Bacterial expression of immunoglobulin VH proteins

A bacterial expression system in Escherichia coli has been developed that produces as much as 10 mg/l of culture of the VH protein associated with monoclonal antibodies specific for the 5-dimethylaminonaphthalene-2-sulfonyl (Dns) group. This system has been applied to the expression of the VH genes derived from a low-affinity, IgM-producing hybridoma and from a high-affinity, IgG-producing cell line. The plasmid vectors (contributed by Dr William F. Studier) utilize a T7 expression cassette whose activity is initiated by infection with a lambda phage derivative carrying the T7 RNA polymerase gene. The VH proteins were extracted from the bacterial pellet in 8 M urea and purified by chromatography in 8 M urea. Recombinants with the homologous light (L) chains were prepared to yield VHL molecules. These were used to measure intrinsic affinity for Dns-lysine by resonance energy transfer. The association constants were 7 x 10(6) M-1 and 7 x 10(9) M-1 for the low- and high-affinity systems, respectively. These values are not significantly different from those observed with monoclonal antibodies secreted from the corresponding cell lines. This system lends itself to the quantitative evaluation of the binding properties of the VH protein itself as well as the modulation of affinity by site-directed mutagenesis.     

EB病毒转化的丙型肝炎病人外周血B淋巴细胞中丙型肝炎Ⅱ型？…

目的 观察丙型肝炎病人外周血Ｂ细胞长期存活状态下其中是否仍有丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）存在。方法 用ＥＢ病毒感染并使ＨＣＶ阳性外周血Ｂ细胞转化,获得含ＨＣＶ的外周血永生化Ｂ细胞（ＬＣＬ）。而后,每月应用套式ＲＴ－ＰＣＲ检测一次培养细胞和上清中的ＨＣＶ－ＲＮＡ,并用酶切法进行ＨＣＶ基因分型,电镜和免疫电镜观察ＨＣＶ在该细胞中存在的部位及其形态结构特征。结果 经连续１年检测,ＨＣＶ在传代细胞中持续存在,培     

混配农药中氰戊菊酯在小鼠体内的代谢和分布

目的　了解混配农药中氰戊菊酯在小鼠体内的代谢和分布。方法　以14 C -氰戊菊酯为示踪剂 ,静脉注射给药。给药后 0 .5～ 12 0min之间采 9次血样 ,8～ 96 0min之间分别对脑、心脏、肝脏和肺脏采 8次样品。样品用 β闪烁计数仪测量 ,并换算成化学浓度。用残数法计算毒代动力学参数。结果　混配农药中的氰戊菊酯的代谢符合二室开放模型。分布相T1/ 2 α为 2 .7min ,消除相T1/ 2 β为 10 6 .6min ,表观分布容积为 2 .9L/kg ,正向扩散系数k12 (0 .17min-1)大于逆向扩散系数k2 1(0 .0 77min-1)。分布浓度肺脏中最高 ,其次为肝脏、心脏、脑。结论　肺脏优势参与了氰戊菊酯的代谢过程 ,应重视此类农药的肺脏毒性。     

影响淋巴细胞共刺激作用的体外实验研究

目的　观察CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射对淋巴细胞增殖的影响 ,探讨影响T淋巴细胞信号转导的因素。方法　分别以CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射作为作用因素 ,用3H TdR掺入法观察在这些因素作用下 ,淋巴细胞增殖反应情况。结果　CD3单抗和CD2 8单抗联合刺激、PHA和低剂量辐射单独或联合处理 ,均可使淋巴细胞明显增殖。但CD3单抗和CD2 8单抗单独刺激 ,淋巴细胞增殖不明显。结论　CD3单抗和CD2 8单抗联合作用可使淋巴细胞有效增殖 ,PHA和低剂量辐射具有相似作用 ,对细胞免疫调节有重要意义     

垂体腺瘤患者围术期促肾上腺皮质激素与皮质醇变化的研究

为观察垂体腺瘤患者围术期促肾上腺皮质激素 (ACTH)与皮质醇 (COR)的变化 ,选取 2 8例择期脑瘤切除患者 ,分为非垂体瘤组 (Ⅰ组 ,n =7)、生长激素 (GH)升高垂体瘤组 (Ⅱ组 ,n =9)和泌乳素升高垂体瘤组 (Ⅲ组 ,n =1 2 ) ,采用静吸复合全麻。抽取围术期不同阶段的静脉血标本 ,用放免法检测ACTH及COR。结果显示 ,术毕停麻醉2 0min时的ACTH和COR与入院后基础值相比差异显著 (P <0 .0 5) ,且Ⅱ、Ⅲ组与Ⅰ组间差异显著 (P <0 .0 5)。提示 :垂体腺瘤患者术毕时ACTH及COR水平明显高于术前 ,这不同于其他神经外科患者。     

癫痫患者P50听觉诱发电位的研究

目的 探讨Ｐ５０在癫痫患者检测中的临床价值。方法 对２５例癫痫患者进行Ｐ５０测试,分析Ｐ５０波的潜伏明和波幅以及在不同刺激频率时Ｐ５０波幅的比率。选择年龄、性别２与患者组相匹配的２５名健康受试者对照组,结果 癫痫患者组Ｐ５３波的潜伏期较长,波幅则显著减低,其中以１８例颞叶癫痫２表现显著,７例额叶癫痫２不明显。刺激频率稍加快时,患者组Ｐ５０的波幅比率明显减小。结论Ｐ５０波的潜伏期和以应异常与颞叶功能     

小腿内侧逆行筋膜岛状皮瓣修复足部软组织缺损

目的探讨小腿内侧皮瓣在修复足部软组织缺损方面的应用.方法设计应用小腿内侧逆行筋膜岛状皮瓣修复足部软组织缺损15例.其中,男11例,女4例;缺损原因电烧伤3例,皮肤肿瘤2例,慢性溃疡7例,化学烧伤2例,热压伤1例.结果15例病例皮瓣全部成活.足外形、感觉及行走的稳定性均恢复良好.结论小腿内侧逆行岛状皮瓣与足部皮肤组织类似,血运及神经支配有保证,成活率高;蒂部较长,操作简便;特别适用于足跟及底部软组织缺损的修复.     

膀胱癌高危乳头瘤病毒定位研究及临床意义

目的：进一步探讨高危ＨＰＶ１６、１５与膀胱癌的病因学关系。方法：运用改良的原位杂交技术对５２例福尔马林固定石蜡包理膀胱乳头状移行细胞癌组织进行高危ＨＰＶＤＮＡ定位检测。结果：ＨＰＶ ＤＮＡ的阳性信号存在于肿瘤细胞核内,呈点状,也可为点片状,位于乳头癌全层,癌旁不典型增生上皮、癌旁正常的上皮组织及Ｂｒｕｎｎ氏巢可同时有高危ＨＰＶ的点片状表达。５２例膀光乳头状移行细胞癌中高危型ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ阳     

心脏停搏液pH值对大鼠未成熟心肌的影响

目的　探讨心脏停搏液 p H值对离体未成熟大鼠心肌的影响 .方法　采用 SD幼鼠 (18～ 2 1d)离体工作心模型 ,14℃低温缺血 12 0 min,缺血前分别以 p H为 6 .40 ,7.0 0 ,7.2 5 ,7.40 ,7.80和 8.2 0的 St.Thomas' 液单次灌注 ,观察记录缺血前后心功能的变化及心肌 CPK漏出量 .结果　1缺血再灌注 30 m in后主动脉流量恢复百分比依次为 (6 2±5 ) % ,(72± 4) % ,(83± 4) % ,(78± 3) % ,(70± 3) %和 (5 8±4) % ,以 p H 7.2 5组保护效果最好 .2心肌 CPK漏出量各组间无显著差异 .结论　 p H值为 7.2 5的弱酸性心脏停搏液对大鼠未成熟心肌可提供良好的保护作用 ,同时大鼠未成熟心肌可耐受较大范围的 p H变化 .