呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条快速检测方法的建立和评价

目的 采用聚合酶链式反应（PCR）技术和胶体金技术建立一种呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条检测方法,并对其检测效果进行评价。 方法 根据GenBank数据库选择真菌内转录间隔区（ITS）基因片段作为靶基因,应用DNAMAN软件对真菌ITS基因片段进行分析,并分别在真菌通用引物5'端用生物素（Biotin）和异硫氰酸荧光素（FITC）进行修饰标记;建立PCR体系,进行体系的最佳条件优化;确定胶体金免疫层析试纸条标记链霉亲和素的最佳标记量和质控线及检测线最佳包被物浓度,组装核酸胶体金试纸条,对试纸条的特异度、灵敏度、重复性和稳定性进行验证。 结果 水煮法提取白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌DNA,浓度为180 μg·L^－1以上,纯度为1.60~2.10;在pH 7.0条件下,每100 μL胶体金溶液中制备胶体金标记链霉亲和素最佳标记量为 3.3 μg,质控线包被Biotin化牛血清白蛋白（BSA-Biotin）浓度为2.00 g·L^－1,检测线包被抗FITC抗体浓度为1.00 g·L^－1。核酸试纸条的特异度与电泳结果一致,仅白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌出现阳性结果,与金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、乙型溶血性链球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和大肠埃希菌等常见呼吸道感染细菌无交叉反应。灵敏度检测,白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌的DNA浓度分别为10^－4、10^－2和10^－3 mg·L^－1时核酸试纸条仍可准确检出,而普通PCR电泳结果显示白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌最低检测浓度分别为0.01、1.00和0.10 mg·L^－1;重复性检测,在不同实验室不同操作人员对核酸试纸条进行验证,结果一致,重复性良好;稳定性检测,核酸试纸条在第6、9和12个月进行检测,结果符合预期,稳定性良好。 结论 本研究建立的呼吸道真菌感染核酸胶体金试纸条可以检测白假丝酵母菌、新生隐球菌和毛霉菌等真菌,特异度和灵敏度均较高,操作简便且快速。     

抗NMDA受体脑炎的脑电图特点及其临床评估价值

  目的  总结分析抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎（抗NMDA受体脑炎）患者的脑电图特点,并探索脑电背景慢化分级、δ刷对临床评估的价值。  方法  纳入52例抗NMDA受体脑炎患者临床资料,包括年龄、性别、起病形式、合并肿瘤情况、辅助检查（脑脊液抗NMDA受体抗体滴度、MRI报告和脑电图结果）、治疗情况和出院随访情况。分析不同临床特征患者的脑电背景异常程度(EEG)、δ刷情况。  结果  52例患者中7例脑电图正常（14%）,45例脑电图异常（87%）,包括:轻度异常25例（48%）,中度异常 11例（21%）,重度异常9例（17%）。6例出现δ刷（12%）。脑电图检查时病情轻组有32例（62%）,病情重组有20例（38%）。随访1年后,预后良好组有45例（86%）,预后不佳组有7例（14%）。脑电背景异常程度越重、出现δ刷提示病情重、需要ICU治疗、预后不佳的比例增高（P<0.01）。脑电背景异常程度越重,CSF抗体滴度>1∶10的比例越高（P=0.035）,脑电背景异常程度越重,启动二线免疫治疗比例越高（P=0.008）。合并肿瘤的患者出现δ刷的比例更高（P=0.012）。首发病例较复发病例出现δ刷的概率更高（P=0.023）。  结论  脑电慢化程度和δ刷在评估病情、预测预后结果上一致,EEG越慢病情越重、预后越差,出现δ刷提示病情重、预后差。EEG慢化与抗MNDA受体脑炎的免疫状态相关,EEG越慢,免疫异常越重,临床上可动态检测患者的EEG以评估免疫治疗效果,若EEG慢化未改善应及早考虑加强免疫治疗。合并肿瘤的患者出现δ刷的比例更高,因此当出现δ刷时应积极排查肿瘤。     

应用心肌分层应变及做功技术评估长期腹膜透析尿毒症患者左心室功能

［摘要］目的： 利用心肌分层应变及心肌做功技术对长期腹膜透析的尿毒症患者的左心室功能进行研究,评估其在长期腹膜透析下的心功能变化。方法: 选择长期规律进行腹膜透析且经常规超声心动图检查提示左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)正常的尿毒症患者14例,测量其常规二维超声心动图参数,利用二维斑点追踪及心肌分层应变技术测量左心室整体纵向收缩期峰值应变(global longitudinal peak systolic strain,GLS)及内膜层、肌层和心外膜层3层心肌的纵向收缩期峰值应变(longitudinal peak systolic strain,LS),并结合血压得出左心室心肌整体做功参数,共同评估左心室心肌功能,随访5年并比较腹膜透析5年前后相关数据变化。结果: 规律腹膜透析5年后,尿毒症患者LVEF改变无统计学差异;GLS在四腔心切面明显减低(P=0.018),并从心内膜减低至心外膜(LS心内膜层 P=0.029,LS肌层 P=0.017,LS心外膜层 P=0.004);心肌整体做功参数以整体无用功(GWW)升高为主(P=0.048),整体有用功(GCW)、整体做功指数(GWI)及整体做功效率(GWE)无统计学差异。结论: 长期规律腹膜透析5年的尿毒症患者,其左心室整体心肌功能尚保持稳定,但局部心肌收缩功能进一步受损,主要体现在后间隔和侧壁的各层心肌,心肌做功以GWW升高为主。     

神经症的性压抑与心理因素的相关性研究

研究神经症患者潜在人格与性压抑和情绪的相关性.方法:对124例神经症患者进行了婚姻质量问卷(性生活、婚姻质量部份)、抑郁自评量表(以下简称SDS)、焦虑自评量表(以下简称SAS)及自编的性生活调查问卷、主题统觉测验(以下简称TAT)测评.结果:1、神经症伴性障碍组TAT潜在人格与对照组相比,在支配、性、援助、躯体社会攻击、财产破坏欲求、自我攻击、情绪变化欲求和情绪言语攻击性、躯体社会攻击、引诱、缺乏、丧失、灾害、丧失支持、躯体伤害压力上均较对照组显著增高,而成就欲求下降(P<005-001);与神经症无性障碍组相比,神经症伴性障碍组的成就、支配、教养、性欲求得分显著增高,情绪言语攻击欲求得分下降(P<001～005);2、神经症伴性障碍组的性生活质量低,性频度、性后快感均低.3、SDS、SAS与TAT中的负性欲求呈明显的相关性,性行为调查与婚姻质量量表中的性行为呈正相关.结论:神经症的性压抑与其潜在人格有密切的相关性.     

基于通用中间件接口服务器的远程医疗信息系统

在远程医疗信息系统共享平台的设计中,提出一种构建通用中间件接口服务器实现多家医院信息系统HIS与PACS的无缝连接方案。着重介绍了DICOM中间件、HL7消息中间件、生态识别和PKI技术在系统集成中的应用。     

Cloning and sequencing of putative acetylcholinesterase cDNAs from the American dog tick, Dermacentor variabilis, and the brown dog tick, Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae)

Two putative cDNAs of acetylcholinesterase (AChE), one from Dermacentor variabilis, and the other from Rhipicephalus sanguineus, were amplified and sequenced. The deduced amino acid sequences have high amino acid identities (between 70 and 94%) to known tick AChE sequences deposited in GenBank. Furthermore, these two AChEs also possess common features in their primary AChE structure such as catalytic active sites. A 2,220-bp contiguous sequence, containing a 1,791-bp open reading frame encoding an AChE precursor with 596 amino acid residues, was obtained from D. variabilis. The deduced proteins of R. sanguineus are different in size by 6 amino acids because of alternative splicing at the 5' end. A gene tree deduced from phylogenetic analysis indicates that there are at least three lineages of AChE in arthropods.     

TNF-α和IFN-γ刺激的人脐静脉内皮细胞上IgG受体的表达

目的:检测IgG受体(FcγR)在炎症细胞因子刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)上的表达。方法:采用ELISA、免疫组化染色法、免疫荧光法和RT-PCR等方法,检测FcγRII及其表达。结果:未经细胞因子刺激的正常HU-VEC可表达低水平的FcγRIIa;经2×105U/L TNF-α和1×105U/L IFN-γ联合刺激3d后,FcγRIIa的表达提高16倍(P<0.01)。免疫荧光法检测显示,TNF-α和IFN-γ诱导的FcγRIIa表达于HUVEC表面。RT-PCR结果显示,FcγRIIamRNA表达量在TNF-α和IFN-γ刺激24h后有明显提高。结论:TNF-α和IFN-γ可通过调节FcγRIIa的转录和翻译,增强其在HUVEC上的表达。FcγRIIa的表达可能与血管炎条件下,免疫复合物在血管上的特异性定位有关。     

健脾补肾药对脾虚大鼠细胞因子水平的影响

目的 :观察健脾补肾方药对实验性脾虚证大鼠细胞因子的影响 ,探讨脾虚证与细胞因子的关系及脏腑相关的意义。方法 :选用SD雄性大鼠 ,随机分为 :正常对照组 ,脾虚模型组 ,健脾补肾方高、低剂量组 ,通过大黄复制脾虚证动物模型 ,并用健脾补肾方药进行防治。采用放射免疫分析观察各组动物血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )、白细胞介素 - 2 (IL - 2 )水平的变化。结果 :脾虚模型组大鼠血清TNF、IL - 6、IL - 2含量均比正常对照组显著降低 (p <0 0 1) ,而健脾补肾方药能明显升高TNF、IL - 6、IL - 2含量 ,使体重增加 ,脾脏和胸腺组织的重量增加。结论 :脾虚证的发生与细胞因子网络调节系统的失衡有关 ,而健脾补肾中药对实验性脾虚证有较好的防治作用 ,脾肾相关理论对实践有指导意义。     

心钠素免疫反应在豚鼠耳蜗中的整体分布

目的 :研究豚鼠耳蜗中心钠素 (ANP)免疫反应的分布状态 ,为探讨ANP在耳蜗中的作用提供形态学基础。方法 :采用免疫组织化学ABC法检测ANP在正常豚鼠耳蜗各组织中的分布特征。结果 :在耳蜗 1～ 4回的血管纹、螺旋缘、Corti’s器、螺旋神经节和中间阶外壁的螺旋韧带均发现有ANP反应 (ANP IR)阳性产物 ;而耳蜗骨壁、前庭膜、鼓阶外壁的螺旋韧带和鼓阶的下壁ANP IR为阴性。结论 :耳蜗中的ANP在内耳淋巴液的生成和声信号的传导以及耳蜗血流量的调节等方面可能担负着重要的作用     

郑氏植物蛋白对乳腺癌及其癌前病变患者PBL的刺激作用及其意义

目的 :研究郑氏植物蛋白 (Zheng’splant protein ,ZPP)对淋巴细胞的刺激作用及其在乳腺癌早期诊断与治疗中的应用价值。方法 :采用3 H TdR掺入法测定人外周血淋巴细胞(PBL) )的增殖反应。用流式细胞仪测定ZPP对T淋巴细胞CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 抗原表达的调节作用。结果 :ZPP对乳腺癌及其前期病变患者PBL有较强的刺激作用 (SI分别为3.0 0± 1.4 5和 2 .5 3± 0 .80 ) ,明显高于对正常对照组和乳管上皮轻度增生患者PBL的刺激指数 (SI分别为 1.0 6± 0 .17和1.18± 0 .19) (P <0 .0 1)。而PHA对各组PBL的增殖反应均有不同程度的刺激作用 ,但各组间无明显差异 (P >0 .0 5 ) .经ZPP刺激后的PBL中CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞均发生增殖反应 ,其中CD4 + 和CD8+ 者更为明显。结论 :ZPP可选择性刺激乳腺癌及其前期病变患者的PBL中T细胞发生增殖反应 ,此作用有可能用于乳腺癌的早期诊断与治疗中