小鼠谷胱甘肽S转移酶K1启动子荧光素酶报告基因的构建及功能鉴定

目的:构建小鼠谷胱甘肽S转移酶K1(mGSTK1)启动子荧光素酶报告基因质粒,并分析其活性。方法:根据GeneBank中mGSTK1基因序列设计引物,应用PCR技术扩增mGSTK1启动子片段,插入pGL3-basic载体,获得mGSTK1启动子报告基因质粒pGL3-mGSTK1-2046。再以pGL3-mGSTK1-2046为模板,进一步构建了2个5’端部分缺失的报告基因质粒:pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76。将构建的报告基因质粒瞬时转染不同的细胞株3T3-L1和人胚肾(HEK)293,48 h后检测荧光素酶的活性。结果:所构建的质粒经酶切、测序鉴定正确。pGL3-mGSTK1-2046在3T3-L1和HEK293中均有不同程度的转录活性。将pGL3-mGSTK1-2046、pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76转染HEK293细胞,结果显示pGL3-mGSTK1-936转录活性最高,而pGL3-mGSTK1-76转录活性显著降低。结论:成功构建mGSTK1启动子荧光素酶报告基因质粒;翻译起始点上游的-971～-111 bp片段是mGSTK1启动子的重要区域。为深入了解mGSTK1启动子的调控机制以及今后对代谢性疾病的治疗提供一定的实验基础。     

非小细胞肺癌组织中Bmi-1的表达及临床意义的meta分析

目的探讨B细胞特异性莫洛尼白血病毒插入位点1(Bmi-1)的表达与非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)的关系。方法检索Pubmed、Embase、Web of Science、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方和维普数据库,检索日期自数据库建库至2015-03,同时采用文献追溯、手工检索等方法查找有关Bmi-1与NSCLC的中英文病例-对照研究,按照已拟定的纳入与排除标准筛选符合系统性评价标准的研究。提取Bmi-1与临床病理特征相关数据,如性别、年龄、病理组织学分型等,应用Rev Man5.2软件进行数据分析。结果最终纳入11篇病例-对照研究,其中NSCLC组697例,对照组504例,meta分析结果显示Bmi-1在NSCLC组织中的表达水平明显高于对照组(P0.01);Bmi-1表达与NSCLC分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关(P均0.01),但与其病理分型、肿瘤大小无明显相关(P均0.05)。结论 Bmi-1表达水平的检测可能成为NSCLC早期诊断、预后判断及疗效监测的新方法。     

不同组别慢性阻塞性肺疾病急性加重期的常见致病菌及耐药性分析

目的：探讨不同组别慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)的常见病原体,并对其耐药性进行分析,为临床经验性选择抗生素提供指导。方法收集我院2010—2014年收住入院的 AECOPD 患者536例,按照2013年 GOLD指南综合评估分为 A、B、C、D 4组。对536例 AECOPD 患者的痰标本进行细菌培养和药敏检测。结果536例患者中共有311例患者痰标本检出病原菌,检出率为58.02%,共检出病原菌368株,有45例同时检出两株或两株以上的病原菌。其中革兰阳性球菌115株,检出率最高的为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌;革兰阴性杆菌224例,病原菌依次为肺炎克雷伯菌、绿脓杆菌、大肠埃希菌、流感嗜血杆菌;真菌共检出29株。A 组检出率最高的细菌为肺炎链球菌及金黄色葡萄球菌。B 组为流感嗜血杆菌及卡他莫拉菌。C 组为肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌。D 组为绿脓杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌等。药敏结果显示革兰阳性菌对阿奇霉素、复方新诺明、红霉素、阿莫西林克拉维酸、头孢曲松耐药率均较高,未发现对万古霉素及利奈唑胺耐药菌株。碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌逐年增加,此类细菌往往对临床常用的抗生素呈现耐药。绿脓杆菌对亚胺培南的耐药率高达35.6%。结论不同组别的 AECOPD 患者的致病菌不一样,且目前细菌耐药现状严峻,临床医师使用抗生素时应根据患者的综合评估、细菌耐药性情况,制定合理的抗感染治疗方案。     

青藏高原藏羚羊粪便携带小双节RNA病毒调查分析的研究

目的 调查小双节RNA病毒(Picobirnavirus,PBV)在藏羚羊粪便中的携带情况,并对序列进行分析.方法 提取160份藏羚羊粪便样品总RNA,利用转录组测序得到藏羚羊PBV序列,并且采用巢式RT-PCR验证大于1 500 nt接近全长的序列.基于藏羚羊PBV的RNA依赖性RNA聚合酶(RNA-dependen...     

Clinical and economic outcomes of a multidisciplinary team approach in a lower extremity amputation prevention programme for diabetic foot ulcer care in an Asian population: A case‐control study

Present guidelines recommend a multidisciplinary team (MDT) approach to diabetic foot ulcer (DFU) care, but relevant data from Asia are lacking. We aim to evaluate the clinical and economic outcomes of an MDT approach in a lower extremity amputation prevention programme (LEAPP) for DFU care in an Asian population. We performed a case‐control study of 84 patients with DFU between January 2017 and October 2017 (retrospective control) vs 117 patients with DFU between December 2017 and July 2018 (prospective LEAPP cohort). Comparing the clinical outcomes between the retrospective cohort and the LEAPP cohort, there was a significant decrease in mean time from referral to index clinic visit (38.6 vs 9.5 days, P < .001), increase in outpatient podiatry follow‐up (33% vs 76%, P < .001), decrease in 1‐year minor amputation rate (14% vs 3%, P = .007), and decrease in 1‐year major amputation rate (9% vs 3%, P = .05). Simulation of cost avoidance demonstrated an annualised cost avoidance of USD $1.86m (SGD $2.5m) for patients within the LEAPP cohort. In conclusion, similar to the data from Western societies, an MDT approach in an Asian population, via a LEAPP for patients with DFU, demonstrated a significant reduction in minor and major amputation rates, with annualised cost avoidance of USD $1.86m.     

乳腺癌新辅助化疗后临床评价与病理评价的差异分析

目的 探讨乳腺癌新辅助化疗后,临床疗效评价与病理评价之间存在差异的病理学基础.方法 收集中国医学科学院肿瘤医院2005年6月至2007年12月施行乳腺癌新辅助化疗的209例.新辅助化疗前均行核芯针穿刺活检.化疗结束后4周内实施乳腺癌根治术.新辅助化疗前后均对乳腺原发灶进行临床体检、乳腺X线检查和(或)超声检查.实施新辅助化疗后,依实体瘤的疗效评价标准(RECIST,1.1版)对乳腺癌原发灶进行临床疗效评价,依Miller和Payne(MP)分级系统进行病理评价.应用SPSS 15.0软件分析临床评价与病理评价的相关性.结果 (1)新辅助化疗后依临床体检结果进行临床评价:完全缓解33例,部分缓解124例,疾病稳定41例,疾病进展11例.(2)新辅助化疗前后均行乳腺X线检查87例,依乳腺X线检查进行临床评价:完全缓解8例,部分缓解42例,疾病稳定37例.(3)新辅助化疗后MP分级病理评价:1级14例,2级35例,3级106例,4级36例,5级18例.(4)临床体检相关的临床评价与病理评价存在统计学相关性(x2=33.668,P=0.001),乳腺X线检查相关的临床评价与病理评价存在统计学相关性(x2=22.404,P=0.004).(5)新辅助化疗病理评价与X线检查相关临床评价存在差异的病理学改变有:残存浸润癌以脉管瘤栓为主要表现形式;伴有大片黏液湖形成的黏液腺癌;导管内癌残存,伴明显沙砾样钙化及周围组织的沙砾样钙化;间质结节状纤维化等.结论 乳腺癌新辅助化疗的临床评价与病理评价存在统计学相关性.两者之间的差异有相应的病理学基础.伴有大片黏液湖形成的黏液腺癌、导管内癌的残存伴沙砾样钙化及间质结节状纤维化可能是临床评价低估治疗疗效的原因之一;而残存癌表现为脉管瘤栓可能是临床评价高估治疗疗效的原因之一.     

ERK在ALR抑制免疫过程中的变化及意义

目的观察肝再生增强因子(ALR)对外周血单核细胞增殖时ERK的影响,以探明ALR免疫抑制相关机理。方法梯度离心法分离健康人外周单核细胞,用ConA 5μg/ml刺激细胞增殖,选定最佳研究时间;观察不同剂量ALR抑制功能,选用最佳抑制剂量;利用Western blot检测ALR抑制细胞增殖时ERK的磷酸化改变。结果 ConA刺激细胞增殖最佳时间是60 h,ALR能抑制细胞增殖,并呈剂量依赖关系,30μg/ml ALR抑制效果最显著;ALR对单核细胞无直接增殖作用。ConA能引起ERK含量和磷酸化明显增加,ALR则抑制ConA对ERK的刺激,以抑制ERK2最明显。结论 ALR可能通ERK的含量和抑制ERK2的磷酸化抑制细胞增殖。     

The Lupus-derived Anti-double-stranded DNA IgG Contributes to Myofibroblast-like Phenotype in Mesangial Cells

Anti–double-stranded DNA (dsDNA) antibodies have been indicated to play a major role in the pathogenesis of lupus nephritis (LN), which is characterized by mesangial alterations, including phenotypic changes. To explore the effects of anti-dsDNA antibodies on the phenotype of mesangial cells (MCs), the anti-dsDNA IgG in sera and histological features of glomeruli were analyzed in the mice models of immune-complex glomerulonephritis. The MCs were cultured in vitro with the addition of anti-dsDNA or non-anti-dsDNA IgG. Compared to the anti-dsDNA-negative controls, the serum positive mice had increased extracellular matrix accumulation and higher alpha-smooth muscle actin expression in the mesangial region. The anti-dsDNA IgG enhanced the synthesis of transforming growth factor beta, alpha-smooth muscle actin, and fibronectin, and even induced the myofibroblast-like morphological features in cultured MCs. Our results indicated that anti-dsDNA antibodies contribute to the phenotypic changes in MCs, which suggests another mechanism of renal injuries in LN induced by anti-dsDNA antibodies.     

小规模限制性在线课程教学模式在人体解剖学教学中的实践

<正>近年来,慕课及翻转课堂作为新型教学模式受到了前所未有的追捧,但慕课在高校实施过程中,对学生学习过程的监控、指导水平都不够高~([1]),而普通教师也很难开发出实施翻转课堂需要的学习资源。于是,结合慕课资源和翻转课堂教学的小规模限制性在线课程(small private online course,SPOC),即小规模限制性在线课程应运而生。SPOC是一种"线上+线下"的混合教学模式,这种模式能够有效解决上述问题,让学校教育扬长