组质粒用脂质体法转化293细胞，用免疫印迹法和免疫组化法鉴定转化细胞中mage-3蛋白的表达。结果：正确构建了mage-3/pSMART2a重组质粒，并且在转化此质粒的293细胞中检测出了mage-3蛋白的表达。结论：此重组mage-3/pSMART2a质粒可以作为肿瘤特异的DNA疫苗，可进行下一步的肿瘤动物模型的疫苗接种及相关免疫学效应研究。     

成人成骨细胞与珊瑚羟基磷灰石的体外生物相容性

目的：研究成人骨髓成骨细胞与珊瑚羟基磷灰石（carolline hydroxyapatite,CHA)在体外培养条件下的生物相容性。方法：抽取健康成人骨髓组织，置于含体积分数为10％胎牛血清的DMEM培养基中培养，传代后改用含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基培养，分为CHA复合细胞组和单纯细胞组，不同时间用倒置相关显微镜，HE染色光镜及扫描电镜观察，MTT法进行细胞增殖测定，并进行细胞微量蛋白含量和碱性磷酸酶的定量检测，结果：成人骨髓成骨细胞体外培养时复合或不复合CHA均生长良好，表现出典型成骨细胞的形态特征和生物学特性，CHA利于细胞的贴附，生长与增殖，并对细胞的功能无不良影响，结论：CHA是较理想的骨组织工程支架材料，成骨细胞复合CHA用于骨缺损的修复，具有广阔的临床应用前景。     

罂硝软膏的制备及质量控制

目的 :制备罂硝软膏 ,并建立质量控制方法。方法 :以硝酸甘油、盐酸罂粟碱、双氯芬酸钾为主药研制软膏剂 ,用紫外分光光度法及酸碱滴定法分别测定硝酸甘油、盐酸罂粟碱、双氯芬酸钾3组分的含量。结果 :硝酸甘油、盐酸罂粟碱、双氯芬酸钾的平均回收率分别为100 65 %、99 86 %、100 55 %,相对标准差分别为0 4945 %、0 1719 %、0 3205 %(n=3)。结论 :该软膏制备工艺可行 ,质量可控 ,性质稳定。     

载瘤动脉闭塞术治疗颅内巨大动脉瘤的探讨

目的总结和探讨脑血管造影和载瘤动脉闭塞在治疗颅内巨大动脉瘤上的作用及特点。方法60例颅内巨大动脉瘤患者,根据其脑血管造影的特点采取血管内介入方法[可脱式球囊和(或)弹簧圈]闭塞载瘤动脉近端53例、闭塞载瘤动脉两端后孤立动脉瘤7例;其中23例闭塞前先行颅内-外血管搭桥术。结果出院时Rankin评分分级:单纯血管内介入治疗组37例中轻残3例,合并颅内-外血管搭桥术组23例中死亡1例、重残2例。1-6年的影像学随访动脉瘤无复发。结论血管内介入结合颅内-外血管搭桥术闭塞载瘤动脉是治疗颅内巨大动脉瘤的方法之一。     

Serum transforming growth factor-β1 level reflects disease status in patients with esophageal carcinoma after radiotherapy

AIM: To evaluate the relationship between changes in serum transforming growth factor β1 (TGFβ1) level and curative effect of radiotherapy (RT) in patients with esophageal carcinoma.METHODS: Ninety patients with histologically confirmed esophageal carcinoma were enrolled. Serum samples for TGFβ1 analysis were obtained before and at the end of RT. An enzyme-linked immunosorbent assay was used to measure serum TGFβ1 level. Multivariate analysis was performed to investigate the relationship between disease status and changes in serum TGFβ1 level.RESULTS: Serum TGFβ1 level in patients with esophageal carcinoma before RT was significantly higher than that in healthy controls (P ＜ 0.001). At the end of RT, serum TGFβ1 level was decreased in 67.82% (59/87) of the patients. The overall survival rate at 1,3 and 5 years was 48.28% (42/87), 19.54% (17/87)and 12.64% (11/87), respectively. Main causes of death were local failure and regional lymph node metastasis.In patients whose serum TGFβ1 level decreased after RT,the survival rate at 1, 3 and 5 years was 61.02% (36/59),28.81% (17/59) and 18.64% (11/59), respectively. The survival rate at 1 year was 17.86% (5/28) in patients whose serum TGFβ1 level increased after RT, and all died within 18 mo (P ＜ 0.01).CONCLUSION: Serum TGFβ1 level may be a useful marker for monitoring disease status after RT in patients with esophageal carcinoma.     

早年父亲去世的心理创伤研究——1例男大学生的深入访谈分析

目的 探讨男孩8岁时父亲去世对其带来的创伤影响。方法 运用质的研究方法，对一名在8岁时经历父亲去世的男大学生进行深入访谈，采用主要概念或主题突出分类的方法进行编码分析。结果 父亲去世使个体产生了强烈的不安全感，严重的自卑感和神经症性的防御机制。结论 父亲去世后，家庭氛围是影响孩子心理健康的重要因素。     

RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

目的：通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸（siRNA）表达载体，鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE．1基因表达的干涉作用。方法：化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链，克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，重组构建核糖核酸干扰（RNAi）质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜，检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达，以了解siRNA的干涉效果。结果：重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析，表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点，且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测，2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论：载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi，为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用，分析基因功能，展开肿瘤基因治疗奠定了基础。