二代测序技术在血管性血友病诊断中的应用

血管性血友病(von Willebrand disease,VWD)是最常见的遗传出血性疾病,临床表现异质性大,出血严重时可危及患者生命。快速、精准的诊断有助于疾病的治疗。目前,实验室检测仍是VWD诊断的主要手段,但突变基因的低外显率、实验室的高变异性和大量影响血管性血友病因子(von Willebrand factor,VWF)水平测定的干扰因素使诊断变得复杂,甚至误诊。近年来,二代测序技术(next-generation sequencing, NGS)已应用于临床,并且具有高通量、高灵敏度、价格低廉等优点,可准确发现VWF基因缺陷,现已成为诊断VWD的有效手段之一。本文就NGS在VWD诊断中的应用进行综述,旨在为临床诊断提供依据。     

临床路径在血液科临床教学中的应用评价

目的：探讨基于临床路径的教学方法在血液科临床带教中的实施效果．方法将在血液科实习的本科生按照来科实习顺序非随机分组,实验组在教学过程中加入特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocy-topenic purpura,ITP）临床路径作为教学工具,对照组以内科学第七版本科教材为基础进行教学,每组学生实习2周后出科时进行口头考试,并设计调查问卷进行现场调查．结果本研究中接受ITP临床路径培训的实验组共纳入32名实习医生,以内科学第七版教材为基础的对照组共纳入38名实习医生．2组间实习同学对ITP“病史询问要点、诊断标准和鉴别诊断的把握、实验室检查项目的选择”差异有统计学意义（P＜0.01）,实验组得分优于对照组;2组间关于“首选治疗方案问题”方面差异无统计学意义（P＞0.05）;但是对于“首选激素治疗2周内血小板计数仍低于20×109/L的患者下一步治疗”方面,对照组得分优于实验组（P＝0.0003）．调查问卷的结果显示临床路径组实习学生对于ITP临床教学方法的接纳程度为93.8%,开放式问题调查显示临床路径教学更为直观简洁,有利于实现标准化教学．结论将临床路径作为血液科实习医生的教学工具之一有利于学生更为清楚地理解该病种的诊治,具有可操作性,但需要结合教材进行深入讲解．     

ANGPT1、ANGPT2、VEGF在急性髓系白血病小鼠模型中的表达研究

目的：通过构建急性髓系白血病（AML）小鼠模型,从mRNA水平研究促血管生成素（ANGPT ）1、ANGPT2、血管内皮生长因子（VEGF）的表达水平与急性髓系白血病的关系。方法 NOD／SCID小鼠腹腔接种HL‐60细胞,建立AML小鼠模型,称模型组,未经处理的NOD／SCID小鼠作对照组。用病理组织学及流式细胞学方法鉴定小鼠模型是否成功。实时荧光定量PCR （RQ‐PCR）技术检测ANGPT2、ANGPT1及VEGF mRNA在AML小鼠肿瘤组织中的表达水平。应用Spearman相关分析法分析ANGPT2 mRNA表达水平与小鼠生存期的关系。结果成功构建 AML 小鼠模型。RQ‐PCR结果显示模型组肿瘤组织的ANGPT2、VEGF mRNA的表达水平较正常对照组显著增高,差异有统计学意义（P＜0．05）,而 ANGPT1 mRNA的表达水平两组差异无统计学意义（P＞0．05）。ANGPT2 mRNA表达水平与AML小鼠生存期呈负相关。结论 ANGPT2 mRNA在AML小鼠中高表达且与AML小鼠生存期呈负相关,ANGPT2表达与AML病情进展及预后相关。     

脐带组织源间充质干细胞调控ITP患者脾细胞释放抗血小板抗体的体外研究

为了探讨脐带组织来源的间充质干细胞（UC—MSC）免疫治疗特发性血小板减少性紫癜（ITP）的临床应用可能性，体外建立UC—MSC与ITP脾切除患者的脾脏单个核细胞共培养体系，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测共培养上清液中IgG型抗血小板抗体（PAIgG）含量的变化。同时，用Brdu法研究UC—MSC对其中部分ITP患者血小板反应性T辅助淋巴细胞增殖的调节作用。结果表明，UC—MSC在体外试验中可刺激ITP患者脾细胞自发性释放PAIgG；UC—MSC在低剂量时（1：100）抑制血小板诱导释放PAIgG；在高剂量（1：10）转为刺激作用。另外，UC—MSC还能抑制血小板反应性T辅助细胞的增殖，并呈一定的量效关系。结论：UC—MSC可体外影响ITP患者释放PAIgG．具体调控机制及临床应用价值有待深入研究。     

应用SCID和NOD/SCID小鼠构建急性髓系白血病模型成瘤率的比较

目的:比较应用SCID和NOD/SCID小鼠构建急性髓系白血病模型成瘤率的不同。方法:分别给SCID和NOD/SCID小鼠腹腔注射HL-60细胞,观察小鼠的一般情况、应用流式细胞术检测骨髓细胞CD33阳性率,病理学检查鉴定动物模型。结果:应用SCID小鼠构建急性髓系白血病模型成瘤率为30%,而应用NOD/SCID小鼠构建急性髓细胞白血病模型成瘤率为100%。结论:接种HL-60的NOD/SCID小鼠相对于SCID小鼠成瘤率高,小鼠发病率稳定,更适宜应用于白血病机制研究。     

髓系来源抑制细胞在多发性骨髓瘤患者中的外周血表达与临床效果观察

目的探讨髓系来源抑制细胞(MDSCs)在多发性骨髓瘤(MM)患者中的外周血表达与临床效果。方法选取2015年10月至2017年6月丽水市人民医院血液科收治的40例初治型MM患者为MM组,男27例,女13例,年龄(58±8)岁,年龄范围为48~76岁。另外选取40例健康体检者作为健康对照组,其中男25例,女15例,年龄(56±11)岁,年龄范围为45~74岁。MM组患者入院后均采用一线治疗方案,通过流式细胞术检测外周血MDSCs、肿瘤相关巨噬细胞(TAM)及调节性T细胞(Tregs)表达,采用ELISA法检测患者外周血血清中的白细胞介素-6(IL-6)水平。结果治疗前MM组患者MDSCs[(8.40±2.15)%]、TAM[(6.33±1.34)%]、Tregs[(9.25±3.68)%]、IL-6[(13.40±0.80)pg/ml]均高于健康体检组[(0.47±0.26)%、(1.80±0.89)%、(2.42±3.31)%、(2.45±0.24)pg/ml],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,MM组患者MDSCs[(0.94±0.41)%]、TAM[(2.64±1.12)%]、Tregs[(1.92±1.51)%]、IL-6[(5.62±0.56)pg/ml]显著低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MDSCs在MM不同阶段呈规律性表达,与TAM、Tregs表达趋势一致,提示在MM发生、发展过程中MDSCs可能参与了骨髓瘤细胞的免疫耐受及肿瘤逃逸机制。     

Trends in hepatitis B and hepatitis C seroprevalence among Nepalese blood donors

In Nepal, hepatitis B and hepatitis C are considerable health problems. This study aimed to assess the trends of hepatitis B virus (HBV) and hepatitis C virus (HCV) seroprevalence in blood donors over the last 6 years nationwide and in the urbanized setting of Kathmandu Valley. This was a retrospective study conducted among Nepalese blood donors through the years 2001/2002-2006/2007. Serum samples were tested for hepatitis B surface antigen and anti-HCV antibodies using third generation ELISA tests. The donors' information was collected via the donor record register through their respective Blood Transfusion Services. The software, Winpepi ver 3.8 was used for statistical analysis. The overall seroprevalence rates of HBV and HCV in a nationwide analysis were observed to be 0.82 and 0.47%, respectively, and at Central Blood Transfusion Service (CBTS), Kathmandu, the rates were 0.92 and 0.71%, respectively. The seroprevalence of HBV was significantly higher than the seroprevalence of HCV, both nationwide and at CBTS (P < 0.05). An overall significantly decreasing trend was observed in HBV and HCV seroprevalence both nationwide and at CBTS, Kathmandu, over the last 6 years (P < 0.05). Though the overall trend was significantly decreasing, the test for departure from a linear trend also showed a statistically significant result (P < 0.05).     

特发性血小板减少性紫癜患者血清可溶性B淋巴细胞刺激因子的表达

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血清可溶性B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的水平,以明确BLyS是否在ITP患者中存在异常的BLyS表达。方法共有41例ITP患者进入本研究,正常对照由22例年龄性别匹配的健康人组成。血清可溶性BLyS水平以ELISA方法检测。结果未接受治疗的ITP患者BLyS水平(中位数1 430 pg/mL,534~5787pg/mL)高于正常对照(中位数1120 pg/mL,640~2 376 pg/mL,P=0.006)和ITP接受治疗组(中位数662 pg/mL,267~1265 pg/mL,P=0.000)。而ITP治疗组血清BLyS水平低于正常对照(P=0.001)。血小板计数和BLyS水平之间存在弱的相关关系(Pearson相关系数-0.242,P=0.064)。但BLyS水平与PAIg及免疫球蛋白水平无关。且急慢性ITP患者的BLyS水平之间没有差别(P=0.841)。结论BLyS可能参与了ITP自身免疫的发病过程。但是将血清BLyS水平作为ITP疾病活性标志物尚须谨慎。     

急性淋巴细胞白血病误诊为实体瘤1例

患者,男,46岁,因发现右下颌肿块1月余,于2003年3月9日到我院口腔外科就诊。患者因右下颌磨牙疼痛,曾于2003年2月2日在当地医院拔除该牙,不久在拔牙部位长出一肿物,有疼痛感伴下颌牙松动及下唇麻木,至我院口腔外科门诊就诊。口腔专科检查：8╁缺失,牙槽窝内可见突出肿物,7-6╁Ⅱ度松动,5╁Ⅰ度松动,初步诊断为：“右下颌磨牙     

Proptosis in a young child

We encountered an extremely unusual presentation of proptosis in a 7-yr-old boy due to psammomatoid juvenile ossifying fibroma of frontoethmoidal region. The tumor also led to development of mucocele in the frontal sinus not yet fully developed as on opposite side.