加味四逆散长期毒性实验及安全性评价

目的通过长期毒性试验，观察加味四逆散对SD大鼠所发生的各种毒性反应，以评价加味四逆散的安全性。方法SD大鼠80只，雌雄各半，随机分为4组（空白对照组、加味四逆散高、中、低剂量组）每组各20只，三个用药组灌胃18w及停药2w后分别检测体重、血象、肝功、肾功、脏器系数及脏器组织病理。结果各给药组大鼠的血象、肝功、肾功、脏器系数分别与对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。光镜下高剂量组大鼠心肌见嗜碱性变，心肌轻度充血，其余各组大鼠心脏结构清楚，肌纤维未见变性、坏死、断裂、心内外膜以及间质未见明显变化；停药2w后，各组动物脏器组织均正常，各给药组大鼠的血象、肝功、肾功、脏器系数分别与对照组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。结论加味四逆散口服给药对正常大鼠的一般行为无明显影响，对大鼠肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、子宫、卵巢、睾丸及肾上腺等组织无明显影响；长期高剂量口服给药对大鼠心脏有轻度的可逆性损伤；本实验表明加味四逆散停药后对大鼠无延迟毒性作用；对正常大鼠总体是基本安全的。     

硼替佐米联用组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导血液肿瘤细胞凋亡的效率

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)抑制剂曲古菌素A (trichostatin A, TSA)、Apicidin与Bortezomib单药及联合应用对恶性血液病肿瘤细胞凋亡的影响.方法 应用200～2 000 nmol/L TSA、 Apicidin, 5～80 μmol/L Bortezomib分别处理恶性血液病肿瘤细胞株K562、 SHI-1、 Jurkat 24 h, 用流式细胞仪检测细胞凋亡.根据流式细胞术结果选取TSA 800 nmol/L,Apicidin 400 nmol/L分别与5～80 μmol/L Bortezomib联合作用于K562细胞,TSA 1 000 nmol/L, Apicidin 400 nmol/L分别与Bortezomib联合作用于SHI-1细胞,TSA 600 nmol/L, Apicidin 600 nmol/L分别与Bortezomib联合作用于Jurkat细胞.以上药物作用24 h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡并绘制浓度-凋亡曲线.分别以Apicidin 200 nmol/L,Bortezomib 20 μmol/L及Apicidin 200 nmol/L 与Bortezomib 5 μmol/L联用作用于K562细胞24 h, 用Western blot检测 Bcl-XL蛋白的表达差异.结果 TSA、Apicidin、Bortezomib均可促进K562、Jurkat、SHI-1细胞凋亡.TSA、Apicidin分别与Bortezomib联用,可导致K562、SHI-1细胞系凋亡率的明显提高,而对 Jurkat 细胞系没有明显影响.Bcl-XL蛋白在Apicidin与Bortezomib联用24 h组较对照组及单一药物处理组表达水平明显下调.结论 小剂量Bortezomib联合TSA或Apicidin应用于K562、SHI-1细胞系,可以明显提高细胞凋亡率,此时,TSA、Apicidin用量较用单药时显著减少.     

乙醇对兔心室肌细胞L-型钙离子通道电流的影响

【目的】观察乙醇对兔心室肌细胞L-型钙离子通道电流（ICa,L）的影响。【方法】采用蛋白酶消化的成年兔单个心室肌细胞及膜片钳全细胞技术，记录不同浓度乙醇对ICa,L的作用。【结果】（1）乙醇抑制ICa,L峰值，24mmol／L和240mmol／L乙醇抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）24、80、240mmol／L乙醇使ICa,L的电流一电压（I—V）曲线上移，在各测试电压下，电流均减小，但不影响曲线形状，用乙醇后最大激活电压仍在0mV左右。【结论】致毒浓度（24mmol／L）的乙醇对ICa,L具有明显抑制作用。可导致心肌产生负性肌力作用，动作电位时程缩短，诱发心律失常。     

Association between the serotonin 1A receptor C（-1019）G polymorphism and major depressive disorder in the northern Han ethnic group in China

Background Recent studies have suggested that susceptibility to major depressive disorder （MDD） might be related to the serotonin 1A receptor （5-HTR1A） C（-1019）G polymorphism. In this study, we aimed to assess the association between 5-HTR1A C（-1019）G polymorphism and MDD in the Northern Han ethnic group of China.
Methods The C（-1019）G of 5-HTR1A was detected with polymerase chain reaction （PCR） in 400 patients with MDD and 400 unrelated age- and sex-matched healthy control subjects. Association between the C（-1019）G and MDD was statistically analyzed.
Results There was a statistically significant difference between MDD patients and controls in both the genotype distribution （X^2=10.913, df=2, ,P=0.004） and the allele frequency （X^2=10.379, df=1, P=0.001 ）, and a significant difference in the genotype distribution and the allele frequency was found both in the female subjects （Genotype distribution： X^2=15.406, df=2, P=0.000; allele frequency： X^2=15.552, df=1, P=0.000） and the late-onset subjects （Genotype distribution X^2=7.771, df=2, P=0.021 ; allele frequency： X^2=8.007, df=1, P=0.005） in the two groups.
Conclusion These results suggest that 5-HTR1A C（-1019）G polymorphism is probably associated with MDD and it is likely to be the susceptible gene locus for the female and late-onset MDD.     

动脉粥样硬化遗传易感性与HUMARA多态性的相关性

目的 研究HUMARA基因多态性在陕西地区老年动脉粥样硬化（AS）人群中分布规律及其该位点与AS遗传易感性的关系。方法 应用多聚酶链反应（PCR）对96例老年AS患及92例非AS老年人HUMARA－STR（短串联重复序列short tandem repeats)位点进行多态性分析。结果 在HUMARA位点重复单位：CAG,对照群体片段大小在280－445bp之间,重复次数为N＝23－77,杂合度为83％,多态信息量（PIC）为0．76;AS人群中HUMARA位点,其片段大小在220－445bp之间,重复次数为N＝2－77,杂合度为89％,PIC为0．80。两组的基因频率分布比较无显性差异,但将男性的AS组与对照比较差异有显性;女性的AS组与对照比较差异无显性;正常组男性与女性比较差异无显性;AS组男性与女性比较差异有显性。结论 HUMARA基因多态位点可能作为男性易患动脉粥样硬化的遗传标记。     

DeBakey Ⅰ、Ⅱ型主动脉夹层的外科治疗

目的 总结DeBakeyⅠ、Ⅱ 型主动脉夹层的外科治疗经验,探讨其手术指征、基本方法和手术技术。方法 对131例DeBakeyⅠ、Ⅱ型主动脉夹层患者实施手术治疗,其中25例行升主动脉＋部分主动脉弓替换术,83例行主动脉根部替换术（Bentall‘s手术）,10例行升主动脉替换＋全弓替换术,4例行细胞感升主动脉替换＋主动脉瓣替换术（Wheats),3例行主动脉根部替换术＋全弓替换术,4例行“象鼻手术”（(Elephant Trunk),2例行主动脉根部替换＋象鼻技术。结果 本组死亡4例,死亡率3．05％。急诊手术44例,死亡3例,死亡率6．81％。择期手术87例,死亡1例,死亡率1．1％。结论 早期手术治疗是降低DeBakeyⅠ、Ⅱ型主动脉夹层病死率的关键。右锁骨下动脉插管,深低温停循环结合选择性脑灌注是一种简便易行的脑保护方法,有利于降低该病死亡率和并发症的发生率。     

骨关节炎滑膜中尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体蛋白的表达

OBJECTIVE: To study the expression of urokinase-type plasminogen activator (uPA) and its receptor (uPAR) in the synovial tissures, and the significance of uPA and uPAR in degradation of extracellular matrices in osteoarthritis (OA), then analyse the possible relationship between uPA and uPAR. METHODS: Immunohistochemical analysis technique was used to detect uPA and uPAR protein expression and distribution in synovial tissues in 26 OA patients and 10 mormal individuals. RESULTS: Positive staining of uPA and uPAR protein were detected in 19 cases in the 26 OA samples (73%), while only 2 positive cases were seen in the 10 mormal tissues (20%). The expression rate of uPA protein was markedly higher in OA than in the normal (P < 0.01). The expression of uPAR was seen in 14 cases in all 26 OA samples (54.6%), while there was only one case in 10 normal samples (10%), the positive rate was significantly higher in OA than in normal samples (P < 0.05). Positive expression of uPA and uPAR proteins were found in synovial lining cells, mononuclear cells, macrophage-like cells and endothelial cells. Using the correction analysis, we found a positive correlation between uPA and uPAR reactivity in the synovial tissues in OA (r = 0.920, P < 0.01). CONCLUSIONS: The high expression of uPA and uPAR protein in OA synovial tissues indicate that the uPA system may play an important role in the process of synovitis and degradation of OA cartilage extracellular matrices. In the pathologic process of OA, uPA and uPAR coordinate each other, lead to the genesis and development of OA cartilage degradation.     

人肝癌特异性EB病毒载体—p^EBAF介导hGM—CSF基因的转移及表达

目的：探索人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法：构建p^EBAF/hGM-CSF基因克隆,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白（AFP）的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC7721,构建两围基因的细胞克隆HepG2/hGM-CSF,SMMC7721/hGM-CSF,用MTT比色法测定细胞上清中hGM-CSF活性。结果：HepG2/hGM-CSF细胞上清hGM-CSF活性平均为46．5ng/ml/10^6/24h,SMMC7721细胞上清中无明显hGM-CSF活性。结：载体p^EBAF介导的hGM-CSF基因能在分泌AFP的肝细胞中获得特异性表达。     

NK细胞功能亚群：“NKh1和NKh2”的初步验证

目的 证实NK细胞存在与T细胞类似的Th1/Th2两类亚群。方法 从健康人外周血分离纯化NK细胞,利用促漂移和RT－PCR的技术,检测外周血静止的NK细胞及在不同极化条件下培养的NK细胞表达I和II类细胞因子的情况。结果 采用补体裂解法＋单抗铺皿法分离纯化15例人外周血NK细胞,TR－PCR方法检测NK细胞表达的两类因子,发现外周血静止NK细胞因子的表达较强,主要是IFNγ,Ⅱ类细胞因子中主要是IL－10、IL－13、IL－13。在促Th1极化条件下,NK细胞中表达的I类细胞因子I类细胞因子IFNγ明显增强,Ⅱ类细胞因子表达减强,而在促Th2极化状态下,NK细胞表达的IFNγ水平下降,Ⅱ类细胞因子的表达水平升高。静止和Ⅱ类细胞因子状态下NK细胞均表达极低水平或不表达IL－4。结论 NK细胞根据其产生的细胞因子可以分化为两个亚群。暂命名为NKh1和NKh2。外周血静止的NK细胞主要以NKh1表型为主,两个亚群均表达较高水平的IFNγ,这与NK细胞的杀伤功能是密切相关的。     

肝硬化患者胰高糖素负荷的血c—AMP及血糖反应性观察

目的观察肝硬化患者对胰高糖素负荷后的血c-AMP及血糖反应能力.方法38例肝硬化患者按Child-Pugh肝功能分级,分为A级(10例),B级(14例),C级(14例)三个亚组.11例健康者为对照组.清晨空腹静卧,套管针肘静脉穿刺并固定15min后采集基础血c-AMP和血糖标本,即刻以每公斤体重2.5μg胰高糖素快速静脉注射(30s内),分别于注射后5,15,30及45min采集血c-AMP和血糖标本.以放射免疫法测定血浆c-AMP浓度.以葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度.结果肝硬化各组与对照组比较,基础血浆c-AMP浓度均显著高于对照组,而基础血糖无显著差异.胰高糖素负荷后5min血浆c-AMP浓度即明显增高,于10～15min达高峰,多数达峰时间在10min;血糖于5min开始升高,15～30min达高峰,多数达峰时间在30min,肝硬化各组的血c-AMP及血糖反应曲线均低于对照组,且肝硬化严重程度愈重,血c-AMP及血糖反应曲线愈低,峰值血浆c-AMP及峰值血糖浓度,肝硬化总体(122.08±84.39pmol/ml,5.71±0.75mmol/LA级(148.07±85.08pmol/ml,6.25±0.48mmol/L)、B级(120.47±173.34pmol/ml,5.84±0.60mmol/L)及C级(83.04±50.96pmol/ml,5.11±0.67mmol/L)均显著低于对照组(219.47±173.34pmol/ml,7.28±0.89mmol/L),且随肝硬化严重程度增加而显著降低.结论肝硬化患者对胰高糖负荷的血c-AMP及血糖反应能力减弱,且随肝硬化严重程度增加而减弱.