背根神经节小胶质细胞活化在大鼠术后持续性痛形成中的作用

目的 评价背根神经节小胶质细胞活化在大鼠术后持续性痛形成中的作用.方法 成年雄性SD大鼠70只,体重200 ～ 250 g,采用皮肤肌肉切口牵拉法建立术后持续性痛模型,采用随机数字表法,将其分为2组(n=35):假手术组(S组)和术后持续性痛组(SMIR组).分别于术前ld、术后1、3、7、12、22和32 d时,测定机械痛阈.上述各时点痛阈测试完毕后,随机取5只大鼠,计数背根神经节小胶质细胞.结果 与S组比较,SMIR组术后3～22 d时机械痛阈降低,术后3～12d时背根神经节小胶质细胞计数升高(P＜0.05).结论 背根神经节小胶质细胞的活化可能参与了大鼠术后持续性痛的形成.     

胆道闭锁诊治体会

目的　分析胆道闭锁诊断、治疗及预后情况 ,探讨胆道闭锁的早期诊断和治疗策略。方法　回顾性分析我院近 5年收治的 2 8例胆道闭锁患儿诊断手段、手术年龄、手术方式及术后生存率。结果　胆道闭锁早期诊断率为 1 4 % (4 / 2 8) ,手术时年龄 1 3～ 2 70d ,6 0d以内 4例 (1 4 % ) ;6 1～ 90d 1 3例 (4 6 % ) ;91～ 1 2 0d 8例 (2 9% ) ;1 2 0d以上 3例 (1 1 % )。没有患儿接受肝移植 ,1～ 5年生存率为35 % (9/ 2 5 )。结论　密切观察临床表现、掌握胆道闭锁的影像学特点和及时采用腹腔镜探查可提高胆道闭锁的早期诊断率。完善手术方式、让更多的患儿接受肝移植、开辟新的治疗方法如抑制肝胆管细胞凋亡、抗体及基因治疗可提高胆道闭锁的长期治愈率     

PLF与PLIF手术治疗腰椎滑脱症的疗效比较

目的:对比研究后外侧融合(PLF)与经后路椎体间融合(PLIF)治疗Ⅰ度和Ⅱ度腰椎滑脱症的疗效。方法:67例腰椎滑脱症患者分为PLF组32例,PLIF组35例。两组年龄、病程、术前临床表现及影像学资料相近似。PLF组JOA评分16.3±7.8分,PLIF组14.5±6.5分。两组均进行了后路椎板减压,短节段经椎弓根钉系统复位与固定。结果:PLF组手术时间平均187min,出血量平均680ml;PLIF组手术时间248min,出血量平均945ml。PLIF组慢性下腰痛改善明显高于PLF组(P=0.042),而临床疗效JOA评分两组间无显著性差异。骨融合率PLF组74.8%,PLIF组94.3%(P=0.011),经随访PLF组矫正率丢失30.9%,而PLIF组为9.8%(P<0.05)。PLF组各种并发症19例,PLIF组11例。结论:PLF与PLIF手术均是治疗腰椎滑脱症的有效术式,PLIF手术时间较长,创伤大,但骨融合率高,内固定失败率低,滑脱矫正率丢失少,晚期慢性下腰痛发生率低。     

组织工程化同种异体椎间盘移植的动物实验研究

目的观察组织工程技术的运用能否延缓椎间盘移植后的退行性改变。方法将髓中受细胞复合至同种异体椎间盘,体外培养后植入犬L4／k椎间隙作为实验组（A组）,对照组（B组）行同种异体椎间髓移植。使用影像学、生物力学及组织学分析评估植入椎间盘的转归并行组间比较。结果移植椎间盘可与宿主椎体实现骨性融合。对照组椎间盘术后退变明显,12周时其椎间盘高度及髓核信号比灰度值明显低于实验组,稳定性丧失明显;组织学观察发现实验组移植椎间盘结构保持较好,髓核细胞数量较多,排列规则;对照组髓核形态保持欠佳,结构紊乱,髓核细胞数量减少,退行性改变明显。结论通过复合种子细胞实现异体椎间盘的组织工程化可有效延缓椎间盘移植后的退行性改变。     

TSRH钉棒结构在脊柱侧凸后路矫正中的应用

目的　探讨钉棒结构治疗脊柱侧凸的可行性和临床效果。方法　应用 TSRH钉棒结构治疗各种脊柱侧凸2 2例 ,术前平均 Cobb角 6 2°,2 2例术前均对畸形脊柱进行标准俯卧位 CT加密扫描 ,测量入钉点至椎体前缘的深度和椎体的旋转角度 ,根据测得数据确定椎弓根螺钉置入的深度和方向 ,术后再次行 CT扫描 ,评价置钉的准确性。结果　经 3～ 14个月随访 ,术后 Cobb角平均 18°,矫正率为 72 .5 % ;平均手术时间 3h 2 0 min,平均出血量 10 5 0 m L ,无感染 ,无神经并发症 ,无假关节形成 ,置钉准确率 96 .8%。结论　术前采用标准俯卧位 CT扫描 ,根据扫描图象测得的相关数据可为术中准确置入椎弓根螺钉提供重要参考。钉棒结构具有良好的三维矫正控制力 ,由于内固定部件较少 ,所以同时具有操作简便、手术时间短、出血量较少 ,费用较低等优点     

高心率患者冠状动脉CTA收缩期绝对时相重组的优化

目的 比较高心率(HR)患者优化的收缩期绝对时相、收缩期相对时相和舒张期相对时相的冠状动脉CT血管造影(CCTA)图像质量,以确定最佳采集期相。方法 搜集2020年1月至2021年5月Force CT扫描的HR≥80次/min的患者109例,其中HR80～100次/min 85例(A组),HR≥100次/min 24例(B组)。预定义收缩期绝对时相重组范围为R波后180～400 ms,分成180～240 ms、260～320 ms、340～400 ms三组,另外选取成像系统自动选择的最佳收缩期相对时相和最佳舒张期相对时相图像,评估各组各期相右冠状动脉(RCA)、锐缘支(AM)、后降支(PDA)、左主干(LM)、左前降(LAD)、对角支(D1)、左旋支(LCX)、钝缘支(OM)的图像优秀率、可诊断率和主观评分。结果 A组的绝对时相最佳收缩期位于260～320 ms, RCA、AM、PDA、LM、LAD、D1、LCX、OM的图像优秀率分别达30.59%、27.06%、58.82%、85.88%、77.65%、47.06%、62.35%、38.82%,优于其他两组(P<0.05);B组...     

血管内皮生长因子在电烧伤大鼠血清及创面组织中的表达变化

目的 观察电烧伤大鼠血清和创面组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化,探讨其在电烧伤病变中的作用机制. 方法 按随机数字表法将64只SD大鼠分为正常对照组(8只)和电烧伤组(56只).于伤后6h和1、3、7、14、21、28 d,每时相点处死8只电烧伤组大鼠,留取创面肌肉组织和血清样本.HE染色观察创面组织病理学改变,双抗体夹心ELISA法检测血清VEGF含量,蛋白质印迹法检测创面VEGF蛋白的表达量,免疫组织化学法检测创面VEGF的表达定位,计算微血管密度(MVD)值.对MVD值与VEGF表达强度行相关性分析.取未经任何处理的正常对照组大鼠腿部腹侧肌肉组织及血清进行上述指标检测.对数据进行单因素方差分析与Spearman等级相关分析,两两比较LSD-t检验. 结果 (1)电烧伤组大鼠伤后6h及1d,创面组织肌纤维断裂,大量炎性细胞浸润,组织水肿明显;伤后3d有新生血管生成;7d时肉芽组织及新生血管数量明显增多.(2)电烧伤组大鼠伤后6h及1、14 d,血清VEGF含量分别为(43±11)、(44±11)、(74±27) pg/mL,明显高于正常对照组的(15±9)pg/mL(t值为4.001～5.724,P值均小于0.01).(3)与正常对照组肌肉组织VEGF蛋白表达量(0.21±0.09)比较,电烧伤组各时相点大鼠创面组织VEGF蛋白表达量均升高,伤后7d达峰值,为0.63±0.13(t =4.965,P＜0.05).(4)电烧伤组早期炎性细胞VEGF表达强阳性,后期以新生血管内皮细胞阳性表达为主.(5)电烧伤组伤后3、7、14、21、28 d,创面组织MVD值和VEGF表达强度呈显著正相关(rs=0.834,P＜0.01). 结论 电烧伤后不同阶段,VEGF在大鼠创面组织及血清中的表达各不相同,其改变与伤后体液渗出及创面愈合过程密切相关.     

PTEN-PI3K/AKT信号传导途径对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响

目的 探讨PTEN-PI3 K/AKT信号传导途径对胃癌细胞株MKN28凋亡的调控作用及其机制.方法 构建PTEN真核表达载体,转染至胃癌细胞株MKN28中(转染组);同样方法转染空载体和等量的PBS分别作为阴性对照组和空白对照组,检测对胃癌细胞株MKN28凋亡的影响及对PI3K、AKT、Caspase-3、Caspase-9的影响.MTT检测细胞生长曲线,TUNEL染色法检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白的表达.PI3K抑制剂LY294002处理未转染PTEN的胃癌细胞株MKN28(处理组);对照组加入等量的PBS,抑制PI3K活性后检测细胞凋亡蛋白及凋亡相关蛋白的表达.组间比较采用t检验,时间依赖性检验采用相关分析方法.结果 成功构建PTEN真核表达质粒并转染至胃癌细胞株MKN28中,获得稳定过表达PTEN的细胞模型.MTT检测发现转染组胃癌细胞株MKN28生长明显受到抑制,且呈时间依赖性(r =0.938,P＜0.05).转染组平均凋亡率达到27.86％ ±4.78％,明显高于阴性对照组的0.01％±0.01％(t=9.527,P＜0.05).转染PTEN后,转染组PI3K蛋白表达量为0.25±0.03,明显低于空白对照组的0.93 ±0.16及阴性对照组的0.96±0.15(t=7.235,8.883,P＜0.05).转染组活化的AKT (P-AKT)蛋白表达量为0.21±0.03,明显低于空白对照组的0.93 ±0.13及阴性对照组的0.91±0.12(t =9.347,9.802,P＜0.05).而转染组凋亡相关蛋白Caspase-3及Caspase-9表达量分别为0.86±0.11和0.87±0.12,明显高于阴性对照组的0.16±0.03和0.18 ±0.04及空白对照组的0.15±0.02和0.16 ±0.03(t=10.634,10.999,9.448,9.942,P＜0.05).抑制PI3K活性后,处理组细胞凋亡率为28.60％ ±4.50％,明显高于对照组的0.12％±0.06％(t=10.961,P＜0.05).Western blot检测发现处理组PI3K和P-AKT的蛋白表达量分别为0.18 ±0.02和0.11 ±0.01,明显低于对照组的0.93 ±0.14和0.90 ±0.12(t =9.186,11.363,P＜0.05);同时处理组PTEN的蛋白相对表达量为1.15 ±0.15,明显高于对照组的0.21±0.08(t =9.577,P＜0.05).处理组的凋亡相关蛋白Caspase-3及Caspase-9相对表达量分别为0.86 ±0.12和0.88 ±0.11,明显高于对照组的0.25±0.02和0.21±0.03(t =8.685,10.178,P＜0.05).结论 高表达PTEN可以抑制PI3K/AKT途径,促进胃癌细胞凋亡;抑制PI3K途径可以促进PTEN的表达,两者之间相互作用,共同调控着胃癌细胞的凋亡.     

Effect of estrogen on regression of vascular calcification in rats

Objective To investigate the effect of estrogen on regression of vascular calcification in rats induced by vitamin D3 plus nicotine. Methods Ninety?six female SD rats were divided randomly into control group (n=24) and calcification group (n=72). Vascular calcification of 72 rats was induced by vitamin D3 and nicotine (VDN). On the day 1, the VDN group rats were injected with vitamin D3(300 000 U/kg, i.m), and were intragastric administrated with nicotine (25 mg/kg), after 9 hours, another dosage of nicotine was given again. After 4 weeks, the VDN group rats were subdivided randomly into 4 groups: VDN group(n=16), Sham operation group (n=16), ovariotomy group (n=16), estrogen group(after ovariotomy, 17β ?estrogen was subcutaneously injected, 50 μg•kg-1•d-1, n=16). Results After 4 weeks,the VDN group showed obvious vascular calcification, and calcium content of the vessel wall was significantly higher than that of control group (P<0.01). Extensive calcification was witnessed on the aortic tunica media of the VDN group. After 12 and 8 weeks, the calcium content of the vessel wall in each subdivided groups was significantly lower than that at 4 weeks point(P<0.01), and the lowest calcinm content was in estrogen group, meanwhile the reduction of previously accumulated arterial calcium precipitate in each group was different. Conclusions It is a reversible process that vascular calcification induced by vitamin D plus nicotine in rats. Estrogen can promote the regression of vascular calcification.     

人端粒酶逆转录酶基因转染人髓核细胞的安全性研究

目的评价人端粒酶逆转录酶（humantelomerasereverse transeriptase,hTERT）基因转染对人椎间盘髓核细胞“安全性”的影响．方法将构建好的重组腺相关病毒人端粒酶逆转录酶基因（recombinantadeno—associatedvirusvee—tor—nlediatedhTERTgene,rAAV—hTERT）按感染复数（muhiplieityofinfection,MOI）10^5v．g每细胞转染体外培养二代髓核细胞。没立rAAV—hTERT转染组,AAV空病毒转染组及未转染组;利用RT—PCR及Western—blot检测转染后hTERT基闪的表达;对体外培养120d的细胞进行染色体核型分析;将3组细胞（100μL,3×10^7／mL）分别注入裸鼠腋下检测其成瘤性,以人Hela细胞为阳性成瘤实验对照。结果成功检测出rAAV—hTERT转染髓核细胞后hTERT轼因的表达;G-带核型分析未见染色体结构异常克隆;3组细胞均未观察到裸鼠体内肿瘤形成。结论rAAV—hTERT能成功转染人惟问盘髓核细胞并IF确表达,rAAV—hTERT转染髓核细胞在有限的体外培养过程中是安全的,可为进一步的在体研究提供安伞性证据.