白芍总苷对柯萨奇B3病毒感染大鼠原代心肌细胞的血清药理学干预

目的探讨白芍总苷（TGP）对柯萨奇B3病毒（CVB3）感染大鼠原代心肌细胞有无保护作用。方法取SD乳鼠心室肌制备大鼠原代心肌细胞,培养72h后,用不同剂量的TGP含药血清干预100 TCID50 CVB3感染心肌细胞,对比分析干扰素组、双黄连组、正常对照组。观察细胞病变,24h后测定细胞上清液中的cTnⅠ、CK、LDH以及用MTT法检测细胞存活率。结果TGP高剂量组可减轻心肌细胞病变,减少cTnⅠ、CK、LDH的释放。结论TGP对CVB3感染大鼠原代心肌细胞有保护作用。     

呼吸道合胞病毒建立哮喘动物模型中气道胆碱能神经的分布

目的:用呼吸道合胞病毒(RSV)诱发豚鼠哮喘模型,通过检测气道反应性和气道平滑肌层胆碱能神经分布变化,研究神经机制在哮喘发病中的作用.方法:34只豚鼠随机分为4组:Hep-2滴鼻 生理盐水(NS)雾化(Hep-2/NS)组,RSV滴鼻 NS雾化(RSV/NS)组,Hep-2滴鼻 鸡卵白蛋白(OVA)雾化(Hep-2/OVA)组和RSV滴鼻 OVA雾化(RSV/OVA)组,其中Hep-2/NS组和RSV/NS组动物各9只,Hep-2/OVA和RSV/OVA组动物各8只,以Hep-2/NS组为对照组.电刺激迷走神经法检测气道反应性,计数气管粘膜和粘膜下嗜酸性粒细胞(Eos),行胆碱能神经纤维免疫组化并计数阳性纤维数目.结果:气道内压力(IP):RSV/NS组与Hep-2/NS组之间差异无统计学意义(P＞0.05),Hep-2/OVA组IP明显高于Hep-2/NS组和RSV/NS组(P均＜0.05),RSV/OVA组IP明显高于Hep-2/OVA组(P＜0.01);Eos:Hep-2/NS组与RSV/NS组之间差异无统计学意义(P＞0.05),Hep-2/OVA组高于Hep-2/NS组和RSV/NS组(P均＜0.05),RSV/OVA组明显高于Hep-2/OVA组(P＜0.01);平滑肌层有胆碱能阳性纤维分布:RSV/NS组与Hep-2/NS组之间差异无统计学意义(P＞0.05),Hep-2/OVA组阳性纤维数目明显高于Hep-2/NS组和RSV/NS组(P＜0.01),但RSV/OVA组与Hep-2/OVA组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:①RSV感染可促进OVA引起的豚鼠AHR发生;②OVA可导致气道平滑肌层胆碱能阳性纤维分布增多,但RSV对其增多无明显影响.     

云南习用药材地板藤的质量标准研究

系统研究了云南习用药材地板藤的质量标准,明确其基源植物为桑科植物地石榴Ficus tikouaBur.,并对药材名称、生药性状、显微及理化鉴别、检查、浸出物等质量标准项目进行了全面的对比研究和归纳,研究结果已经为云南省中药材标准采用。     

小规模限制性在线课程在医学本科生淋巴瘤临床教学中的应用研究

目的　探究设计基于小规模限制性在线课程（small private online course,SPOC）的整合教学应用于医学本科生淋巴瘤临床教学的可行性和实践效果。方法　将60名在血液内科进行临床学习的医学生,按入科前基础医学理论考试成绩,随机分入SPOC教学组（n=30）和以问题为基础的学习（problem-based learning,PBL）组（n=30）,进行淋巴瘤相关知识点的临床教学和指导。教学活动结束后,采用匿名问卷调查师生对SPOC和PBL教学的主观体验及评价;并通过两组学生出科考试成绩的比较,分析不同方法下教学质量的差异。采用SPSS 19.0对两组学生考试成绩行t检验。结果　调查结果显示,与PBL教学组相比,SPOC教学组师生的教学反馈评价更高、教学体验更好,SPOC得到师生的普遍认可。SPOC教学组学生的出科考试三项成绩均优于PBL教学组,且差异有统计学意义：出科理论成绩[（84.03±7.66） vs.（77.60±8.22）,P=0.005],实践技能成绩[（87.83±8.17） vs. （81.97±6.13）,P=0.001],病例分析成绩[（88.17±6.53） vs. （80.10±6.91）,P=0.000]。结论　基于SPOC的整合教学适宜医学本科生淋巴瘤临床教学,且有助于提升学生的学习兴趣、学习能力、基础理论水平和临床实践能力,为专科疾病临床教学提供了新思路。     

Identification and Characterization of Peptide Mimics of Blood Group A Antigen

In order to investigate peptide mimics of carbohydrate blood group A antigen, a phage display 12-mer peptide library was screened with a monoclonal antibody against blood group A antigen, NaM87-1F6. The antibody-binding properties of the selected phage peptides were evaluated by phage ELISA and phage capture assay. The peptides were co-expressed as glutathione S-transferase （GST） fusion proteins. RBC agglutination inhibition assay was performed to assess the natural blood group A antigen-mimicking ability of the fusion proteins. The results showed that seven phage clones selected bound to NaM87-1F6 specifically, among which, 6 clones bore the same peptide sequence, EYWYCGMNRTGC and another harbored a different one QIWYERTLPFTF. The two peptides were successfully expressed at the N terminal of GST protein. Both of the fusion proteins inhibited the RBC agglutination mediated by anti-A serum in a concentration-dependent manner. These results suggested that the fusion proteins based on the selected peptides could mimic the blood group A antigen and might be used as anti-A antibody-adsorbing materials when immunoabsorption was applied in ABO incompatible transplantation.     

腺病毒介导BCSC-1基因实验性治疗鼻咽癌

目的探讨抑癌基因BCSC-1对肿瘤的治疗作用。方法制备重组腺病毒Ad5-BCSC-1。用CellTiter 96 A-queous细胞增殖单一溶液检测试剂盒检测细胞增殖。肿瘤体内注射Ad5-BCSC-1,以注射Ad5-egfp或PBS作为对照,1周后重复注射,再2周后处死小鼠,称瘤重。结果Ad5-BCSC-1感染的CNE-2L2细胞的生长明显减慢,细胞在培养中聚集成大细胞团块。注射PBS、Ad5-egfp和Ad5-BCSC-1的小鼠CNE-2L2肿瘤的平均瘤重分别为(2·28±0·73)、(2·07±0·40)和(0·58±0·32)g。Ad5-BCSC-1组显著低于PBS和Ad5-egfp组(P<0·05)。结论瘤体内注射Ad5-BCSC-1能抑制CNE-2L2肿瘤的生长,提示BCSC-1基因治疗对BCSC-1基因缺失或表达低下的肿瘤可能有治疗作用。     

p27~(Kip1)诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨过表达的p27Kip1对肝癌细胞的抑制作用。方法:利用脂质体介导法将真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His(+)C-p27Kip1基因导入HHCC细胞中,用Westernblot检测p27Kip1是否导入到肝癌细胞中;用流式细胞仪检测过表达的p27Kip1对肝癌细胞HHCC的抑制作用;电子显微镜技术探讨过表达的p27Kip1抑制肝癌细胞生长的可能机制。结果:Westernblot检测表明,转染p27Kip1的HHCC细胞大部分有p27Kip1蛋白的表达;而转染空载体或未转染的HHCC细胞,均未见p27Kip1蛋白表达。经连续3次克隆化后,转染pcDNA3.1/Myc-His(+)C-p27Kip1的HHCC细胞100%表达p27Kip1蛋白。过表达的p27Kip1对HHCC细胞有明显的抑制作用,其抑制率为49.09%～56%;过表达的p27Kip1可以封闭G1期的进程和诱导肝癌细胞发生凋亡,其凋亡百分比为12.3%。结论:过表达的p27Kip1可以通过诱导肝癌细胞凋亡抑制肝癌细胞生长。     

鼻咽癌调强放射治疗与常规放射治疗照射技术的比较

目的:分析、比较鼻咽癌调强放射治疗与常规放射治疗照射技术上的差异。方法:采用尺子测量和验证片拍摄,对常规放射治疗组与调强放射治疗组的患者,测量其激光定位线的吻合度及匹配、分析验证片的误差率。结果:①尺子测量:激光定位线调强组吻合率达100.0%,常规组经调整达98.0%;②验证片拍摄:调强放射治疗组总体误差明显小于常规放射治疗组。结论:调强放射治疗摆位的精确度比常规放射治疗显著提高。在放射治疗过程中,系统误差是不可忽视的问题。     

缺血性脑血管病患者脑动脉狭窄的分布特征及其危险因素分析

目的 探讨缺血性脑血管病患者脑动脉粥样硬化性狭窄闭塞病变的分布特点;分析并比较颅内、外动脉粥样硬化性狭窄的危险因素.方法 对583例连续行全脑血管造影检查的缺血性脑血管病患者的临床和血管造影资料进行分析.结果 56例血管造影未见异常.527例存在脑动脉狭窄或闭塞病变,其中24.3%(128例)仅有颅外动脉病变,36.8%(194例)仅有颅内动脉病变,38.9%(205例)颅内外病变并存,颅内动脉病变的发生率(75.6%,399例)高于颅外动脉(63.2%,333例).脑梗死患者和颈动脉系统短暂脑缺血发作患者,均是颅内病变多于颅外病变,但椎基底系统短暂脑缺血发作则以颅外病变为主(P<0.01).青年(≤40岁)患者大部分为单纯颅内动脉病变(75.5%),主要累及大脑中动脉;而中年(41～60岁)及老年(≥61岁)患者以颅内外病变并存的比例最高(39.4%和48.0%,P<0.001),病变最好发于颈内动脉起始部.高血压、糖尿病、血脂异常是颅内动脉病变的独立危险因素,而年龄、冠心病、糖尿病、血脂异常是颅外病变的独立危险因素.颅外病变者的年龄和冠心病患病率显著高于颅内病变者.结论 总体上颅内动脉粥样硬化性狭窄闭塞病变的发生率高于颅外动脉,但颅外病变并不少见,且常表现为颅内外病变并存.不同亚组的患者动脉病变的分布不同.颅外病变者的冠心病患病率、年龄高于颅内病变者.     

甲基化特异性PCR技术的质量控制及改进

目的:改进甲基化特异性PCR(MSP)技术并控制实验质量.方法:采用改进的MSP法检测正常胃粘膜及胃癌组织中eaveolin-1基因的甲基化状况.运用饱和酚-氯仿抽提法提取DNA,其中石蜡包埋组织连续切片厚度为8μm;采用热启动PCR:反应体系为25μL、变性温度设定为95.5℃、循环数设定为30.结果:新鲜组织较石蜡包埋组织更适于MSP实验,但福尔马林固定石蜡包埋组织同样可用于MSP实验,并且8μm厚的石蜡包埋组织能获得较完整的DNA链.热启动PCR效果良好:25μL体系敏感性优于50μL体系,95.5℃可以使含CpG岛的DNA链解链更完全,30个循环足以扩增小于150 bp的目的片段.结论:采用改进的MSP技术,可获得较好的DNA模板,提高实验的灵敏度和成功率,更适于甲基化的研究.