异体间充质干细胞移植治疗酮症起病1型糖尿病的临床疗效

目的：初步观察异体间充质干细胞（MSCs）移植对以酮症起病的初发1型糖尿病（T1DM）的疗效并探讨移植时病程对疗效的影响。方法筛选2009年1月至2012年1月于南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科就诊的以酮症起病的初发T1DM患者10例进行异体MSCs移植,其中4例行骨髓MSCs移植,6例行脐带MSCs移植。纵向观察患者胰岛素用量、糖化血红蛋白（HbA1c）、C肽的变化。按移植时病程不同将移植患者分为病程≤1个月组（4例）和病程>1个月组（6例）并作进一步分析。采用方差分析比较移植后不同周期各指标的变化,分层及协方差分析比较移植时病程对移植疗效的影响,生存分析比较胰岛功能衰竭速度。结果与移植前比较,移植后不同周期时10例T1DM患者平均胰岛素用量及HbA1c水平不同程度地降低,其中HbA1c于6、12个月时降低显著（7.2%±2.1%、7.2%±1.7%比10.3%±3.5%,F=4.435,P<0.05）;空腹C肽（FC?P）及餐后2 h C肽（2h C?P）较移植前无明显变化;移植后不同周期时,病程≤1个月组患者胰岛素用量的减少（6、12个月时）及2 h C?P的增加（6个月时）均显著高于病程>1个月组患者[（-0.40±0.64）比（0.08±0.23）U·kg?1·d?1、（-0.50±0.46）比（0.08±0.17）U·kg?1·d?1和（191±258）比（-244±276）pmol/L,F=7.94、16.21、8.69,均P<0.05];移植后各周期时,病程≤1个月组患者胰岛功能衰竭速度低于病程>1个月组患者（χ2=3.74,P=0.05）。结论异体MSCs移植能够改善酮症起病初发T1DM患者的糖代谢水平,减少胰岛素用量;移植时的病程可能是移植疗效的重要影响因素。     

IRF1对M1巨噬细胞极化及其抗肿瘤效应的影响

目的研究IRF1对M1巨噬细胞极化及M1介导的抗肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法构建单核细胞U937来源M1巨噬细胞模型(U937-M1),将细胞分为4组:用PMA诱导的未活化巨噬细胞组(M0),用PMA,IFN-γ和LPS处理的M1型巨噬细胞组(M1),用siRNA干扰IRF1的M1型巨噬细胞组(si IRF1)以及阴性干扰的M1型巨噬细胞组(si C)。用流式细胞术检测M1/M2特异表面标志物CD86/CD206的表达;q PCR检测M1/M2相关基因(IL-12p35,IL-12p40,IL-23p19,IL-6,TNF-α/IL-10)及IFNB1的表达;ELISA检测IL-12p70,IL-10及IFN-β的表达;Western blot检测IRF1及IRF5的表达;CCK8和流式细胞术分别检测Hep G2及SMMC-7721增殖和凋亡。结果与U937-M1组相比,干扰IRF的M1组CD86表达降低,但CD206升高(P0.05);mRNA水平上,IL-12p35,IL-12p40,IL-23p19,IL-6,TNF-α以及IFNB1表达降低,但IL-10表达增高(P0.01);蛋白水平上,IL-12p70,IFN-β及IRF5表达降低,但IL-10表达增高(P0.05)。IRF1干扰后,M1巨噬细胞促进肝癌细胞增殖、抑制其凋亡(P0.05)。结论干扰IRF1后,M1巨噬细胞极化状态受损,甚至部分向M2型转变;其抗肿瘤效应转变为促肿瘤效应;且IRF1可能参与调节IFN-β与IRF5的表达。     

清洁间歇性导尿术在宫颈癌根治术后膀胱功能快速康复中的应用

目的 探讨清洁间歇性导尿术在宫颈癌根治术后膀胱功能快速康复中的应用效果。 方法 选择72例行宫颈癌根治术后存在膀胱功能障碍的患者,将其随机分为实验组和对照组各36例,实验组采用清洁间歇性导尿术,对照组采用留置导尿,比较2组患者术后1月的尿流动力学检查结果、尿路感染率和自主排尿时间的差异。 结果 术后1月实验组患者尿流动力学恢复正常率高于对照组(χ²=14.961,P<0.001),尿路感染率低于对照组(χ²=4.741,P=0.029),恢复自主排尿时间短于对照组(t=-4.157,P<0.001)。 结论 清洁间歇性导尿能促进宫颈癌根治术后膀胱功能的快速康复,减少尿路感染的发生。     

流式细胞术检测体外微核方法的建立

目的： 建立96孔板流式细胞术体外微核自动化检测的方法,并探讨其用于药物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价的可能性。方法：试验分为+S9短时处理组(4 h)和-S9持续处理组(24 h),分别选择3个不同浓度的环磷酰胺和丝裂霉素C处理CHO-K1细胞,24 h后收获细胞。采用EMA和SYTOX Green双色标记,流式细胞仪分析96孔板的微核率,并与常规标准平皿培养、细胞分裂阻滞法的双核微核结果进行比较。结果：在有或无S9处理条件下,不同浓度的环磷酰胺、丝裂霉素C诱导产生的微核率较溶剂对照组均显著增加(P均<0.05),剂量-效应关系明显。两种微核检测方法的Spearman相关系数(rs)为1.000。结论：流式细胞术检测环磷酰胺、丝裂霉素C作用于CHO-K1细胞的微核试验结果均为阳性,与文献报道一致,因而本试验初步建立了流式细胞术体外微核检测方法。流式细胞术检测微核的方法与人工阅片的方法相关性好,提示该方法用于化合物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价具有良好的前景。     

1 585 例甲状腺癌的临床病理特点及总结分析

目的:研究甲状腺乳头状癌（pnpillary thyroid cancer,PTC ）的发病趋势及临床病理特点。方法:回顾性分析湖北省人民医院2001年1 月至2013年7 月甲状腺疾病和湖北省肿瘤医院2006年1 月至2013年7 月甲状腺癌的临床病理资料。结果:湖北省人民医院自2008年以来,甲状腺癌发病明显升高,由14.94% 上升至18.10% ,其中甲状腺乳头状癌所占比例明显上升,由2008年的15.23%（46/302）上升至2012年的19.32%（166/859）。 两家医院中,甲状腺乳头状癌所占比例明显上升,由85.33%（378/443）上升至90.89%（1 038/1 142）;微小乳头状癌比例由9.26%（35/378）上升至22.83%（237/1 038）;确诊甲状腺乳头状癌患者1 416 例,男女比例为1:3.75;颈部淋巴结阳性检出率在性别、年龄方面相比均有显著性差异（P<0.05）,多病灶甲状腺乳头状癌患者颈部淋巴结阳性检出率为77.94% ,与单病灶甲状腺乳头状癌患者相比有显著性差异（P<0.05）。 单纯甲状腺乳头状癌患者颈部淋巴结阳性检出率为72.29% ,与合并结节性甲状腺肿者及合并桥本氏甲状腺炎者相比有显著性差异（P<0.05）。 结论:甲状腺乳头状癌的发病呈增长趋势,男性、年龄<45岁肿瘤直径>1 cm、多病灶肿瘤、单纯PTC 更易并发颈部淋巴结转移。      

番石榴叶总黄酮对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖代谢及胰岛素信号通路的影响

目的:研究番石榴叶总黄酮对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖代谢及胰岛素信号通路相关分子表达的影响,探索其降糖作用机制。方法:雄性BALB/c小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)60 mg·kg-1连续5 d后,血糖仪检测空腹血糖水平,以连续3 d空腹血糖浓度>11.1 mmol·L-1为糖尿病模型成功标准。糖尿病小鼠随机分为模型组和番石榴叶总黄酮低、中、高剂量治疗组,每组10只,另设10只正常小鼠。低、中、高剂量治疗组分别以番石榴叶总黄酮0.093,0.186,0.372 g·kg-1灌胃,正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃,2周后测其空腹血糖、病理观察胰岛数目及形态学改变、荧光PCR法检测肝葡萄糖激酶(glucokinase,GK),葡萄糖激酶调节蛋白(glucokinase regulatory protein,GKRP),葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter 2,GLUT-2),胰岛素生长因子-1(insulin growth factor-1,IGF-1),胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1),胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)表达。结果:与正常组比,模型组小鼠体重明显降低(P<0.01),血糖明显升高(P<0.01);胰岛变性明显,胰岛数目明显减少、体积变小、甚至消失;肝GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1和IRS-2表达下降,GKRP表达增高。与模型组比,番石榴叶总黄酮治疗组血糖明显降低(P<0.05),胰岛数目明显增多;GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1和IRS-2表达升高,GKRP表达下降,中剂量组治疗效果最好(P<0.05)。结论:番石榴叶总黄酮低、中、高剂量均能明显降低STZ糖尿病小鼠血糖水平,可能与其增强肝脏GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1,IRS-1表达,降低肝GKRP表达及促进胰岛再生有关。     

地榆中总鞣质超声提取工艺研究

目的:优选地榆中鞣质最佳提取工艺。方法:以提取物中总鞣质含量为指标,通过单因素试验研究提取溶剂、料液比、超声提取时间、超声提取次数等四个因素对总鞣质提取率的影响,利用正交试验确定地榆总鞣质最佳提取工艺。结果:地榆鞣质的最佳提取工艺为:12倍量的40%的乙醇,超声提取2次,每次75min。在最佳条件下,提取率为9.113%。结论:该工艺合理可行,重复性好,地榆鞣质的提取率高。     

盐酸小檗碱纳米胶束的制备、表征及体外抗肿瘤活性的研究

以聚乙二醇维生素E琥珀酸酯(TPGS)为载体材料,以盐酸小檗碱为模型药物,采用薄膜水化法构建盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BER)纳米胶束(BER-PMs),以改善其溶解性和体外抗肿瘤效果。分别采用透射电子显微镜观察纳米胶束的形态;粒度测定仪考察其粒径和Zeta电位;超速离心法考察载药胶束的包封率和载药量;动态膜透析法测定载药胶束的体外释药特性;四甲基偶氮唑盐(MTT)法研究其对人乳腺癌细胞(MCF-7)的抑制作用。结果表明,所制备的BER-PMs平均粒径为(12.45±1.46) nm;粒径均一且呈球形;载药量和包封率分别为(5.7±0.22)%,(95.67±5.35)%;Zeta电位为(-1.12±0.23) mV;在体外pH 7.4,6.5的磷酸盐缓冲液中,24 h内分别释放37.20%,41.14%;同时与BER相比,BER-PMs能更显著地抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.05)、促进细胞的凋亡,提高BER的体外抗肿瘤活性。因此,所构建的盐酸小檗碱胶束能更有效地促进MCF-7细胞的凋亡,提高药物的体外抗肿瘤效果。     

Quantification of arterial cerebral blood volume using multiphase-balanced SSFP-based ASL

A new technique is introduced in this study for in vivo measurement of arterial cerebral blood volume by combining arterial spin labeling with a segmented multiphase balanced steady-state free precession (bSSFP) readout sequence. This technique takes advantage of the phenomenon that the longitudinal magnetization of flowing blood is not or only marginally disturbed (besides T(1) relaxation) by the bSSFP ± α pulse train. When the blood water exchanges into tissue, it becomes quickly saturated by the bSSFP pulse train due to 0 velocity and reduced T(1), T(2) relaxation times. Therefore, labeled blood water behaves like an intravascular contrast agent in multiphase bSSFP scans, and can be used to quantify arterial cerebral blood volume in a similar way as dynamic susceptibility contrast MRI. Both Bloch equation simulation and in vivo experiments were carried out to demonstrate the feasibility for quantifying cerebral blood volume in arteries, arterioles, and capillaries using two variants of the proposed method. Functional MRI of visual cortex stimulation was further performed using multiphase bSSFP-based arterial spin labeling and compared with vascular-space occupancy contrast. The proposed multiphase bSSFP-based arterial spin labeling technique may allow separation of cerebral blood volume of different vascular compartments for functional MRI studies and clinical evaluation of the cerebral vasculature.