RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

目的：通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸（siRNA）表达载体，鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE．1基因表达的干涉作用。方法：化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链，克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上，重组构建核糖核酸干扰（RNAi）质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜，检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达，以了解siRNA的干涉效果。结果：重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析，表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点，且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测，2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论：载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi，为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用，分析基因功能，展开肿瘤基因治疗奠定了基础。     

膀胱肿瘤2350例临床病理学特点分析

目的 探讨膀胱肿瘤的发病现状、总体趋势和病理特点.方法 整理1980-2007年2350例膀胱肿瘤病理档案,分为1980-1989、1990-1999和2000-2007年3个时间段.应用SPSS 13.0软件分析3时间段患者性别、年龄及肿瘤组织学类型间的关系.结果 2350例膀胱肿瘤中男1854例,女496例.良性92例,恶性2258例,膀胱恶性肿瘤的发病人数逐年上升.发病高峰年龄从50～69岁推迟到60～79岁.1980-1989、1990-1999和2000-2007年3个时间段中男、女恶性肿瘤病例数分别为524例和113例(4.64:11 00)、589例和164例(3.59:1.00)、675例和193例(3.50:1.00),男性约为女性的3.80倍;3时间段男性发生膀胱尿路上皮癌年龄分别为(57.5±11.7)、(62.6±12.3)、(65.9±11.3)岁,女性分别为(58.7±13.6)、(60.7±12.1)、(65.8±12.0)岁,男女各年龄段分别比较差异有统计学意义(P<0.05).男性发生鳞状细胞癌、尿路上皮癌和腺癌年龄分别为(68.05±9.7)、(59.85±14.1)、(63.4±9.9)岁,差异有统计学意义(P相似文献   

甲基苯丙胺抗体、疫苗以及检测试纸研究进展

苯丙胺类兴奋剂(amphetamine-type stimulants,ATS)是21世纪主要流行滥用的药物之一,目前社会上流行的"冰毒","摇头丸"等属于此类毒品,主要有甲基苯丙胺(methamphetamine,METH),亚甲基二氧基甲基苯丙胺(MDMA)等.在我国,此类毒品无论是在舞厅、迪吧或其它公共娱乐场所和地下色情场所等都很容易获得,导致滥用人群日益扩大[1],影响社会治安和社会稳定.虽然世界各国在药物滥用防治工作中投入了大量的人力、物力、财力,但收效甚微,对ATS依赖者目前治疗多采用强制戒毒、对症治疗和辅以心理治疗等方法,但治疗时间长,复吸率高[1-4],对于高危人群目前还没有一种有效的预防手段.检测ATS多用高效液相色谱(HPLC)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)、薄层色谱(TLC)等[2]方法,其设备昂贵,难以开展现场检测,应用范围受限,并不适合于现场快速便捷检测,因而探索对ATS更有效的预防、治疗方法和更便捷的现场检测方法,极具现实意义.     

螺旋CT三期扫描对肝纤维化诊断价值研究

目的探讨螺旋CT三期扫描对肝纤维化的诊断价值。方法对66例经肝穿刺活检病理证实的慢性乙型肝炎肝纤维化患者组和42例正常对照组进行螺旋CT三期增强扫描。根据纤维化程度分期进行影像资料和相关指标的统计分析。结果肝左叶增大,肝表面形态及肝实质密度的改变,脾脏增大,门静脉增宽和侧枝循环的建立等影像学改变,随着肝纤维化严重程度的加重而有统计学差异。本研究显示57例肝纤维化患者螺旋CT三期扫描诊断肝纤维化52例,敏感性91.2%,特异性77.8%。各期肝纤维化分期准确28例,准确率49.1%;准确判断轻度纤维化(S1、S2)或重度纤维化(S3、S4)44例,准确率77.2%,诊断早期肝硬化16例,准确率84.2%。结论螺旋CT三期扫描能判断肝纤维化的程度,而且是动态观察肝纤维化的病程演进和临床随访的有效手段。     

儿童安装永久性心脏起搏器方法的临床探讨

目的总结儿童永久性心脏起搏器植入、随访和并发症处理的经验。方法(1)对III度房室传导阻滞儿童植入永久性心脏起搏器,术后1周,1、3、6、12个月及此后每年均进行随访,随访时行心电图、胸片、心脏超声心动图检查,并对起搏器参数和起搏阈值进行检测。(2)对随诊中出现的6例并发症(其中囊袋感染2例、固定胶套磨破皮肤感染2例、绝缘层破损1例、重度三尖瓣反流1例)分别进行处理。结果对27例植入永久性心脏起搏器的儿童进行7个月~8年随访,平均(5.2±1.5)年;其中6例并发症经处理后,感知和起搏功能良好,随访6个月~5年无异常。结论(1)儿童安装永久性心脏起搏器要严格掌握适应证,尽量采用生理性起搏;(2)心外膜手术创伤大,术后并发症少,适合超声心动图显示锁骨下静脉内径小于5 mm的患儿;(3)心内膜植入时要注意儿童的心脏结构和生长发育特点。     

聚磷酸钙纤维和左旋聚乳酸软骨支架复合自体骨髓间充质干细胞构建组织工程化人工关节软骨

目的应用组织工程学技术，体外初步构建组织工程化人工关节软骨。方法制备三维多孔软骨支架材料CPP／PLLA，体外诱导兔MSCs向软骨细胞表型分化，免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达，将诱导细胞与软骨支架材料CPP／PLLA复合，体外培养构建人工关节软骨，1周后终止培养，扫描电镜观察组织工程化人工软骨的微观结构；同时将构建人工软骨移植于兔大腿皮下，3周后处死动物，甲苯胺蓝染色观察。结果扫描电镜观察可见该复合材料CPP／PLLA为高孔隙率的网状、连通、微孔结构，微孔分布均匀，孔径大小为300～400Ⅳn之间；兔MSCs经体外软骨表型定向诱导后，Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。诱导后的MSCs可在支架材料内良好贴附生长，细胞被分泌的胶原基质包裹；从体内获取的培养物组织切片观察可见大量的软骨细胞生成，甲苯胺蓝染色阳性。结论经软骨起源诱导后的MSCs与CPP／PLLA复合培养可以构建自体软骨移植的替代物，为应用软骨组织工程方法修复关节软骨缺损和功能重建提供一种新材料，具有较大的潜在应用价值。     

Th1/Th2炎症极化与肺气肿和肺纤维化

肺气肿具有Ⅰ型T辅助细胞（Th1）炎症极化的特征，表现为损伤过度和修复不足，肺实质的破坏增加，肺间质变薄。与之相反，肺纤维则具有Ⅱ型T辅助细胞（Th2）炎症极化，表现为损伤后修复过度，肺间质增厚，胶原沉积。通过调控Th1和Th2的炎症趋势来控制肺组织的损伤和修复的结局可能会为肺气肿和肺纤维化的防治提供新思路。     

急性冠状动脉综合征患者介入术前后血小板活化及血管内皮功能的变化

目的观察急性冠状动脉综合征患者介入治疗后血小板活化指标CD62p、CD63及糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物及内皮功能的改变。方法60例急性冠状动脉综合征患者在冠状动脉介入术前和术后即刻以及次日采用流式细胞仪检测血小板活化指标CD62p、CD63及糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物;双抗体夹心固相酶联免疫吸附试验测定血浆假血友病因子的表达水平;放射免疫测定法测定血浆内皮素1表达水平;酶法测定血浆一氧化氮的含量;彩色多谱勒超声诊断仪测量内皮依赖性血管舒张功能。选择健康体检者和稳定型心绞痛患者各30例作对照,观察急性冠状动脉综合征患者冠状动脉介入前后指标的变化并与对照组比较。结果与健康对照组和稳定型心绞痛组比,急性冠状动脉综合征组CD62p、CD63及糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物明显增高(P<0.05或0.01);急性冠状动脉综合征患者介入术后即刻CD62p、CD63和糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体复合物与术前相比明显增高(P<0.01),但术后24h较术前无明显变化(P>0.05)。与健康对照组和稳定型心绞痛组比,急性冠状动脉综合征组假血友病因子、内皮素1的表达水平明显增高(P<0.01),内皮依赖性血管舒张功能和一氧化氮降低(P<0.05或<0.01);急性冠状动脉综合征患者介入术后即刻血浆假血友病因子和内皮素1水平升高(P<0.05或P<0.01),内皮依赖性血管舒张功能和一氧化氮水平降低(P<0.05),且介入术后24h假血友病因子水平也较术前升高(P<0.05),内皮依赖性血管舒张功能降低(P<0.05),但内皮素1和一氧化氮水平与术前差异无显著性(P>0.05)。结论血小板活化和内皮功能的损伤在急性冠状动脉综合征发生和发展过程中起重要的作用,冠状动脉介入术后血管内皮受到一定损伤,血小板有一定程度的激活。     

脑卒中患者心理健康教育效果分析

脑卒中是指急性起病、迅速出现局限性或弥漫性脑功能缺失征象的脑血管性临床事件。它不仅会导致躯体障碍，还会产生不同程度的心理障碍，主要表现为：焦虑不安、孤独自卑、悲观抑郁、敌对怀疑、绝望轻生。为了探索改善患的心理状况的有效方法，吉林省白城中心医院神经内科医护人员对住院患根据心理状况进行分类，并根据不同类型患采用不同的心理健康教育内容，取得了良好效果，现报告如下。     

Molecular determinants of cetuximab efficacy.

PURPOSE: To investigate whether mRNA expression levels of cyclin D1 (CCND1), cyclooxygenase 2 (Cox-2), epidermal growth factor receptor (EGFR), interleukin 8 (IL-8), and vascular endothelial growth factor (VEGF), all members of the EGFR signaling pathway, are associated with clinical outcome in patients with EGFR-expressing metastatic colorectal cancer (CRC) treated with cetuximab. PATIENTS AND METHODS: Thirty-nine patients with metastatic CRC, refractory to both irinotecan and oxaliplatin, were enrolled on IMCL-0144 and treated with single-agent cetuximab. The intratumoral mRNA levels of CCND1, Cox-2, EGFR, IL-8, and VEGF were assessed from paraffin-embedded tissue samples using laser-capture microdissection and quantitative real-time polymerase chain reaction. RESULTS: There were 21 women and 18 men with a median age of 64 years (range, 35 to 83 years). Higher gene expression levels of VEGF were associated with resistance to cetuximab (P = .038; Kruskal-Wallis test). The combination of low gene expression levels of Cox-2, EGFR, and IL-8 was significantly associated with overall survival (13.5 v 2.3 months; P = .028; log-rank test). Both findings were independent of skin toxicity that was itself significantly correlated to survival. Patients with a lower mRNA amount of EGFR had a longer overall survival compared with patients that had a higher mRNA amount (7.3 v 2.2 months; P = .09; log-rank test). Patients with lower expression of Cox-2 had a significantly higher rate of grade 2 to 3 skin reactions under cetuximab treatment. CONCLUSION: This pilot study suggests that gene expression levels of Cox-2, EGFR, IL-8, and VEGF in patients with metastatic CRC may be useful markers of clinical outcome in single-agent cetuximab treatment.