不同浓度5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记山羊骨髓基质干细胞的体外研究

Objective To explore the feasibility of labeling and tracing in vitro goat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) by bromodeoxyuridine (BrdU) on the basis of investigation of its optimal concentration, incubating time and cytotoxicity. Methods A healthy goat, aged 10 months old, male, weighing 32 kg, was used in this study. Bone marrow was aspirated. BMSCs were isolated and cultured using the adherence method in vitro. The fourth passage of BMSCs (P4) were incubated with BrdU at 5, 10, 15, 20 μmol/L as 5, 10, 15, 20 μmol/L BMSC groups. Cells were not labeled by BrdU as negative control. The following parameters were measured: induction, differentiation and determination of goat BMSCs; the optimal mass concentration and incubation time of 5-BrdU labeling; cell positive rate at 12, 24, 48 and 72 hours in each group using immunofluoreseenee; the cell survival rate after various concentrations of BrdU ladling by trypan-blue exclusion. Results The morphology of the primary and passage goat BMSCs was fusiform in shape. Goat BMSCs could differentiate into osteoblasts and chondrocytes following induction. BMSC nucleus showed green fluorescence under fluorescence microscope after being labeled by BrdU. The mean labeling rate increased with the increase in the concentration and incubation time of BrdU, and reached to (93.32± 3.25)% after incubation in 15 μmol/L, BrdU for 48 hours. There were no significant differences between 15 μmol/L BrdU for 72 hours, 20 μmol/L BrdU for 48 hours and 72 hours (P > 0.05), or between the other groups or time points (P < 0.05). The labeling rate of the blank control group was 0. The cell survival rate was all above 90% (P > 0.05). Conclusions BrdU can be used as a labeling marker for goat BMSCs. When the concentration is 15 μmol/L and the incubation time is 48 hours, the optimal labeling effect can be achieved. Goat BMSCs labeled with BrdU is of high efficiency and safety.     

胃癌全胃切除术后消化道重建方式的选择

目的：探讨全胃切除术后较理想的消化道重建方式。方法：对近6年来122例施行全胃切除术患者的临床资料进行回顾性分析。全胃切除后消化道重建分别采用全胃切除术后消化道重建Orr式Roux-en-Y食管空肠吻合术、P型空肠袢食管空肠Roux-en-Y吻合术和远端空肠反口贮袋的Roux-en-Y食管空肠吻合术。结果：3种术式在食后烧灼感、进食量、进食次数、体重下降、倾倒综合征、血红蛋白、白蛋白等指标的比较，无明显差异（均P>0.05）。P型空肠袢食管空肠Roux-en-Y吻合术组所用手术时间显著多于Orr组及反口组（P<0.05）。反口组的贮袋大小及半排空时间显著优于Orr组及P袢组（P<0.05）。结论：远端空肠反口贮袋的Roux-en-Y吻合术是一种值得推荐的新型全胃切除术后消化道重建方法。     

实验性大鼠大脑皮层梗死后继发丘脑损害与DNA氧化损伤

目的观察大鼠大脑皮层梗死后丘脑腹后外侧核(ventroposterior nucleus of the thalamus,VPN)的继发性损害是否有DNA氧化损伤,并研究抗氧化剂依布硒啉(ebselen,EB)对这种远隔部位损伤是否具有改善作用。方法采用易卒中型肾血管性高血压大鼠(stroke-prone renovascular hypertensive rats,RHRSP),建立大脑中动脉皮层支闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型后分为:①假手术组,②模型组,③溶剂组,④抗氧化剂EB10mg.kg-1组,⑤抗氧化剂EB30mg.kg-1组,每组5只大鼠。2周后行肢体运动神经功能评估并取VPN后行尼氏染色,免疫组化检测VPN的8-羟基-2-脱氧马苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-ohdG)表达。结果EB10mg.kg-1组和EB30mg.kg-1组神经功能评分优于假手术组(1.80±0.56,1.72±0.48vs2.28±0.33,P<0.05)。尼氏染色可见假手术组同侧VPN细胞形态规整。而梗死同侧VPN神经细胞出现细胞体积变小,胞核固缩,尼氏体退变为萎缩的深色细胞。EB30mg.kg-1组尼氏染色观察到改善作用。溶剂组同侧VPN的8-ohdG阳性细胞数目(0.1mm2)显著增加(146.8±12.1vs108.4±19.2,P<0.05);与溶剂组相比,EB10mg.kg-1组和EB30mg.kg-1组阳性细胞数目显著下降(123.6±14.7,123.4±17.4vs146.8±12.1,P<0.05)。结论实验性大脑皮层梗死后2周,同侧VPN存在DNA氧化性损伤。抗氧化剂EB对VPN的DNA氧化损伤有抑制作用,并可改善神经功能。     

Retardation of pain development: a case of recovery from congenital insensitivity to pain

Congenital analgesia is a rare genetic disorder. We report here that a 12-year-old boy was able to recover from congenital insensitivity to pain. Neurological examinations revealed that there was a 'stocking' distribution of pain decrement on the lower extremities under the patient's knee joints. Magnetic Resonance Imaging (MRI) of his brain showed gyrus thinning with sulcus widening at both sides of the parietal lobe. Southern blot hybridization probed with cDNAs of various opioid receptors did not detect any significant abnormality. Our results suggest that this rare case may not be genetically determined.     

影响急性外份性硬脑膜外血肿疗效的相关因素分析（附484例报告）

目的探讨影响急性外伤性硬脑膜外血肿疗效的相关因素。方法对1994年5月至2004年5月收治的484例外伤性硬脑膜外血肿患者的临床资料进行回顾性分析。结果无脑疝症状者手术死亡率7.7%,有脑疝症状者死亡率21.3%。手术距脑疝发生时间<1h死亡率8.2%,1～2h死亡率40.0%,>2h死亡率72.2%。结论影响外伤性硬脑膜外血肿疗效的相关因素较多,除脑疝形成及手术距脑疝发生的时间外,创伤性低血压、合并脑损伤的程度、呼吸功能不全、大面积脑梗塞、血糖与血浆渗透压升高及肝功能异常等均对患者预后有重要影响。     

荷瘤鼠乳腺癌组织的飞秒双光子荧光诊断

目的：检测荷瘤鼠乳腺癌组织的双光子荧光光谱。方法：乳腺癌荷瘤鼠腹腔注射血卟啉（HpD)。以飞秒激光照射小鼠的癌组织部位及周围正常组织部位。观察HpD双光子荧光光谱。结果：小鼠的癌组织部位可观察到外源性HpD双光子荧光光谱，而正常组织部位未观察到明显的双光子荧光光谱。结论：结论：飞秒激光外源性血卟啉双光子荧光诊断可作为癌症诊断的新方法。     

异烟肼、利福平治疗肺结核致肝毒性易感基因的研究

目的：探讨N-乙酰基转移酶(NAT2)基因型与异烟肼、利福平治疗肺结核致肝毒性的相关性。方法：通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)技术分析67例经利福平、异烟肼治疗后发生或未发生肝功能异常的肺结核患者NAT2基因多态性的部位、性质及发生率。结果：病例组和对照组857位密码子多态性分别是20．3％和7．1％，两组差异显著。结论：NAT2基因型与异烟肼和利福平所致肝毒性关系密切，其中857位密码子点突变可能是结核患者发生肝毒性的易感基因型之一。     

分娩时子宫下段MMP-9及其组织抑制剂TIMP-1的变化

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP)及其组织抑制剂(TIMP)在分娩发动、宫颈成熟和扩张中的作用和机制.方法:采用ELISA方法测定子宫下段组织中MMP-9和TIMP-1的浓度.有宫缩剖宫产组56例,其中第一产程组44例,第二产程组12例.以无宫缩剖宫产组16例为对照组.结果:有宫缩剖宫产组子宫下段组织中MMP-9和TIMP-1的浓度分别明显高于无宫缩剖宫产组(P<0.05,P<0.05).第一产程组中随宫口开大,MMP-9和TIMP-1的浓度各组间无显著性差异.第二产程组MMP-9和TIMP-1的浓度分别明显高于第一产程组(P<0.01,P<0.05).结论:MMPs和TIMPs的动态变化是分娩发动、宫颈成熟和扩张过程中的重要中间环节.     

SNAP指数监测瑞芬太尼-异丙酚麻醉患者镇静深度的可行性

目的 探讨SNAP指数（SI）监测异丙酚一瑞芬太尼麻醉患者镇静深度的可行性。方法 40例择期全麻手术男性患者，ASA Ⅰ或Ⅱ级，年龄18～60岁，体重指数20～30kg／m^22，随机分为R0、R2、R4、R6组，每组10例。R0组麻醉诱导时靶控输注（TCI）0．9％生理盐水，R2、R4、R6组分别以效应室靶浓度2、4、6n/MLTCI瑞芬太尼，输注10min时开始TCI异丙酚，异丙酚初始效应室靶浓度均为1．5μg／ml，每4min增加0．5μg／ml，改良警觉／镇静（OAA／S）评分为1分时给予强直刺激，记录在临床目标（改良OAA／S评分为1分、睫毛反射消失、对强直刺激反应消失）出现时SI、脑电双频谱指数（BIS）、异丙酚效应室靶浓度（Ct）、异丙酚效应室浓度（Ce），并对SI与改良OAMS评分、BIS、Ct、Ce进行直线相关分析。结果 SI与改良OAA／S评分、BIS呈正相关，SI与Ct（除外R4组）及Ce（除外R2组）呈负相关；四组睫毛反射消失时SI差异无统计学意义（P〉0．05）；与R0组比较，对强直刺激反应消失时其它三组SI升高，Ct及Ce降低（P〈0．05）。结论 SI可用于瑞芬太尼-异丙酚麻醉患者镇静深度的监测。     

组织工程学--21世纪面临的机遇与挑战

组织工程学是近20年来医学生命科学领域最具进展与挑战性的前沿科技领域之一,被誉为“一场意义深远的医学革命”、“再生医学的新时代”,标志着复制再生组织与器官的时代的来临!由于它具有修复创伤、重建功能、挽救生命、提高生存质量所特有的优势及巨大的社会、经济价值,而倍受国际学术界及各国政府的高度关注与支持。目前国际上组织工程皮肤、组织工程软骨已有产品面世,并得到美国FDA的批准,国际上已成立了近百家组织工程公司,我国多家大学、研究单位亦相继成立了组织工程研发中心或组织工程公司。目前不但可以构建组织工程化组织,而且复杂生命器官组织工程化构建亦已在国内外积极展开,同时,一些组织工程化组织已初步应用于临床并取得了可喜的临床疗效,显示出组织工程技术可喜的局面、巨大的生命力与宏伟的远景。然而,组织工程学是一门新兴学科,是跨领域、多学科参与合作的边缘学科,目前的工作仅仅是初始,还有大量基本科学问题尚待阐明,大量技术难题尚待攻克;光明与困难共存,机遇与挑战同在;应不失时机抓住机遇,开拓创新,迎接挑战,全力打造组织工程技术的新时代,使组织工程技术能够尽早造福于人类。