同步脑电图-功能磁共振成像技术在癫痫灶定位中的应用研究

目的 探讨同步脑电图-功能磁共振成像技术(EEG-fMRI)在癫痫灶定位中的作用.方法 13例难治性癫痫患者接受同步EEG-fMRI检查,根据EEG出现癫痫波的时间点作为事件相关时间曲线对fMRI数据进行分析,了解发作间期癫痫样放电时血氧水平依赖信号变化所引起的脑部激活情况,并分析这些区域与神经电生理记录所确定的癫痫灶之间的吻合程度.结果 9例患者癫痫样放电在fMRI上的激活区与皮质电极确定的癫痫灶一致;4例患者癫痫样放电在fMRI上的激活区范围大于皮质电极确定的癫痫灶范围,但最强激活区的位置仍与皮质电极确定的癫痫灶一致.结论 同步EEG-fMRI技术将癫痫灶的功能定位与解剖定位相结合,是一种无创、精确度较高的癫痫灶定位方法 .     

非甾体类抗炎药物与细胞因子联合应用对多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的 观察非甾体类抗炎药物与细胞因子联合应用对多巴胺(DA)能神经元损伤的保护作用.方法 取新生SD大鼠进行中脑神经细胞的原代培养.采用脂多糖(LPS)制作体外帕金森病(PD)细胞的炎症模型,并分为空白对照组、LPS组、睫状神经营养因子(CNTF)组、塞来昔布(CB)组及CNTF+CB组.各组在相应的药物干预12 h及24 h后,倒置显微镜下观察细胞形态学变化,ELISA法测定中脑细胞培养液上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度及免疫细胞化学检测酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数.结果 (1)12 h时LPS组细胞体积略有肿胀,折光性增强,突起变细、缩短,胶质细胞活化;24 h时细胞数目明显减少,胞体皱缩,突起明显变细、缩短,部分细胞甚至崩解.而空白对照组、CB组、CNTF组、CNTF+CB组细胞形态变化不明显.(2)12 h及24 h时LPS组、CB组、CNTF组、CNTF+CB组与空白对照组相比,中脑细胞培养液上清TNF-α浓度显著升高(均P＜0.01);其中LPS组最高,其次为CB组、CNTF组、CNTF+CB组.24 h时各组TNF-α浓度均显著高于12 h时(均P＜0.01).(3)与空白对照组相比,12 h,24 h时LPS组、CB组、CNTF组、CNTF+CB组TH阳性细胞数显著减少(均P＜0.01);其中LPS组TH阳性细胞数最少,其次为CNTF组、CB组、CNTF+CB组.结论 CB和CNTF可减轻LPS对体外培养DA能神经元的炎性损伤作用,二者联合应用抗炎及神经保护作用更强.     

凋亡相关基因caspase-3和NF-κB在阿尔茨海默病Tg2576转基因小鼠海马内的表达(英文)

目的探讨阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)的发生、发展与神经细胞凋亡之间的规律,尤其是NF-κB在神经细胞凋亡中的调节作用。方法以0-180日龄的Tg2576转基因小鼠作为研究对象,正常野生型小鼠为对照,应用caspase-3和NF-κB免疫组织化学、免疫荧光双标、Nissl染色、RT-PCR等方法进行研究。结果随着小鼠日龄的增长,对照组与模型组小鼠的海马CA3区锥体细胞中,凋亡细胞密度和NF-κB阳性细胞密度逐渐下降;出生14d以后,模型组凋亡细胞密度和NF-κB阳性细胞密度均高于对照组(P<0.05),且小鼠海马caspase-3mRNA表达水平与caspase-3免疫组织化学结果基本吻合。模型组NF-κB和caspase-3的表达水平均高于对照组。结论凋亡相关基因NF-κB和caspase-3在AD的发病机制中可能起重要作用,NF-κB与神经细胞凋亡有正相关关系。此外,caspase-3与NF-κB共同表达于同一细胞中,提示NF-κB的激活可能参与神经细胞凋亡的调节。     

非洛地平缓释片对老年原发性高血压患者大动脉顺应性的影响

目的观察非洛地平缓释片治疗轻、中度原发性高血压患者的降压疗效及其对大动脉顺应性的影响。方法选择轻、中度原发性高血压患者102例,根据年龄分为老年组(≥65岁,78例)和非老年组(65岁,24例)。老年组患者又根据是否合并并发症分为并发症组(50例)和无并发症组(28例),其中并发症组合并糖尿病22例,合并脑梗死28例。比较各组患者应用非洛地平缓释片治疗12周前后血压和脉搏波速度(PWV)的变化。结果所有患者在应用非洛地平缓释片治疗12周后,其坐位血压及PWV均明显降低,差异有统计学意义。老年组PWV降低值明显高于非老年组,差异有统计学意义(P0.05);并发症组与无并发症组的PWV降低值差异无统计学意义,合并糖尿病与合并脑梗死的患者PWV降低值差异无统计学意义。结论轻、中度原发性高血压患者在应用非洛地平缓释片治疗12周后,血压降低的同时,其大动脉顺应性亦改善,老年患者获益更多,且在老年患者中有并发症及无并发症的患者获益相同,合并糖尿病与合并脑梗死的患者获益相同。     

nephrin、血管内皮生长因子及其受体表达与先兆子痫大鼠蛋白尿的关系

目的 研究nephrin、血管内皮生长因子（VEGF）及其受体（VEGFR）在先兆子痫大鼠肾组织的表达与蛋白尿的关系。 方法 采用一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）制备大鼠先兆子痫模型（n=8）,分别与正常雌性组（n=6）、正常妊娠组（n=8）、未孕L-NAME对照组（n=6）大鼠比较动脉收缩压（SBP）、尿蛋白量（24 h）。各组大鼠肾组织分别行光镜和电镜检查。Western印迹法、实时定量PCR检测nephrin在各组大鼠肾脏局部的表达;免疫荧光法检测各组大鼠肾小球内wilms肿瘤蛋白WT1的表达。Western印迹法检测VEGF及VEGFR（Flt-1、Flk-1）在各组大鼠肾脏局部的表达。 结果 先兆子痫模型组大鼠nephrin蛋白的表达（0.0726±0.0074）显著低于正常雌性组（0.3795±0.0509）、正常妊娠组（0.2361±0.0437）及未孕L-NAME对照组大鼠（0.7265±0.0503）（均P < 0.01）;而nephrin mRNA在各组大鼠间差异无统计学意义。各组大鼠足细胞数目差异无统计学意义。先兆子痫大鼠组VEGF的表达（1.5429±0.0898）显著高于正常雌性组（1.1870±0.1160）、正常妊娠组（1.3741±0.1165）、未孕L-NAME对照组大鼠（1.0155±0.0742）（均P < 0.01）;先兆子痫组大鼠VEGFR（Flt-1、Flk-1）的表达均显著高于其他各对照组大鼠（均P < 0.05）。 结论 先兆子痫大鼠中,nephrin蛋白水平表达明显降低,肾脏局部VEGF-VEGFR表达显著增强,可能参与了先兆子痫蛋白尿的生成,其具体机制有待进一步研究。     

附睾蛋白酶抑制剂对前列腺特异性抗原活性的抑制作用

目的 观察附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是否抑制前列腺特异性抗原(PSA)酶活性.方法 利用分子克隆技术体外构建、表达、纯化重组Eppin和PSA.利用PSA水解变色底物S-2586的颜色变化,于分光光度计下测定其吸光度值,代表PSA酶反应速度,反应体系是在缓冲液0.1 mol/LTris-HCl,pH8.3,1.0 mol/L NaCl中进行,观察不同浓度Eppin的加入对PSA酶反应速度的影响.结果通过体外重组技术获得较高纯度和生理活性的Eppin和PSA,通过PSA水解变色底物S-2586的检测,重组PSA具有酶活性,0.3 μmol/L PSA与底物S-2586反应的饱和曲线分析显示Km(反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度)值是0.5 μmol,底物饱和浓度0.2 mmol/L,分别加入4中不同浓度的重组Eppin 0、0.56、1.16、2.32 μmol/L,随着Eppin浓度的增加,PSA水解其变色底物S-2586速度明显减慢,PSA活性越来越受到抑制.结论 附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)是前列腺特异性抗原(PSA)一种新的特异性抑制剂.

Abstract：

Objective To investigate the inhibitory effects of the epididymal protease inhibitor (Eppin) on the activity of prostate specific antigen (PSA).Methods Recombinant Eppin and recombinant PSA were produced by molecular cloning technique in vitro.The enzymatical analysis of Eppin inhibiting PSA was done in the reaction buffer 0.1 mol/L Tris-HC1,pH 8.3,1.0 mol/L NaCl.The hydrolysis of velocity of PSA to the chromogenic substrate S-2586 was detected by spectrometer.Results Recombinant Eppin and PSA with high purity were produced by molecular cloning technique.The recombinant PSA had the enzymatical activity by hydrolyzing its substrate S-2586.0.3μmol/L PSA and the substate S-2586 reaction to the saturation curve analysis showed that Km( response rate of half the maximum reaction rate when the substrate concentration) value was 0.5μmol,and substrate saturated concentration was 0.2 mmol/L.With the increases of Eppin (0,0.56,1.16,2.32μmol/L),the hydrolysis velocity of PSA to S-2586 was slowed down.Conclusion Eppin,as a new inhibitor,specifically inhibits the activity of PSA.     

慢性乙型肝炎患者肝组织病理学分析

目的探讨慢性乙型肝炎患者肝组织病理学与临床血生化指标的相关性。方法对252例慢性乙型肝炎患者肝穿活组织病理学检查结果与血清HBVDNA、肝功能等血生化指标进行统计学分析。结果肝组织炎症活动度与纤维化分期无明显的相关性(rs=-0.132,P=0.579);肝组织G4期患者血清ALT和PT水平明显高于G1期患者(PO.05);血清HBVDNA水平与肝组织炎性活动度和纤维化程度无明显的相关性(P0.01)。结论肝组织活检在肝脏病情评估中的作用是其它检查所不能代替的。     

试论制药企业新产品立项

新产品开发是企业发展的战略决策,同时也是决定自身发展最重要的环节.阐述了制药企业在选择适合自身发展的产品进行开发时,应具备精良的信息检索工具以及专业的信息人员,然后利用这些条件并结合实际情况慎重考虑国家政策、知识产权、药物临床评价、产品技术、终端市场格局和相关企业竞争策略、产品销售预测及竞争力分析等各个方面的问题,从而...     

HPLC同时测定安渴胶囊中马钱苷和葛根素的含量

目的:建立同时测定安渴胶囊中马钱苷和葛根素含量的高效液相色谱法。方法:色谱柱为Aglient Eclipse XDB-C18柱,流动相乙腈-水(12∶88),检测波长240,250 mm,流速1.0 mL.min-1。结果:马钱苷进样量在0.31～2.175μg与峰面积积分值呈良好的线性关系,葛根素进样量在0.164～1.148μg与峰面积积分值呈良好的线性关系。马钱苷平均回收率为100.39%,RSD 0.72%(n=6);葛根素平均回收率为97.99%,RSD 1.98%(n=6)。结论:高效液相色谱法简便可行、专属性强、重复性好,可较好地控制安渴胶囊的质量。     

桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β介导的bEnd.3 细胞PGE2代谢通路的影响

目的:研究桂枝汤及其生物转化模拟产物对白细胞介素-1β(IL-1β)介导的小鼠脑微血管内皮细胞株(bEnd.3)细胞前列腺素E2(PGE2)代谢通路的影响。方法:制备了桂枝汤及桂枝汤生物转化模拟产物的含药血清(分别设五个浓度组),采用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印记法(Western blot),观察桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β刺激的bEnd.3细胞磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶p38(p-p38MAPK)、胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)、分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、环氧合酶2(COX-2)、前列腺素E合成酶(PGES)、15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)以及前列腺素E2(PGE2)分泌及表达的影响。结果:IL-1β作用于细胞10 h后,各项指标均明显上调,与对照组比较,P<0.01。除质量终浓度为2.5%的桂枝汤含药血清对PGES,sPLA2;终浓度为1%的模拟药对PGES;终浓度为2.5%的含药血清对PGES,sPLA2,cPLA2作用不显著外,其他各浓度组与模型组比较均出现显著性差异。结论:桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β刺激bEnd.3细胞合成PGE2的代谢酶系统有不同程度的抑制作用,从而降低了前炎症介质和中枢发热介质PGE2的释放和分泌。结果提示,桂枝汤及其生物转化模拟产物对脑微血管内皮细胞分泌PGE2具有相似的药效,为模拟产物的应用和开发提供了实验支持。