全硫代反义寡核苷酸对肺癌细胞生长及端粒酶活性的影响

目的将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸(PS-ASODN)作用于肺癌细胞NCI-H292,探讨其对肺癌的治疗价值。方法PS-ASODN经lipotap脂质体转染作用于NCI-H292细胞,采用MTT法、ELISA法和流式细胞术检测NCI-H292细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果①MTT法检测,1.0μmol/LPS-ASODN处理后24h细胞生长抑制率为12.86%,且随着时间的延长,抑制作用逐渐增强。②ELISA法检测结果,0.5～1.5μmol/L的PS-ASODN对NCI-H292细胞作用72h后端粒酶皆为阴性,对照组阳性。③流式细胞仪检测结果:端粒酶PS-ASODN转染NCI-H292细胞培养72h后,检测到细胞早期凋亡率增加,凋亡率为15.3%,与对照组相比有极显著意义(P<0.01)。PI染色结果细胞被阻止在G1/G0期,S期比率有所降低,降为14.5%。结论①端粒酶PS-ASODN对NCI-H292细胞增殖有明显的抑制作用,其抑制作用具有浓度、时间依赖性。②端粒酶PS-ASODN能明显地抑制NCI-H292的端粒酶活性。     

沈阳市综合医院焦虑障碍患病率及特征

目的了解沈阳市综合医院内科门诊焦虑障碍的患病率和焦虑患者的特征。方法采用分层随机整群抽样方法抽取沈阳市23家综合医院调查,共调查5750例内科门诊患者。使用扩展的一般健康问卷（GHQ-12）为筛查工具,对筛查高、中、低危险组按比例进行诊断工具《美国精神障碍诊断与统计手册》第四版科研版轴Ⅰ障碍定式临床检查（SCID-I/P）,以确定患病率。结果沈阳市综合医院内科门诊躯体疾病所致焦虑障碍患病率为0.468;任何焦虑障碍（非躯体疾病所致）现患率为4.92%,未特定焦虑障碍患病率最高（2.91%）,其次为广泛性焦虑障碍（1.51%）。焦虑障碍者的特征为分居/离婚、年龄≥45岁、受过高等教育、高收入者多。结论沈阳市综合医院内科门诊焦虑障碍患病率较高,多为分居/离婚、年龄≥45岁、受过高等教育、高收入者。     

肿瘤坏死因子、白细胞介素6活性变化对家兔肠缺血再灌注后急性肺损伤的影响

目的测定家兔肠缺血再灌注后血浆和肺组织匀浆TNF和IL-6的活性,结合肺组织病理学改变,探讨急性肺损伤的病理机制.方法利用肠系膜上动脉夹闭模型,将家兔随机分为正常对照组、缺血60min组,缺血60min后再灌注(1h、2h、4h)组,分别测定不同时段血浆TNF和IL-6的活性,并于缺血60min,再灌注4h处死动物,开胸取肺,测肺体指数和肺组织匀浆TNF和IL-6的活性,并做肺组织病理学检查.结果血浆TNF和IL-6的活性于肠缺血1h就显著升高(P＜0.01),再灌注1h继续升高(P＜0.01),以后逐渐下降,于再灌注4h几乎接近正常对照组水平.再灌组肺组织匀浆TNF和IL-6的活性与正常对照比较显著升高(P＜0.05),再灌组、缺血组肺组织病理改变与正常对照组比较都有不同程度的变化.结论提示肠缺血再灌注后可引起急性肺损伤,并且血浆和肺组织匀浆TNF和IL-6的活性的变化可能为肺部病理改变原因之一.     

高职高专口腔医学专业医学基础课程改革探讨

为了更好地体现高职高专教育特色,为口腔医学专业建设服务,从而培养出更适合社会需要的高素质技术型、技能型人才。医学基础课程要加大与口腔医学专业课程的融合步伐,深化与口腔医学专业课程接合位点。主要对课程体系,课程内容,教学方法等加大改革力度。     

氟康唑注射液耳浴治疗真菌性外耳道炎71例

目的探讨氟康唑注射液耳浴治疗真菌性外耳道炎的方法和疗效。方法对真菌性外耳道炎患者139例,分成观察组71例和对照组68例,观察组用氟康唑注射液耳浴治疗,对照组用达克宁霜涂布治疗。随访1年。结果两种方法治疗真菌性外耳道炎均有效,但随访1年,达克宁组复发率比氟康唑组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氟康唑注射液耳浴治疗真菌性外耳道炎复发率低,操作简便,患者依从性佳。     

醒脑开窍针刺法治疗脑卒中后吞咽困难的有效性与安全性的系统评价

【目的】评价醒脑开窍针刺法治疗脑卒中后吞咽困难的疗效。【方法】计算机检索中文数据库如中国生物医学文献数据库（CBM）、中国学术文献网络出版总库（CNKI）、中文科技期刊数据库（维普VIP）和万方数据库（Wanfang Data）,及外文数据库如PubMed、 Web of Science、 EMbase、 The Cochrane Library等（从数据库建库到2014年12月）有关醒脑开窍针刺法治疗脑卒中后吞咽困难的随机对照试验（RCT）的文献。由2位评价员按纳入和排除标准独立筛选文献、提取资料和评价纳入研究的方法学质量后,采用RevMan 5.3.0进行Meta分析。【结果】共纳入8个RCT,涉及766例患者。 Meta分析显示：（1）对于恢复期患者,疗程4周的醒脑开窍针刺法联合常规治疗（内科常规治疗或内科常规治疗+吞咽功能训练）总有效率高于不联合治疗组(P＜0.01);（2）对于急性期患者,疗程4周的醒脑开窍针刺法联合内科常规治疗与不联合治疗的总有效率无差别(P=0.05);（3）联合醒脑开窍针刺法对肺部并发症作用尚不确定。【结论】醒脑开窍针刺法联合常规治疗（吞咽功能训练、内科治疗）有利于脑卒中恢复期患者的吞咽功能恢复。对于脑卒中后吞咽困难的治疗时机、疗程、并发症等的疗效评估等仍然需要设计合理、报告规范的大规模、高质量的随机对照试验的验证。     

不可逆性电穿孔介导HPV16 E6 shRNA干扰质粒对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响

目的:探讨利用治疗剂量脉冲电场产生不可逆电穿孔(IRE)介导HPV16 E6 shRNA干扰质粒进入细胞的可行性,阐明二者共同作用对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响及其作用机制。方法:将HPV16 E6基因特异性干扰序列插入pGenesil-1质粒,构建HPV16 E6 shRNA真核表达载体,将10个电压为800 V、脉宽100 μs、频率1 Hz的IRE作用于SiHa细胞与HPV 16 E6 shRNA干扰质粒的混悬液,根据处理因素组合,分为空白对照组、IRE处理组、pGenesil-N组、pGenesil-N+IRE组、pGenesil-E6组和pGenesil-E6+IRE组。在荧光显微镜下观察SiHa细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达,计算GFP表达效率;RT-PCR法检测HPV 16 E6 mRNA表达水平,Western blotting法检测HPV16 E6蛋白、P53及PCNA蛋白表达水平,CCK-8法检测各组SiHa细胞增殖能力的变化。结果:成功构建HPV16 E6 shRNA真核表达载体,IRE处理后24 h细胞即可见到绿色荧光;与IRE组比较,pGenesil-E6+IRE组E6 mRNA表达水平下降(P<0.05),E6蛋白表达水平降低(P<0.05),P53蛋白表达水平增高(P<0.05),PCNA表达水平下降(P<0.05);CCK-8法检测,与pGenesil-E6组比较,pGenesil-E6+IRE组细胞增殖活性下降更明显(P<0.05)。结论:治疗剂量的IRE可介导外源基因进入细胞,二者联合作用能明显抑制宫颈癌SiHa细胞增殖。     

内镜经黏膜下隧道切除术治疗上消化道黏膜下肿瘤的研究

目的 探讨上消化道黏膜下肿瘤（SMTs）的部位、来源层次、大小在内镜经黏膜下隧道切除术（STER）的各个环节如何影响STER的成功率及并发症发生率。方法 收集2014年1月1日至2015年6月30日在四川大学华西医院内镜中心行STER治疗的31例上消化道SMTs患者的临床资料并进行分析。结果 31例上消化道SMTs中,29例（93.5%）完成肿瘤切除,失败的2例均为胃部肿瘤。完成切除的29例患者食管与胃黏膜下肿瘤隧道建立时间分别为（13.76±9.70） min、（32.00±27.35） min, P=0.045;黏膜层与固有肌层SMTs的肿瘤切除时间分别为（17.50±9.06） min、（36.24±15.68） min, P=0.004;肿瘤最大径＜2.0 cm与≥2.0 cm的SMTs切除时间分别为（25.78±12.13） min、（39.73±19.23） min, P=0.023。31例STER患者在术中或术后出现并发症共6例（19.4%）,均为胃部肿瘤,肿瘤均来源于固有肌层。结论 上消化道SMTs的部位、来源层次及肿瘤大小可影响STER的不同手术阶段耗用时间,亦是影响手术成功率及并发症发生率的重要因素。     

高肺血流性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌中钙敏感受体表达和血浆中H2S含量的检测及其意义

目的：检测钙敏感受体（CaSR）在高肺血流性肺动脉高压（PH）大鼠肺动脉平滑肌中的表达水平及血浆中H₂S含量,阐明两者在PH形成机制中的作用。方法：18只雄性SD大鼠随机分为对照组和PH组,对照组大鼠行单纯开胸,PH组大鼠行左肺切除手术。饲养35 d后,应用右心导管法分别测定各组大鼠肺动脉平均压（PAMP）,检测右心室/ 体质量(RV/ BW) 和右心室/左心室+室间隔［RV/（LV+S)］ 比值,光学显微镜观察肺血管结构的变化,分光光度法检测血浆H₂S含量,应用实时荧光定量PCR方法检测大鼠肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平。结果：PH组大鼠PAMP、RV/ BW及RV/ (LV + S) 比值均明显高于对照组（P<0.05）,光镜下肺小血管肌化程度明显增强,肺中、小肌型动脉相对中膜厚度明显增加（P<0.05）。PH组大鼠肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平较对照组明显增高（P<0.05）;PH组大鼠血浆中H₂S含量较对照组明显降低（P<0.05）。大鼠肺动平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平与血浆H2S含量呈负相关(r=－0.931,P<0.05)。结论：高肺血流时肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA表达的改变可能通过改变内源性H2S的产生参与PH的形成。     

CTGF反义寡核苷酸治疗肺纤维化的实验研究

目的:观察CGTF反义寡核苷酸对体外培养的人肺成纤维细胞的抗增殖作用。方法:将人肺成纤维细胞随机分为对照组、空载体转染组、CTGF反义寡核苷酸(CTGF-ASODN)组、CTGF正义寡核苷酸(CTGF-SODN)组。CTGF错义寡核苷酸(CT-GF-SCDN)组,转染后观察细胞的增殖程度以及CTGF mRNA的表达。结果:转染了CTGF反义寡核苷酸(CTGF-ASODN)组人成纤维细胞的增殖明显受到抑制,其CTGF mRNA的表达明显减少。结论:应用CGTF反义寡核苷酸可以起到对人肺成纤维细胞的抗增殖作用。