慢性血小板减少性紫癜患者microRNA-146a的表达及其意义

目的 研究microRNA-146a(miR-146a)在慢性免疫性血小板减少性紫癜(immune thrombocytopenic purpura,ITP)患者外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其临床意义.方法 28例慢性ITP患者和28例健康对照者,荧光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)检测PBMC中miR-146a的表达,ELISA检测血清中TNF-α、IL-2、IL-lβ和IFN-γ的表达水平;采用电转染技术将miR-146a前体(mimics)/抑制体(inhibitor)转染至ITP患者PBMC中,CCK-8法检测其对血小板诱导的细胞增殖反应的影响.结果 ITP患者PBMC的miR-146a表达较健康对照组显著降低,且与血小板计数呈正相关,与患者血浆TNF-α、IL-2和IFN-γ浓度呈负相关.转染miR-146a前体至ITP患者PBMC可抑制血小板诱导的IL-2合成以及PBMC增殖,转染miR-146a抑制体则可以促进IL-2的合成以及PBMC的增殖.结论 miR-146a参与了慢性ITP的发病机制,调控IL-2的表达,并介导了ITP患者PBMC的增殖,是慢性ITP潜在的治疗靶点.

Abstract：

Objective To investigate the increased expression of microRNA-146a(miR-146a) in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of patients with chronic immune thrombocytopenic purpura (ITP) and its clinical significance. Methods Twenty-eight patients with chronic ITP and 28 healthy controls matched with age and gender were enrolled in this study. Fluorescent quantitative PCR reaction was used to detect the relative expression of miR-146a in their PBMC. The serum concentration of TNF-α, IL-2,IL-1 β and IFN-γ were measured by ELISA. CCK-8 method was used to detect the proliferation ability of PBMC , which transfected with miR-146a mimics or inhibitor and then stimulated with platelet . Results The relative expression of miR-146a in ITP patients was higher than that of healthy controls. The increased expression of miR-146a was negatively correlated with the serum TNF-α, IL-2 and IFN-γ. The PBMC transfected with miR-146a mimics had reduced expression of IL-2 and proliferation when stimulated with platelet.In contrast, the opposite effect was observed with the miR-146a inhibitors transfection. Conclusion MiR146a was involved in the pathogenesis of chronic ITP by controlling IL-2 production and PBMC proliferation.Thus, it may be a potential therapy target for chronic ITP.     

三小定点整脊技术对腰椎间盘突出症临床疗效评价研究

[目的]三小定点整脊技术对腰椎间盘突出症的临床疗效评价。[方法]将90例患有腰椎间盘突出症的患者随机分为两组:即三小定点整脊组和夹脊穴针刺组,分别给予三小定点整脊与夹脊穴针刺治疗,观察腰痛和坐骨神经痛的改善情况。[结果]两组在疗效及症状改善程度上均有较好的表现,且三小定点整脊组优于夹脊穴针刺组。[结论]三小定点整脊技术对腰椎间盘突出症疗效肯定。     

整脊手法治疗腰椎间盘突出症的研究进展

整脊是治疗腰椎间盘突出症的常用手法,临床上应用的整脊操作方法各不相同,疗效也各有差异,为了进一步探究整脊治疗腰椎间盘突出症的临床应用。从整脊疗法的发展及整脊技术对腰椎间盘突出症的临床应用等方面进行了评述,对整脊的临床应用进展进行了综述,并提出新的见解。     

IL-27诱导原发性胆汁性肝硬化患者CD4+T细胞增殖分化作用机制研究

目的 探讨IL-27对原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者外周血CD4+T细胞的增殖分化作用及其相关免疫学机制.方法 收集PBC患者、慢性乙肝患者(choronic hepatitis B,CHB)、健康体检者(health controls,HCs)外周血,磁珠分离CD4+T细胞.IL-27体外作用后,CCK-8测定细胞增殖情况,ELISA法检测细胞因子,定量PCR分析T-bet和GATA3基因表达情况,免疫印迹测定p-STAT-1和p-STAT-3的表达.结果 IL-27作用后,PBC组、CHB组和HCs组CD4+T细胞增殖能力均显著增强,PBC组CD4+T细胞增殖能力强于CHB和HCs组,差异有统计学意义(P＜0.001),同时PBC组细胞培养液中IL-2和IFN-γ在IL-27作用后较CHB和正常对照组均显著增高(P＜0.001),IL-10表达无明显变化.未经IL-27诱导情况下,PBC组T-bet表达高于CHB组(P=0.007),IL-27诱导后PBC组CD4+T淋巴细胞T-bet基因表达显著增加,同时对GATA3具有抑制作用,作用前后差异有统计学意义(P＜0.001),CHB组作用前后无显著变化(P=0.3).免疫印迹测定p-STAT-1、p-STAT-3发现,正常情况下各研究组均不表达p-STAT-1、p-STAT-3,IL-27作用后,表达明显升高,其中PBC组升高尤为明显.结论 IL-27可以诱导PBC患者CD4+T细胞增殖,并通过活化p-STAT-1、p-STAT-3信号通路,诱导CD4+T细胞向Th1分化,同时分泌相关细胞因子,可能在PBC早期免疫炎症反应过程中具有重要作用.     

无精症及隐匿精子症患者染色体核型与Y染色体微缺失分析

目的 研究无精症和隐匿精子症染色体核型与Y染色体无精因子(azoospermia factor,AZF)微缺失的发生频率及其关系.方法 对997例无精症和隐匿精子症患者进行常规染色体核型分析及多重聚合酶链反应技术检测AZF位点.结果 在997例无精症和隐匿精子症患者中,染色体核型异常检出率28.4%,异常核型包括47,XXY、46,XY(Y＜G)、46,XX、嵌合体及相互易位等.AZF微缺失总检出率17.4%.常见于46,XY及46,XY(Y＜G)等核型.结论 染色体核型异常是无精症和隐匿精子症的重要遗传病因.正常核型与Y＜G患者中存在较高的AZF微缺失率,对这些患者进行AZF微缺失检查有助于明确病因,避免一些不必要的临床治疗及遗传缺陷的垂直传递.     

不同植骨材料治疗腰椎滑脱症的效果观察

目的：探讨不同植骨材料在治疗腰椎滑脱症中的应用效果。方法选取本院的96例腰椎滑脱症患者作为研究对象,按照椎间融合材料不同分成3组,各32例。 A组使用自体骨,B组使用同种异体骨,C组使用BMP人工合成骨,比较3组的椎间隙高度、植骨融合率、神经功能。结果 A组和C组6、12个月后的椎间隙高度显著高于B组,差异有统计学意义（P<0.05）。 A组和C组12个月后的植骨融合率、神经功能改善总有效率显著高于B组,差异有统计学意义（P<0.05）。 A组12个月后的植骨融合率、神经功能改善总有效率与C组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 BMP人工合成骨治疗腰椎滑脱症的效果和自体骨相当,值得临床推广应用。     

载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附

目的 探讨载脂蛋白C3(APOC3)对THP-1细胞与小鼠主动脉黏附效应的影响.方法 在无菌环境下应用外科显微技术分离C57BL/6小鼠主动脉,在体外给予APOC3刺激16 h后与标记有CFSE荧光的单核细胞来源THP-1细胞黏附1h,观察黏附效应的变化,同时应用免疫组化方法检测血管黏附分子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达.结果 给予APOC3刺激的主动脉与对照主动脉相比,与THP-1细胞的黏附效应增加,VCAM-1和ICAM-1表达上调,且前者比后者上调显著.结论 载脂蛋白C3促进THP-1细胞向小鼠主动脉黏附.     

哮喘患儿CD4+T细胞增殖及活化诱导凋亡机制研究

目的 通过体外细胞增殖及活化诱导细胞凋亡试验探讨小儿哮喘免疫炎症及Th细胞过度活化的相关机制.方法 哮喘组患儿21例,年龄(9.6±23)岁;正常对照组20例,年龄(9.7±1.9)岁.流式液相多重蛋白定量技术检测Th1/Th2/Th17细胞因子;磁珠分离CD4+T细胞,PHA结合anti-CD3体外刺激后分析其增殖能力及活化后凋亡情况;最后以相对定量PCR测定凋亡及增殖相关蛋白Fas、FasL、Bcl-2的mRNA表达情况.结果 哮喘组患儿血清细胞因子水平较正常对照组显著增高[IL-4:(2451±1.052)ng/Lvs(1.796±0.615)ng/L,P=0.018;IL-10:(1.920±0.813)ng/Lvs(1.390±0.162)ng/L,P=0.006;TNF:(5.112±5.842)ng/Lvs(1.506±0.551)ng/L,P=0.009];哮喘组CD4+T细胞增殖能力显著强于正常对照组[OD450:(0.498±0.052)vs(0.274±-0.032),P＜0.001],而活化诱导后细胞凋亡率则显著低于正常对照组[(35.62±0.05)％vs(65.28±3.85)％,P＜0.001];哮喘组患儿CD4+T细胞Fas mRNA表达较正常对照组显著降低,而Bcl-2表达则显著高于正常对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.001),FasL表达差异无统计学意义(p＞0.05).结论 哮喘患儿CD4+T细胞Fas表达降低及Bcl-2表达升高在一定程度上抑制了Th细胞活化后凋亡并且促进其增殖,而凋亡抑制及细胞增殖可能导致了哮喘患儿Th细胞过度活化和炎性浸润加剧.     

膜结合型TRAIL在原发性胆汁性肝硬化患者外周血白细胞的表达及临床意义

目的检测膜结合型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(mTRAIL)在不同人群外周血白细胞的表达,探讨其与原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)疾病进展的相关性。方法应用流式细胞仪检测PBC患者、乙肝后肝硬化患者及健康对照外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞mTRAIL蛋白的表达,同时检测其血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α),γ-谷氨酰转肽酶(GGT)及碱性磷酸酶(ALP)浓度,并作相关性分析。结果mTRAIL在健康人外周血白细胞表达很低,而PBC及乙肝后肝硬化患者外周血淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞mTRAIL的阳性表达率均较正常对照组明显升高(P<0.01),尤以单核细胞表达为主,但两组肝硬化患者之间并无显著差异。PBC患者单核细胞TRAIL阳性表达率与血浆TNF-α、GGT及ALP浓度呈显著正相关(P<0.05)。结论PBC及乙肝后肝硬化患者外周血各群细胞mTRAIL表达明显上调,且PBC患者单核细胞mTRAIL阳性表达率与血浆TNF-α、GGT、ALP浓度显著相关,提示TRAIL信号异常在PBC发病及疾病进展中具有一定作用。     

心肌标志物的床边检测技术在急性心肌梗死患者中的应用价值

目的 探讨心肌标志物的床边检测技术(POCT)在急性心肌梗死患者中的应用价值.方法 选取60例急性心肌梗死患者和30例健康人,用POCT仪器分别在治疗前、治疗后12小时、治疗后24小时测定AMI患者血中Myo、cTnI、Hs-CRP、NT-proBNP含量.结果 AMI患者治疗前各心肌标志物水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗后不同时间段浓度呈明显下降趋势,表明治疗有效(P<0.05),cTnI例外,而且随着治疗时间的增加,Myo、Hs-CRP、NT-proBNP的诊断敏感性也随之下降.结论 应用POCT技术检测AMI患者各项心肌标志物能快速、准确地为临床医师提供诊断报告,以便及早制定合适的治疗方案,相比传统CLT具有时间和经济上的优势.