小鼠轮状病毒EW株VP7基因的克隆及其在重组腺病毒中的表达

目的：构建表达小鼠轮状病毒(EDIM)EW株VP7基因的重组腺病毒，以在小鼠模型上研究轮状病毒的免疫保护机制。方法：用RT-PCR方法扩增EDIM VP7全长cDNA并进行基因序列分析，将所得的VP7基因片段插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV，获得重组质粒pShuttleCMV-EVP7，将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183获得重组腺病毒质粒pAdCMV-EVP7，将该质粒线性化后转染293细胞包装重组腺病毒rvAdEVP7。以rvAdEVP7感染293细胞，并分别应用电子显微镜、PCR、RT-PCR和Western blot等方法观察rvAdEVP7的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性。结果：获得了小鼠轮状病毒的全长cDNA，重组腺病毒rvAdEVP7具有典型的腺病毒形态，PCR、RT-PCR和Western blot等分子生物学方法分析显示：rvAdEVP7中确有特异性的VP7基因稳定整合；有较好的遗传稳定性；感染293细胞后能有效转录；可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7。结论：成功构建含VP7基因的重组腺病毒rvAdEVP7，为进一步研究轮状病毒的免疫保护机制打下了基础。     

人心肌肌钙蛋白I第2和第4个密码子同义突变对其在大肠埃希菌中表达的影响

目的 对人心肌肌钙蛋白I（cTnI）基因实行定点突变并进行原核表达，观察此突变对cTnI表达量的影响。方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段，设计引物将其第2和第4个密码子突变后插入原核表达载体形成重组体，并导人宿主菌BL21（DE3）中，经IPTG诱导表达，Ni-NTA树脂纯化后行Western blot鉴定，观察突变对cTnI表达的影响。结果 突变后的cTnI基因与对照组相比在大肠埃希菌中得到高效表达，经纯化可获得电泳单点纯的cTnI蛋白。结论 成功克隆了cTnI基因，所设计的同义突变可促进cTnI在大肠埃希菌中的高效表达。     

JC病毒样颗粒可直接转运进入细胞核

目的探讨JC病毒(JCV)病毒样颗粒(VLP)是否可以直接转运进入细胞核。方法心用JCV主要外壳蛋白VP1体外表达、重组VIP，在其表面标记异硫氰基荧光素(FTTC)，同时在其内部包裹荧光染料Cy3，感染培养的HeLa细胞和SVG细胞，荧光显微镜观察VLP入核转运。结果HeLa和SVG细胞感染包裹Cy3的FTTC-VLP时，FTTC与Cy3同时出现于细胞核内相同部位；而感染FTTC—VP1与Cy3混合物时，FTTC虽可在细胞核内检测到，但Cy3信号几乎消失。包裹Cy3的VIP用SDSPAGE展开，荧光显像后行考马斯亮蓝(CBB)染色，发现Cy3和VLP移行至不同部位，证明Cy3不能与VP1结合，提示VLP以完整的颗粒形式转运进入细胞核。应用包裹外源性DNA的VLP感染培养的HeLa和SVG细胞，发现包裹的DNA在细胞浆和细胞核内均可检测到，提示JCV入核过程与VIP相同。结论VLP可以不经裂解直接转运进入细胞核，JCV入核转运可能与VLP相同。     

微机矩阵算法程序在屈光学计算中的应用

本文介绍了一种应用微机BASIC语言的屈光学矩阵算法程序,可方便、迅速地解决许多眼科屈光学计算问题,如共轴球面折射系统、共轴球面反射、折射系统、球、柱镜偏心棱镜效应计算和散光柱镜系统的斜交球、柱镜组合计算等等。     

精神发育迟滞儿童特殊教育三年随访

采用Ｈ－ＮＴＬＡ量表及婴儿～初中学生社会生活能力量表对太原市一个培智学校４４例精神发育迟滞患儿从１９８９～１９９２年连续４次测查智力，２次测查适应行为。结果显示３年间ＩＱ值变化无显著统计学意义，但视觉联想、概念关系、注意力及视觉识知能力有明显提高。患儿适应行为明显提高。经多元逐步回归分析显示，精神发育迟滞儿童智商的提高和母亲文化程度较高、患儿智力低下程度较轻、母亲职业为科技或行政管理人员、患儿初始教育年龄早呈正相关。     

甲壳素制备工艺改进——天然甲壳素的提取

甲壳素制备工艺改进为统一常温进行,操作简便,产品相对收率提高5～10％,同时降低了能耗、机械要求强度、劳动保护条件和生产成本,并经热分析说明产品维持了甲壳素的天然特性,即分子中每结构单元含有1/2分子缔合水,是天然的甲壳素产品并有益于其脱乙酰化物──壳聚糖质量的提高。     

甾体避孕药不增加血栓栓塞性疾病危险(病例对照研究)

本文采用1:3病例对照研究方法,对甾体避孕药的使用与血栓栓塞性疾病(急性心肌梗塞、脑栓塞、脑血栓形成和深静脉血栓形成)间的关联进行多因素分析。结果提示在我国广泛应用的甾体避孕药(主要为国产Ⅰ号避孕药)并不增加血栓栓塞性疾病的危险性。用药和停药时间的长短与血栓栓塞性疾病的发生无关,并与高血压病之间亦不存在协同作用。     

球囊漂浮电极床旁临时心脏起搏的临床评价

目的探讨球囊漂浮电极床旁心脏临时起搏方法的可行性。方法对216例因多种心律失常需要临时心脏起搏的患者应用球囊漂浮电极导管进行心脏临时起搏，通过分析起搏心电图图形特点和术中并发症，判断该起搏方法的可行性。结果216例患者穿刺及送管均获成功，无严重并发症发生。3例起搏后死于原发病，9例起搏后自身心律未恢复安置永久起搏器，2例心房颤动合并PR长间期患者起搏后安置永久起搏器，38例行预防起搏。结论在体表心电图的指导下应用球囊漂浮电极导管进行心脏临时起搏是一项安全有效、可行的起搏方法，操作简便、快捷、成功率高，值得临床广泛应用。