心脏钠通道无义突变的分子拯救部分恢复钠通道的表达和功能

目的 研究探讨真核释放因子eRF3a的RNA干扰如何影响心脏钠通道无义突变的表达和功能.方法 构建心脏钠通道无义突变和干扰eRF3a RNA的真核表达载体,独立或共同转染HEK293细胞,全细胞膜片钳记录钠通道的表达电流和动力学,同时应用蛋白印迹和免疫荧光证明钠通道的表达和定位.结果 独立转染W822X无义突变的HEK293细胞没有检测到全长钠通道蛋白,表达的钠电流水平很低,仅相当野生型钠电流3%.共同转染HEK293细胞可以检测到全长钠通道蛋白,表达的钠电流水平明显增加,相当于野生型钠电流30%.免疫荧光也显示,独立转染W822X无义突变的HEK293细胞没有出现荧光细胞,而共同转染的HEK293细胞出现较多的荧光细胞.结论 真核释放因子eRF3a的RNA干扰促进心脏钠通道无义突变的翻译,部分恢复钠通道全长表达和功能.

Abstract：

Objective In this study we investigated the functional restoration of nonsense mutations in the SCN5A gene. Methods The readthrough-enhancing reagents were introduced to HEK293 cells to suppress one nonsense mutation W822X in the SCN5A gene. Patch-clamp was used to record the whole-cell current and dynamics. Western blot and immunofluorescence staining were used to certify the expression and the location of the sodium channel. Results In transfected HEK293 cells, the nonsense mutation in SCN5A inhibited the expression level of full-length protein, and the sodium currents from the mutant channels were less than 3% of the wild-type level. Readthrough enhancement by decreasing translation termination efficiency with a siRNA targeting eukaryotic release factor eRF3a ( a GTPase that binds eRF1 ), the sodium current from the mutant cDNAs was restored to as much as 30% of the wild-type. After the treatment by the readthrough-enhancing reagents, the channels from cDNA carrying W822X remained the features of wild-type phenotype, and Western blot and immunochemical staining also showed the expression of full-length channel proteins. Conclusion Readthrough-enhancing reagents could effectively suppress nonsense mutations in SCN5A and partially restore the function of sodium channel and the expression of full-length channels.     

病程日记对肾病综合征患者管理效果的探讨

目的 探讨病程日记对肾病综合征患者实施慢性病自我管理的效果.方法 将100例肾病综合征患者随机分成两组,实验组(50例):入院时即教会和指导患者用课题组设计的病程日记本进行各项指标的记录并配合常规治疗及健康教育,嘱患者继续作病程日记.每2～4周复诊1次;对照组(50例):入院时按常规治疗及健康教育,出院时予常规出院指导,嘱患者每2～4周复诊1次.结果 与对照组相比,实验组患者对各种指标如尿量、蛋白尿、体重、血压、肾功能、激素及免疫抑制剂的用法用量等掌握较好,复诊率明显增加(P<0.01).结论 采用病程日记对肾病综合征患者实施慢性病自我管理,可有效地将传统的被动式医学服务模式转变为以患者为中心的共同参与型的现代医学模式,且简便、价廉、效果好.     

全血放置4℃制备24h冰冻血浆的质量研究

目的探讨24h冰冻血浆(FP24)质量及其制备程序。方法 24份(400ml/份)全血于采后<6h用无菌接驳机一分为二:1份6h内过滤去除白细胞(简称滤白),在其中设对照组[12份滤白后立即制备血浆(FFP)]、实验组1[12份滤白后置4℃过夜(18～24h)后制备血浆(Ⅰ-FP24)];另1份作为实验组2,置4℃过夜后滤白并立即制备血浆(Ⅱ-FP24)。所有血浆分别制备好后立即保存至-30℃冰箱,并于采血后d337℃解冻后做体外质量评估:观察外观、检测FⅤ、FⅦ、FⅧ及Fib,以及主要生化指标含量。结果对照组FFPFib、FⅤ、FⅦ及FⅧ依次为(2.08±0.16)g/L、(86.57±18.73)%、(91.71±25.53)%和(97.65±25.99)%,与之相比,实验组1依次下降22.6%、29.38%、32.89%和40.71%,实验组2相应下降1.9%、-2.09%、14.91%和32.86%。实验组2与对照组的FⅧ分别为(65.56±13.93)%和(97.65±25.99)%(P<0.05),实验组2与实验组1的FⅤ分别为(88.38±15.97)%和(61.14±13.76)%(P<0.05);实验组2的K+、LDH、FHb分别为(4.33±0.28)mmol/L、(145.70±26.00)mmol/L和(129.96±34.33)mg/L,较对照组和实验组1明显增高(P<0.05)。结论全血采后<6h滤白并置4℃过夜再制备的冰冻血浆,凝血因子损失较多;全血采后置4℃过夜(18～24h)后滤白并随后制备的冰冻血浆,则能很大程度地保持凝血因子的效果。     

磁共振关节内增强扫描在膝关节损伤中的临床研究

目的探索进一步提高膝关节损伤诊断的方法,为临床诊断和治疗提供重要依据。方法对21例（22膝）膝关节损伤患者均先进行普通扫描,扫描完成后,如果关节内有积血、积液时,行关节穿刺,抽出积血、积液,同时向关节内注入增强剂,再进行扫描;无积血、积液患者,行关节穿刺直接注入增强剂。结果所有患者在平扫中均发现有不同程度的关节结构损伤,包括：骨质、半月板、韧带和软骨等。在放出积血、积液并注入关节内增强剂再次增强扫描中,这些损伤被进一步证实,并在损伤的程度和范围上更加明确。有4例患者在平扫中未被发现的软骨病变信号,在关节内增强扫描后发现软骨有裂缝。结论磁共振关节内增强扫描能提高诊断膝关节损伤的灵敏性和特异性,与普通磁共振扫描相比具有明显的优势。     

急性胃穿孔80例诊治体会

目的:探讨急性胃穿孔的临床特点,回顾分析本院病例以指导临床诊治和提高疗效.方法:80例急性穿孔患者采用不同形式的治疗方法,其中行单纯穿孔缝合术52例,胃大部切除术28例.结果:D组中毒性休克3例高于W组1例;D组切口感染2例低于W组4例(9.0%).结论:早期诊断,采取胃大部切除术是治疗急性胃穿孔的最佳方案.     

2005年-2009年某院住院医疗费用变动情况的分析研究

目的探讨降低医疗费用的对策。方法回顾性分析2005年-2009年医疗费用变动情况。结果医疗费用呈上升趋势,药费的增长幅度大于其他费用的增长幅度;在医疗费用不断增长的同时,住院患者数也呈上升趋势。结论在控制医疗费用过快增长时,应控制药品费用的比例,同时要防止为达到降低药品费用比例的目的,增加不合理过度医疗现象的发生。     

鸡胚地龙膏对兔急性软组织损伤血清及组织液中疼痛指标的影响

目的观察鸡胚地龙膏对兔急性软组织损伤血清及组织液中疼痛指标的影响。方法以105只新西兰白兔为研究对象,随机选出21只作为正常对照组,剩余84只新西兰白兔造模成功后随机分为4组,分别为模型对照组、阳性药物组、鸡胚地龙膏低剂量组和鸡胚地龙膏高剂量组,每组21只动物。模型组不作任何处理,自然恢复愈合,阳性药物组采用奇正消痛膏治疗(0.75g/kg),鸡胚地龙膏低剂量组和鸡胚地龙膏高剂量组采用鸡胚地龙膏治疗,药物剂量分别为0.15g/kg和0.75g/kg。阳性药物组、鸡胚地龙膏低剂量组和鸡胚地龙膏高剂量组药膏涂布面积以超过受损区面积1/2以上为度,外用特制胶布及卫生胶布固定、包扎,每天换药1次,共给药8天。各组分别于损伤前,损伤后即刻,损伤后第1、2、3、6、8天抽取5ml静脉血后,处死动物,留取损伤部位组织,制作组织液。采用酶联免疫法分别测定不同时间血液和组织液中前列腺素E2(PGE2)、5-羟色胺(5-HT)和组织胺(HIS)的含量水平,并进行统计学分析。结果鸡胚地龙膏高剂量组从损伤后第2天开始血清及组织液中PGE2、5-HT、HIS逐渐降低,其血清及组织液中PGE2、5-HT、HIS含量水平低于鸡胚地龙膏低剂量组和阳性药物组(P<0.01)。伤后3天鸡胚地龙膏高剂量组血清及组织液中PGE2、5-HT恢复到损伤前水平,较鸡胚地龙膏低剂量组和阳性药物组提前5天恢复到损伤前的正常水平。而HIS含量伤后6天恢复正常,较鸡胚地龙膏低剂量组和阳性药物组提前2天。结论鸡胚地龙膏可有效降低兔急性软组织损伤后的血清和组织液中PGE2、5-HT和HIS等疼痛因子的含量水平,减轻损伤后疼痛程度。     

慢性前列腺炎患者心理状况与生活质量的相关性分析

目的 探讨慢性前列腺炎(CP)患者心理健康状况与生活质量的关系.方法 采用症状自评量表(SCL-90)和世界卫生组织生活质量测定量表简表(WHOQOL-BREF)评估100例CP患者(观察组)和80例健康体检者(对照组)的心理健康状况和生活质量.结果 观察组的躯体化症状、强迫症状、人际关系敏感、抑郁、焦虑、偏执和总均分明显高于对照组,观察组的生理、心理、社会关系和环境等4个领域的WHOQOL-BREF评分明显低于对照组,差异有统计学意义,均P<0.01.CP患者SCL-90总均分与WHOQOL-BREF的4个领域评分呈显著负相关,均P<0.01.结论 CP患者心理健康状况对生活质量有一定影响,护理人员应结合多种方式,采取有效的护理干预措施,提高其生活质量.     

ZnO, TiO(2), SiO(2,) and Al(2)O(3) nanoparticles-induced toxic effects on human fetal lung fibroblasts

Objective This study aims to investigate and compare the toxic effects of four types of metal oxide(ZnO,TiO2,SiO2,and Al2O3)nanoparticles with similar primary size(~20 nm)on human fetal lung fibroblasts(HFL1)in vitro.Methods The HFL1 cells were exposed to the nanoparticles,and toxic effects were analyzed by using MTT assay,cellular morphology observation and Hoechst 33 258 staining.Results The results show that the four types of metal oxide nanoparticles lead to cellular mitochondrial dysfunction,morphologi...