UPLC-MS/MS分析不同品种蓝莓中的花青苷

目的:采用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)分析12个品种蓝莓中的花青苷。方法:80%乙醇作为溶剂超声辅助提取蓝莓花青苷,提取液经离心后的上清液于旋转蒸发仪浓缩用6%甲酸水溶液定容至刻度线,超滤后,采用UPLC-MS/MS,ACQUITY UPLC BEHC18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),乙腈-6%甲酸水溶液作为流动相,进行梯度洗脱,在电喷雾离子源(ESI)正离子模式下,用MRM模式监测。结果:12个品种蓝莓中花青苷种类较为相似,花青苷种类最丰富的蓝莓品种是R26,含有23种,花青苷种类最少的蓝莓品种是N15,含有20种,飞燕草素和锦葵素是蓝莓中最主要的两大类花青苷。12个品种蓝莓中总花青苷含量在820.43~2 114.627μg·g-1,存在显著差异(P0.05),由大到小依次为R26N12S28R6S30S7-1S12S7-2S7-3N15N1N14。R系列总花青苷含量高于S系列,N系列花青苷含量最少。不同品种蓝莓中各类花青苷含量亦存在显著差异。结论:12个品种蓝莓中的总花青苷含量存在显著差异,可为以蓝莓花青苷为功能成分的保健品、药物开发提供基础数据,同时也为蓝莓花青苷活性实验、蓝莓花青苷的检测分析提供参考依据。     

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??OBJECTIVE To establish an interferon-resistant hepatitis B virus cell model and provide experimental basis for further investigating the mechanism of HBV resistance to interferon. METHODS HepG2.2.15 was continuously grown in the presence of 10,30,50 and 70 u??mL^-1 of interferon ??-2b for up to 48 weeks. The HepG2.2.15/IFN??-2b cell model was constructed after 48 weeks of induction. The cells were treated with the best-effect concentration. Then, the levels of HBsAg, HBeAg, and HBV DNA in the supernatant of cell culture medium before and after the treatment were compared. RESULTS After stimulation with low concentrations of IFN??-2b for 12 weeks, the 50 u??mL^-1 group showed significant resistance to the best-effect concentration of IFN??-2b. Compared with the levels before stimulation, the inhibition rate on HBsAg, HBeAg, and HBV DNA decreased by 25.48%, 8.40%, and 15.43%, respectively, suggesting that 50 u??mL^-1 was the best-stimulation concentration. After stimulated with 50 u??mL^-1 IFN??-2b for 12-48 weeks, the results showed that the inhibition rate on HBsAg, HBeAg, and HBV DNA after 36 weeks was the most significant. CONCLUSION Continuous induction with 50 u??mL^-1 IFN??-2b for 36 weeks could most easily induce drug resistance in HepG2.2.15 cells.     

燕麦膳食纤维对肠道胆固醇吸收的影响及机制研究

目的研究燕麦膳食纤维(dietary fiber,DF)对高脂高胆固醇饮食小鼠肠道胆固醇吸收的影响及其机制。方法 36只雄性C57BL/6J小鼠,按体质量随机分为:阴性对照组、模型对照组、燕麦DF组,预防性干预24 w。实验结束后测定各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),计算低密度脂蛋白(LDL-c)。western blot方法测定肠道中与胆固醇吸收相关的GTP结合蛋白Sar1B、尼曼-匹克C1型类似蛋白1(NPC1L1)、清道夫受体B1(SR-B1)蛋白的表达水平。结果实验结束时,与模型对照组相比,燕麦DF组的体重、血清TC、LDL-C水平均显著下降(P0.05),HDL-C水平显著升高(P0.05);与胆固醇吸收相关的NPC1L1水平显著降低(P0.05),SR-B1无显著变化,调控NPC1L1和SR-B1的Sar1B蛋白表达水平显著升高(P0.05)。结论燕麦DF可以通过上调Sar1B降低肠道NPC1L1表达水平,从而减少肠道胆固醇吸收,降低血脂水平,改善高脂高胆固醇饮食引起的高脂血症。     

奥扎格雷两种晶型在大鼠体内的药代动力学研究

研究奥扎格雷两种晶型固体灌胃后,在SD大鼠胃肠道的吸收过程,评价其优势药物晶型,探讨该药物晶型状态对临床用药的影响。SD大鼠灌胃给予不同晶型奥扎格雷固体原料药,采用高效液相色谱法测定血浆中奥扎格雷的浓度,计算其在大鼠体内的药代动力学参数并比对不同晶型之间的差异。大鼠经口给予固体奥扎格雷晶型Ⅰ和晶型Ⅱ后,血液中奥扎格雷Cmax分别为32.72±17.04和34.01±19.13 mg·L-1,AUC0-t分别为61.14±14.76和85.56±18.08 mg·L-1·h,t1/2分别为1.53±0.51和4.73±3.00 h。大鼠口服不同晶型奥扎格雷后,晶II型血药浓度-时间曲线下面积大于晶I型,半衰期较长,为优势晶型,提示在该药物的生产中需要注意晶型的控制。     

临床教师职业倦怠的相关影响因素分析

目的探讨职业倦怠的主要影响因素及与教学质量的相关性。方法对97名参与临床教学的医护人员进行调查,分析职业倦怠现状、影响因素,及职业倦怠与教学质量的相关性。结果97名临床教师中,存在轻度倦怠41例(42.27%),中度倦怠23例(23.71%),重度倦怠9例(9.28%),合计共有73名临床教师存在职业倦怠(75.26%)。女性情感耗竭维度得分高于男性(P<0.05)。不同职称者情感耗竭、人格解体和成就感降低3个维度得分均差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:婚姻状况和职称为职业倦怠的风险因素(P<0.05)。轻度倦怠与重度倦怠者社会支持利用度得分差异有统计学意义(P<0.01)。Spearman等级相关分析结果显示:职业倦怠程度与教学质量评议分数无相关性(P>0.05),职称与教学质量评议分数有正相关关系(P<0.05)。结论临床教师职业倦怠强度与职称、婚姻状况有关。临床教师职称与教学质量正相关。     

心房颤动患者口服新型抗凝药的获益与风险

新近问世的新型口服抗凝药如:达比加群、利伐沙班(拜瑞妥)、阿派沙班等,为心房颤动患者提供了除华法林的新选择。但由于使用时间较短,某些药理学作用不十分明确,其获益和风险尚需进一步评估。     

新医改形势下对某医院基层进修人员的教学管理研究

新医改形势下,基层卫生服务需求增加与供给能力不足的矛盾迫使基层医院选派更多的人外出进修。对比新医改前后,在某医院进修的基层卫生人员数量和结构的变化发现,进修人员呈现数量增长、学历升高、职称仍然偏低的特征,接收进修生的教学医院存在教学资源紧张、教学模式落后、监管力度不足等问题,针对这些问题提出加大教学投入、创新教学模式、加强教学过程管理的建议。     

let-7在小鼠哮喘模型气道炎性反应中的作用及机制

目的 观察let-7家族微RNA抑制剂(anti-let-7)对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道炎性反应的影响,并探讨let-7参与哮喘形成的机制.方法 32只小鼠按随机数字法分为4组(n=8),即正常对照组(A组)、哮喘组(B组)、干预对照组(C组)和干预组(D组).其中B、C和D组用鸡卵蛋白(OVA)免疫,建立哮喘模型,A组以生理盐水替代OVA处理.D组小鼠激发前注射anti-let-7以抑制内源性let-7表达,C组小鼠注射乱序siRNA对照.比较各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)的细胞计数,肺组织中let-7e以及BALF中白细胞介素-10(IL-10)含量；体外用anti-let-7转染肺癌细胞A549,并检测细胞中let-7e表达和细胞培养上清中IL-10的含量；荧光素酶报告法检测let-7e是否直接靶向IL-10.结果 与A组相比,B组和C组小鼠BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞数显著增加[(20.32±5.33)×109/L和(24.74±6.69)×109/L比(7.12± 1.88)×109/L,(6.45±2.5)×109/L和(7.12±2.66)×109/L比(0.04±0.01)×109/L,均P＜0.01]；肺组织中let-7e水平明显升高(分别为3.83倍和3.27倍,均P＜0.01).与C组比较,D组BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞数明显减少[(13.85±3.74)× 109/L比(24.74±6.69)×109/L,(2.15±1.13)×109/L比(7.12±2.66)×109/L,均P＜0.05]；肺组织中let-7e显著降低[(0.45±0.22)比(3.28±0.45),P＜0.01],同时BALF中IL-10水平明显升高[(4.68±0.85)比(1.70±0.29),P＜0.01].此外,在肺癌细胞A549 中转染anti-let-7,let-7e表达显著下降[(0.22±0.03)比(1.00±0.11),P＜0.01],同时培养上清中IL-10明显上升[(2.58±0.35)比(1.00±0.15),P＜0.01].体外let-7e过表达显著降低IL-10报告载体的荧光素酶活性[(0.59±0.06)比(1.00±0.03),P＜0.01],而对突变的IL-10报告载体没有抑制作用.结论 anti-let-7对哮喘小鼠气道炎性反应具有明显的抑制作用,其作用机制可能与let-7直接靶向并抑制IL-10有关.     

临床血液流变学指标检测报告单设计不合理应该修正

笔者发现虽然血液流变学广泛用于l临床已经20几年，但其指标检测报告单的指标设置仍然比较混乱。报告单设计不合理的现象普遍存在。笔者为了纠正这种现象而撰写此文。研究指出了哪些是科学合理必须的指标和设置这些指标的两方面依据。论文阐明了全血高剪变率、中剪变率、低剪变率黏度，红细胞变形性、聚集性指标的正确含义，并将若干指标的优劣性进行了分析、比较。笔者为血液流变学首次提出了红细胞变形率、红细胞聚集率这两个新概念。研究揭示报告单指标设置不合理性归纳为三个方面：指标太多，指标重复，指标无意义。产生这些不合理性的缘由是：检测仪器厂商炫耀其仪器功能齐全，利于销售；设计者和检验人员血液流变学知识浅薄，指标良莠不分。但愿此文能引起人们重视，共同促进临床血液流变学指标设置和检测规范化。     

不同剂量舒芬太尼对颅脑外伤手术血流动力学变化的影响

目的观察颅脑外伤手术中应用不同剂量舒芬太尼对血流动力学变化的影响。方法选择40例ASA评分Ⅱ到Ⅳ级颅脑外伤手术病人,随机均分为A组和B组。麻醉诱导采用A组舒芬太尼0.4ug/kg,B组舒芬太尼0.55ug/kg,气管插管后机械通气,术中A组静脉持续泵入舒芬太尼0.2ug/(kg.h),B组舒芬太尼0.3ug/(kg.h)。记录诱导前(基础值)、切皮时、开颅时、去骨瓣时、手术结束时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)。结果与诱导插管前相比,2组病人的血压及心率均有所下降(P<0.05),A组病人插管时,插管后1、3min平均动脉压(MAP)、心率(HR)较插管前有所升高(P<0.05),手术中切皮时、开颅时、去骨瓣时、手术结束时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)均有不同程度的增高,需要加用镇静镇痛或降血压药物;B组病人诱导前(基础值)、切皮时、开颅时、去骨瓣时、手术结束时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)变化不明显。结论在颅脑外伤手术麻醉诱导采用舒芬太尼0.55ug/kg,麻醉维持采用舒芬太尼0.3ug/(kg.h)能更好地维持血流动力学稳定。