从心身同治角度针灸对乳腺癌关节痛患者生命质量改善的临床研究

目的:评价基于《黄帝内经》心身疾病病因的整体选穴与乳腺癌芳香化酶抑制剂(AI)关节痛局部配穴相结合的针灸方法,对乳腺癌康复期AI关节痛患者生命质量及局部关节症状的临床疗效。方法:选取2019年1月至2021年5月南京医科大学第一附属医院乳腺外科筛选使用唑来膦酸的乳腺癌AI患者232例作为研究对象,依据针灸意愿分为对照组(n=19)和观察组(n=16),对照组采用唑来膦酸常规镇痛,观察组在唑来膦酸的基础上采用整体及局部取穴相结合的方法针灸治疗,共治疗4周,分别评价治疗前、治疗2周、4周、8周时的乳腺癌患者生命质量量表(FACT-B)生命质量评分以及简明疼痛评估量表(BPI-SF)关节痛评分,同时评估针灸治疗的安全性。结果:治疗4周以及8周时观察组FACT-B生命质量评分较对照组高,治疗4周时观察组BPI-SF疼痛评分较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用整体配穴调和心身与局部选穴缓急止痛相结合的针灸方法对乳腺癌康复期AI患者的生命质量以及局部关节症状有较好的临床疗效。     

丹参SmRopGEF1基因的克隆、亚细胞定位与表达分析

目的 克隆丹参SmRopGEF1基因,研究其编码蛋白的亚细胞定位及其对逆境胁迫的应激反应和激素诱导下的表达水平。方法 根据前期丹参转录组测序结果设计SmRopGEF1基因特异引物,利用聚合酶链式反应（PCR）扩增SmRopGEF1基因序列;使用生物信息学方法分析SmRopGEF1蛋白序列特征及进化关系;构建pET28a-SmRopGEF1原核表达载体并转化至大肠埃希氏菌中诱导表达,构建35S启动的SmRopGEF1的绿色荧光蛋白原生质体瞬时表达载体,利用激光共聚焦显微镜观察SmRopGEF1的亚细胞定位;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测逆境胁迫（低温、盐及干旱）和激素诱导（生长素、脱落酸、茉莉酸甲酯）下的基因表达量。结果 丹参SmRopGEF1基因开放阅读框（ORF）全长为1701 bp,编码566个氨基酸,蛋白相对分子质量是62 362.99。生物信息学分析显示SmRopGEF1蛋白含有1个PRONE保守结构域,系统进化树分析表明SmRopGEF1蛋白与芡欧鼠尾草和一串红RopGEF1蛋白为高同源蛋白。成功构建pET28a-SmRopGEF1原核表达载体并在大肠埃希氏菌Rosetta（DE3）菌株中表达、纯化出SmRopGEF1重组蛋白。亚细胞定位的结果显示SmRopGEF1存在于植物细胞的细胞核中。qRT-PCR实验结果表明盐胁迫和冷胁迫能够显著提高SmRopGEF1的表达量;干旱胁迫后丹参愈伤中SmRopGEF1表达量下降。茉莉酸甲酯诱导后SmRopGEF1表达量升高。结论 克隆了丹参SmRopGEF1基因,其在抗逆胁迫中起到重要作用并且可能参与茉莉酸甲酯信号转导。研究结果丰富了丹参防御反应机制的研究,为选育丹参抗逆优良品种、提高丹参的产量与品质提供了参考。     

从发病机制概述针刺治疗血管性痴呆的研究进展

血管性痴呆是脑血管病变后所引起的认知功能障碍,是临床中较为常见的痴呆类型。其发病机制源于血管系统损害引起低脑血流灌注、氧化应激等一系列病理过程。针灸作为一种非药物疗法,在脑血管病及相关疾病中有较为广泛的临床应用,许多研究都显示了针灸对认知功能的改善作用,并涉及细胞凋亡、氧化应激、神经炎症、神经递质通路等方面的调节作用。因此,现从血管性痴呆的发病机制角度探讨针刺的治疗作用,以期为进一步揭示针灸在血管性痴呆治疗中的潜在机制提供参考。     

缺血性脑卒中中医康复治疗指南的系统评价

目的：系统评价缺血性脑卒中中医康复治疗指南的质量,为指南的制定规范提供借鉴。方法：计算机检索数据库：PubMed、国家知识基础设施数据库、中国学术期刊数据库、中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库,检索指南相关网站：卫生保健规范研究所(NICE）、国际网指南（GIN）数据库,梅斯医学数据库,中华中医药学会标准化委员会网站（http://www.cacm.org.cn/category/zyzn/bzh/）、中国中西医结合学会网站（http://www.caim.org.cn/）,检索时限为建库至2021年9月,收集缺血性脑卒中中医康复治疗指南。应用研发与评价指南评估Ⅱ（AGREE Ⅱ）工具对纳入指南进行质量评价,并汇总中等质量及以上的指南推荐意见。结果：共纳入13部指南,AGREE Ⅱ的平均得分分别为范围和目的65.67%、参与人员43.02%、严谨性43.64%、清晰性63.82%、应用性19.87%和独立性32.05%。13部指南中7部指南为中等质量,6部指南为低质量。本研究得到23条中医康复治疗的推荐意见,其中2条为强推荐。结论：指南总体质量不高,未来指南的制定应该从指南应用性、严谨性和独立性方面规范,同时重视开展高质量的临床研究,为指南的制定提供证据支持。     

Neuroprotective effects of Longxue Tongluo Capsule on ischemic stroke rats revealed by LC-MS/MS-based metabolomics approach

Objective: The present study aimed to evaluate the therapeutic effect and explore the underlying mechanisms of Longxue Tongluo Capsule (LTC) on ischemic stroke rats. Methods: Twenty-six rats were randomly divided into four groups, including sham group, sham + LTC group, MCAO group, and MCAO + LTC group. Ischemic stroke rats were simulated by middle cerebral artery occlusion (MCAO), and LTC treatment group were orally administrated with 300 mg/kg of LTC once daily for seven consecutive days. LTC therapy was validated in terms of neurobehavioral abnormality evaluation, cerebral infarct area, and histological assessments. The plasma metabolome comparisons amongst different groups were conducted by UHPLC-Q Exactive MS in combination with subsequent multivariate statistical analysis, aiming to finding the molecules in respond to the surgery or LTC treatment. Results: Intragastric administration of LTC significantly decreased not only the neurobehavioral abnormality scores but also the cerebral infarct area of MCAO rats. The interstitial edema, atrophy, and pyknosis of glial and neuronal cells occurred in the infarcted area, core area, and marginal area of cerebral cortex were improved after LTC treatment. A total of 13 potential biomarkers were observed, and Youden index of 11 biomarkers such as LysoPC, SM, and PE were more than 0.7, which were involved in neuroprotective process. The correlation and pathway analysis showed that LTC was beneficial to ischemic stroke rats via regulating glycerophospholipid and sphingolipid metabolism, together with nicotinate and nicotinamide metabolism. Heatmap and ternary analysis indicated the synergistic effect of carbohydrates and lipids may be induced by flavonoid intake from LTC. Conclusion: The present study could provide evidence that metabolomics, as systematic approach, revealed its capacity to evaluate the holistic efficacy of TCM, and investigate the molecular mechanism underlying the clinical treatment of LTC on ischemic stroke.     

马鞭草全长转录组测序分析

目的:利用高通量测序技术获得马鞭草Verbena officinalis L.的全长转录组基因信息。方法:通过PacBio Sequel高通量测序平台,对马鞭草根、茎、叶3个部位的混合样品进行全长转录组测序,并基于序列同源性对转录本进行功能注释,得到马鞭草全长转录组的遗传信息。结果:测序数据经过质控后获得197542个高质量的转录本及169063条环形一致性序列(CCS),检测出4955个转录因子。其中161062个(81.53%)转录本在非冗余蛋白(NR)、真核生物相邻类的聚簇(KOG)数据库、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因本体(GO)数据库、蛋白家族(Pfam)数据库和SwissProt蛋白序列数据库中均得到注释。MISA分析发现54063个简单重复序列(SSR)位点,还预测到70050个长链非编码RNAs(lncRNAs)和45499个信使核糖核酸(mRNAs),并在马鞭草全长转录组中共鉴定到了60个转录本可能参与单萜类化合物的生物合成。结论:利用高通量测序技术和生物信息学分析获得了马鞭草的全长转录组信息特征,可为后期开展马鞭草功能基因鉴定、解析萜类化合物次生代谢途径及其调控机制提供参考。     

当归抽薹开花过程中赤霉素代谢水平及其关键酶基因克隆与表达分析

目的 对当归Angelica sinensis 16个赤霉素（gibberellins,GAs）进行含量测定、GAs代谢酶基因筛选并进行生物信息学分析、关键基因克隆及表达验证,以期为调控当归抽薹开花提供理论依据。方法 利用HPLC-MS/MS对不同材料中GAs含量进行测定与分析,基于当归全长转录组筛选直接参与GAs代谢酶基因,利用在线工具进行生物信息学分析,并对关键酶基因GA2ox6和GA20ox1表达水平进行q RT-PCR检测。结果 在所测定的16个GAs中,8个GAs含量在早薹植株中高于非早薹植株,13个GAs含量随植株发育时期延长逐渐增加。当归全长转录组中含有9个直接参与GAs代谢的酶基因,可分为6个亚家族,共含有6个保守基序,亚细胞定位于细胞质。GA2ox6和GA20ox1基因克隆片段由于插入序列与全长转录组测序片段存在长度差异。GA2ox6基因在抽薹植株、随种苗春化作用和植株发育时期延长呈现低表达,而在冷冻规避春化作用种苗中呈现高表达,GA20ox1基因则相反;GA2ox6和GA20ox1基因在叶和茎中相对于根均呈现高表达。结论 当归含有9个直接参与GAs代谢的酶基因,各成...     

中药配伍减毒增效的现代研究及思考

中药配伍是中医药临床应用的精华之一,合理配伍是保障中药临床用药有效性和安全性的重要措施。配伍后减毒增效机制的研究是诠释中药配伍合理性的关键内容。中药配伍机制研究正处于从体外到体内、成分到靶标、单一技术到多学科融合研究技术的转变历程,因此提出以“体外成分、体内过程、直接靶标”研究为基础,“中药配伍药理机制研究”为目的,从不同角度和不同层面探索中药配伍后作用机制的研究策略。     

茯苓对阴虚水肿模型大鼠及其热象的影响

目的 观察茯苓对阴虚水肿模型大鼠的影响,研究茯苓利水作用特点及机制,并评价茯苓对阴虚水肿所表现出热象的影响。方法 尾iv阿霉素联合ig甲状腺片复制阴虚水肿模型大鼠,给予茯苓水煎液或六味地黄丸干预4周,观察大鼠水肿情况和一般生长状态,检测24 h尿量和尿蛋白,测量肛温,进行冷热板实验计算热板停留时间比;检测血清总蛋白（total cholesterol,TP）、白蛋白（albumin,Alb）、尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、肌酐（creatinine,Cr）、环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,c AMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate,c GMP）水平;测定肾组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性及活性氧（reactive oxygen species,ROS）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察肾组织病理变化;Western blotting检测肾脏组织Klotho和棕色脂肪组织中解偶联蛋白1...     

广山楂HPLC指纹图谱建立及其活血化瘀作用谱效关系研究

目的 建立广山楂Malus doumeri指纹图谱,测定各批次广山楂的“活血化瘀”药效学指标,探讨广山楂化学成分与活血化瘀功效的谱效关系。方法 采用HPLC法建立18批广山楂的指纹图谱。利用大鼠高脂模型,测定不同批次广山楂的“活血化瘀”药效学指标,包括高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterin,LDL-C）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglyceride,TG）含量及血液流变学指标等。运用偏最小二乘回归法（partial least-square method regression,PLSR）、灰色关联度分析法,分析广山楂化学成分与活血化瘀药效指标间的谱效关系。结果 构建了广山楂的HPLC图谱,确定了6个共有峰,并指认了其中的2个共有峰（绿原酸、根皮苷）。活血化瘀实验表明,不同批次广山楂活血药效指标间具有明显差异,在标定的广山楂6个特征峰中,峰2～6与HDL-C呈正相关,峰1、5、6与LDL...