Development and characterization of a new monoclonal antibody against SARS-CoV-2 NSP12 (RdRp)

SARS-CoV-2 NSP12, the viral RNA-dependent RNA polymerase (RdRp), is required for viral replication and is a therapeutic target to treat COVID-19. To facilitate research on SARS-CoV-2 NSP12 protein, we developed a rat monoclonal antibody (CM12.1) against the NSP12 N-terminus that can facilitate functional studies. Immunoblotting and immunofluorescence assay (IFA) confirmed the specific detection of NSP12 protein by this antibody for cells overexpressing the protein. Although NSP12 is generated from the ORF1ab polyprotein, IFA of human autopsy COVID-19 lung samples revealed NSP12 expression in only a small fraction of lung cells including goblet, club-like, vascular endothelial cells, and a range of immune cells, despite wide-spread tissue expression of spike protein antigen. Similar studies using in vitro infection also generated scant protein detection in cells with established virus replication. These results suggest that NSP12 may have diminished steady-state expression or extensive posttranslation modifications that limit antibody reactivity during SARS-CoV-2 replication.     

重度蒸汽吸入性损伤犬伤后肿瘤坏死因子水平的改变及其意义

目的研究蒸汽吸人性损伤犬伤后血浆肿瘤坏死因子水平的改变及其与吸入性损伤呼吸循环功能受损程度的关系.方法取犬15条,以蒸汽致重度吸入性损伤,分别于伤前、伤后1h、2h、3h、4h观察有呼气相气道阻力(RE)、心率(HR)、心输出量(CO)、动脉血氧分压(PaO2)、血浆TNF水平;伤后4h致死动物,取肺做病理检查.结果伤后1hTNF、RE升高,HR、CO、PaO2下降;TNF与RE正相关(r=O.965,P<O.01),与CO负相关(r=-0.824,P<O.05).结论严重蒸汽吸入性损伤激发TNF分泌,这是诱发肺损伤及循环系统甚至全身器官功能障碍的重要原因.     

烧伤患者血清sIL-2R水平的观察及临床意义

为探讨烧伤患者伤后免疫功能紊乱的可能机制以及烧伤患者病情监测、免疫状况评估的观察指标 ,动态观察了 35例大面积烧伤患者伤后一周、二周、三周及四周血清可溶性白介素 - 2受体 (s IL - 2 R)水平 ,并据烧伤严重程度分中、重、特重度烧伤组进行比较观察。结果发现 :(1)烧伤患者 s IL- 2 R水平明显高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,至伤后四周仍无恢复 ;(2 )特重度烧伤患者 s IL- 2 R水平明显高于重度烧伤患者 ,重度烧伤患者 s IL- 2 R水平明显高于中度烧伤患者 (P<0 .0 1)。结论 :升高的 s IL- 2 R是影响烧伤患者免疫功能的众多原因中的重要原因之一 ,伤后 s IL- 2 R水平的观察对烧伤患者病情的监测及免疫状况的评估有一定的临床意义。     

多巴酚丁胺负荷超声心动图中血流动力学变化对冠心病预后评价的意义

目的　探讨多巴酚丁胺负荷超声心动图 (DSE)中血流动力学变化对冠心病预后评价的意义。方法　用DSE方法观察 2 8例正常人 (A组 )和 80例冠心病 (CAD)病人 (B组 )血流动力学变化 ,通过长期随访 ,比较 2组的预后与血流动力学变化的关系。结果　随访 10 8例 ,B组共发生心脏事件 33例 ,其中硬性事件 14例 ,软性事件19例 ,而A组无心脏事件发生。A、B两组免于事件的累积生存率有显著性差异 (P <0 .0 1)。B组中发生心脏事件者 (BⅠ亚组 )与未发生心脏事件者 (BⅡ亚组 )血流动力学指标具有明显差异 (P <0 .0 1)。B组中最大负荷时收缩压 /收缩末期容积指数 (SBP/ESVI)正常者与低于正常值范围者累积生存率具有显著性差异 (P <0 0 1)。结论DSE期间诱发心肌缺血的因素如SBP/ESVI、室壁应力增加 ,外周血管阻力指数 (TVRI)轻度下降 ,HR、SBP、RPP增加等可以提供CAD病人发生心脏事件的预测信息 ,尤其是B组中最大负荷时SBP/ESVI低于正常值范围者 ,对于判断预后具有重要意义。     

人乳头瘤病毒16型(湖北株)E7基因在体内和体外的表达

构建人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）Ｅ７湖北株（ＨＢ）基因真核表达质粒,探讨其在哺乳动物体外,体内表达状况,为本地区ＨＰＶ相关肿瘤的基因治疗提供依据。方法采用分子克隆技术,构建ＨＰＶ１６Ｅ７－ＨＢ重组表达质粒,磷酸钙－ＤＮＡ沉淀技术及基因免疫技术将外源目的基因（ＨＰＶ１６Ｅ７－ＨＢ）导入ＮＩＨ３Ｔ３细胞及大、小鼠体内ＰＣＲ,ＲＴ－ＰＣＲ,免疫荧光染色技术对外源目的基因及其产物（ｍＲ－ＮＡ,蛋白质。     

Cyclin D1,p16在卵巢上皮性癌发生过程中的表达及相关性

研究ＣｙｃｌｏｎＤ１．ｐ１６在卵巢上皮性癌发生过程中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学ＳＡＢＣ法检测卵巢上皮性癌,交界性,良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织Ｃｙｃｌｉｎ,Ｄ１,ｐ１６的表达。结论ＣｙｃｌｉｎＤ１和Ｐ１６在卵巢上皮性肿瘤癌变过程中,两者表达水平的相关性反映了癌基因了与抑癌基因相互拮抗、抑制的机制。     

参附注射液对兔脊髓缺血损伤的保护作用

观察参附注射液对脊髓缺血性损伤的保护作用。方法１８只雄性新西兰大白兔,随机分为３组：Ａ组（ｎ＝６）即保护组,Ｂ组（ｎ＝６）即治疗组,Ｃ组（ｎ６）即对照组。Ａ组和Ｂ组分别于缺血前３０ｍｉｎ内或再灌注３０ｍｉｎ内持续恒速静脉输入参附注射液１０ｍＬ．ｋｇ＾－１;采用肾上主动脉阻断法造成脊髓缺血（２０ｍｉｎ）;术后观察神经功能变化并记录１,４,８,１２,２４和４８ｈ神经功能评分,４８ｈ处死动物后取脊髓（Ｌ     

铅对大鼠肠道神经元和血管平滑肌细胞NOS活性的影响

用β－ＮＡＤＰＨ组织化学方法研究铅对大鼠肠壁肌间神经佾内神经元和血管平滑肌一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的影响。结果发现：腹腔注射醋酸铅（４０ｍｇ．ｋｇ＾－１）１５ｄ后,大鼠肠道ＮＯＳ阳性神经无元和阳性纤维数量减少,且阳性神经元的形态也有不同程度的改变,肠壁内血管平滑肌ＮＯＳ活性下降。上述变化提示ＮＯ的生成减少可能是铅中毒时腹能的机制之一。     

补阳还五汤对TNFa诱导血管内皮细胞释放vWF及表达组织？…

OBJECTIVE: To study the effects of Buyang huanwu decoction (BHD) on the release of von Willebrand factor(vWF) and the expression of tissue factor(TF) activity induced by tumor necrosis factor alpha (TNF alpha) in cultured bovine aortic endothelial cells (BAECs). METHODS: BAECs from neonatal cox were cultured and 4-8 passages were used. Cells were incubated for 8 hours after addition of different treatments. The supernatant was used to measure vWF and BAECs lysate to determine TF activity. RESULTS: 1. Compared with the control, TNF alpha enhanced the expression of TF activity(12.79 +/- 2.59 vs. 4.69 +/- 0.83, P < 0.01) and the effects were in dose-dependent manner(r = 0.9712, P < 0.01); BHD inhibited the effects of TNF alpha(P < 0.01). 2. Compared with the control, TNF alpha promoted the release of vWF from endothelial cells (13.28 +/- 4.76 vs. 6.42 +/- 2.84, P < 0.01) and BHD inhibited the effect of TNF alpha(P < 0.01). CONCLUSION: BHD can inhibit the expression of TF and the release of vWF induced by TNF alpha.     

龙岩市蚊类调查报告

本文报道了1980—2000年闽西地区蚊类调查情况,调查表明;我市蚊为9属36种,未发现微小按蚊及嗜人按蚊,蚊虫全年均有活动,活动高峰为5—10月。人房蚊种主要为中华按蚊、致倦库蚊及三带喙库蚊,夜间活动高峰为21:00—凌晨3:00。同时也调查了白纹伊蚊季节消长及活动规律,为我市控制及消灭丝虫病、疟疾、乙脑及登革热提供了依据。