两法提取皮质骨Ⅰ型胶原的比较研究

[目的]通过对两种方法提取的骨胶原产量及特性的比较,推荐一种较为理想的提取皮质骨I型胶原的方法。[方法]以猪皮质骨为原料,去除软组织后劈成小骨块,经酒精梯度脱水、无水乙醚脱脂、盐酸脱钙、甲醇:氯仿(1:1,v/v)再脱脂处理后,骨块软化。然后将软化的骨块在高速粉碎机上粉碎成脱钙骨基质粉。分别采用传统的碱溶法和自建的增强酶解法对脱钙骨基质粉处理,经溶解、离心、透析、冻干等操作提取皮质骨胶原。最后对增强酶解法所得产物进行鉴定,并对两种提取方法的效率及得到的产物的外观、黏度、凝胶固化性进行比较。[结果]增强酶解法所得胶原的氨基酸组成、蛋白电泳、相对分子量大小、最大光吸收波长均符合I型胶原特征;和碱溶法比较,提取率由(57.8±4.96)%提高到(94.04±0.55)%;其相同浓度(0.03%,w/v)醋酸溶液黏度测定,增强酶解法为3.71,碱提法为2.81;在37.0℃,pH值7.35～7.45条件下行凝胶固化性检测,增强酶解法所提胶原凝胶液约10min可固化形成凝胶块,而碱提法所提胶原的溶液仍为黏性液体。[结论]增强酶解法提取的骨胶原是I型胶原;相对于碱提法,该法提取效率高,所得胶原纯度高、黏性好、固化性好,是一种较好的从猪皮质骨中制备I型胶原的方法。     

胫骨平台骨折合并内侧副韧带损伤的诊治体会

[目的]探讨胫骨平台骨折伴膝内侧副韧带损伤的诊断及治疗方法。[方法]回顾性分析本院1996年1月~2005年12月期间收治的52例胫骨平台骨折合并重度内侧副韧带损伤病例,并对有随访的49例(保守治疗21例,手术治疗28例)进行分析。[结果]随访10个月~9年(平均1.7年),按照Schatzker分型:Ⅱ型39例,Ⅲ型6例,Ⅵ型4例。骨折均切开复位内固定,对韧带损伤的治疗分为2组,保守治疗组21例,膝关节功能:优11例,良9例,差1例。手术治疗组28例,Ⅰ期修复19例:优17例,良2例。Ⅱ期修复9例:优5例,良3例,差1例。[结论]胫骨平台骨折合并内侧副韧带损伤Ⅰ期修复效果理想。     

医用硫酸钙在家兔腰椎融合模型中的成骨能力

[目的]通过与自体髂骨进行比较,评价医用硫酸钙单独应用的成骨能力,并探讨其可能的成骨机理。[方法]建立家兔腰椎后外侧融合模型,以自身作为对照,双侧横突间植骨,左侧植入硫酸钙颗粒,右侧植入自体髂骨。于术后3、6、12周行X线、CT及组织学检查。[结果]术后3周,硫酸钙尚可见残留颗粒,自体骨完全降解;植骨区域内均可见到大量的破骨细胞,并有血管纤维组织长入。术后6周,硫酸钙完全降解,影像学检查两者之间没有明显的差异,表现为局部骨密度增高,新骨成形;组织学检查两侧植骨区内均为大量的透明软骨形成,自体髂骨植骨区内可见散在的骨小梁结构。术后12周,组织学及影像学上二者没有任何的差别,两侧形成的骨组织与家兔的椎体骨组织结构相同。[结论]医用硫酸钙作为骨移植替代材料,除了具有良好的骨传导性外,硫酸钙可能还具有骨诱导性,其成骨能力与自体髂骨相当,医用硫酸钙单独应用可以取得良好的融合效果。     

下颌角肥大女性颅面结构的三维测量

目的：通过对下颌角肥大女性人群颅面结构进行三维测量，发现下颌角肥大人群与正常人群颅面结构的差异。方法：对102例在中国医学科学院整形外科医院颅颌面中心行下颌角截骨整形的患者做三维CT检查，并对其颅面结构进行三维立体测量。结果：通过测量取得下颌角肥大女性群体颅面结构的三维数据，通过与文献中正常人群测量数据比较发现下颌角肥大与正常人群颅面结构的差异。结论：下颌角肥大女性群体颅面三维结构与正常女性人群存在明显差异。     

11个Fabry病家系的α-半乳糖苷酶A活性及GLA基因检测

目的 建立Fabry病α-半乳糖苷酶A（α-gal A）酶活性及基因检测体系,并对基因型临床表型进行分析。方法 检测11个Fabry病家系先证者及家系成员外周血粒细胞α-gal A活性及GLA基因。酶活性检测采用底物荧光法,基因检测采用PCR直接测序法,并进行临床评估。结果 在11个Fabry病家系中检出9种GAL基因突变,包括5个错义突变（R301Q、I91T、G132R、F273L、D165Y）,2个无义突变（W236X、R342X）,1个单碱基缺失（1082delG）和1个大片段缺失（44 bp nt．1077）,其中4种为新突变（D165Y、F273L、1082delG、44 bp nt．1077）。11个家系中通过基因及酶活性检测,确诊男性半合子13例,女性杂合子12例。男性半合子α-gal A酶活性显著下降,女性杂合子α-gal A酶活性部分下降,1/4女性杂合子的α-gal A酶活性处于正常范围内。结论 确诊了11个Fabry病家系的GLA基因突变类型,并筛出所有家系中先证者以外的患者14例。外周血粒细胞α-gal A酶活性和GAL基因检测是筛查和诊断Fabry病的有效手段。     

咪唑立宾对大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用

目的探讨咪唑立宾（MZ）对肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其对细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物p27^kip1表达的影响。方法大鼠系膜细胞同步后分为无血清组、20％FCS刺激组、20％FCS＋MZ组。四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞数。BrdU标记法检测S期细胞。流式细胞仪检测细胞周期。Western印迹检测p27^kip1蛋白的表达。结果MZ可抑制20％FCS刺激所致的系膜细胞增殖，呈剂量依赖性。与20％FCS刺激组比较，20％FCS＋MZ组S期细胞的百分比显著降低[（10．28±1．26）％比（21．04±5．38）％，P〈0．05]。MZ可改善由20％FCS刺激诱导的GO／G1期细胞减少[（83．53±2．50）％比（71．15±1．25）％]和S期细胞增加[（12．22±1．22）％比（23．19±0．38）％，P〈0．051。20％FCS刺激后p27^kip1蛋白表达显著下降，MZ上调p27^kip1蛋白表达。结论MZ能够有效抑制系膜细胞增殖，作用时相在G1／S期转化，其抑制系膜细胞增殖的作用部分是通过上调p27^kip1蛋白表达实现的。     

不同植骨融合术治疗腰椎滑脱症的疗效比较分析

目的：比较3种不同植骨融合术治疗腰椎滑脱症的疗效。方法：自2006年1月至2008年12月共收治腰椎滑脱症患者85例,男36例,女49例;年龄38～65岁,平均51.8岁。采用3种手术方法：后外侧植骨融合术32例（A组）、后路椎体间植骨融合术28例（B组）、前路椎体间植骨融合术25例（C组）。疗效评定采用Nakai评分标准,骨性融合标准采用Suk标准判断。结果：所有患者均获得随访,随访时间均不少于2年。A组：优19例,良9例,中4例;B组：优16例,良9例,中3例;C组：优14例,良8例,中3例。A、B、C组的融合率分别为68.8%（22/32）、92.9%（26/28）、92.0%（23/25）。B、C组的椎间隙高度维持及融合率均优于A组（P〈0.05）。结论：对于治疗腰椎滑脱症,前路及后路椎体间植骨融合术在椎间隙高度维持及融合率优于后外侧植骨融合术,但腰椎滑脱症病情及伴随并发症多样化,应具体根据患者滑脱类型、程度、有无椎间盘突出及神经症状等做出相应的选择。     

Fas及Caspase家族在泡球蚴感染宿主肝脏中的表达及其意义

目的 探讨细胞凋亡信号分子Fas及Caspase家族在肝泡球蚴病宿主中的表达及意义.方法 16例配对泡型包虫患者(AE)肝脏标本,16只雌性BALB/C小鼠.分析肝脏标本中肝细胞病理变化、凋亡及Fas、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达.结果 AE患者病灶周围肝细胞水肿,汇管区周围纤维化,肝细胞造型坏死;病灶周围肝细胞发生显著凋亡[(74.0±15.0)％比(4.2±3.3)％],Fas[ (71.3±19.0)％比(5.2±1.6)％]、Caspase-3[ (39.4±18.3)％比(3.3±2.9)％]、Caspase-8[ (37.6±3.5)％比(4.0±1.8)％]和Caspase-9[ (24.7±13.8)％比(2.0±1.4)％]高表达(P＜0.05).泡球蚴感染小鼠病灶处可见囊泡,肝组织纤维化严重;肝细胞发生显著凋亡[(37.5±5.2)％比(13.9±2.7)％],Fas[ (48.3±6.2)％比(4.6±1.2)％]、Caspase-3[(29.7±6.3)％比(5.2±1.9)％]、Caspase-8[ (23.1±2.9)％比(3.5±1.4)％]和Caspase-9[( 16.7±3.2)％比(2.3±1.1)％]高表达(P＜0.05).结论 泡球蚴感染引起宿主肝细胞凋亡,提示Fas及Caspase家族介导的细胞凋亡信号通路可能参与了泡球蚴所致肝损伤进程.     

周围神经束间瘤变组织显微切除治疗周围神经脂肪纤维瘤

目的 探讨周围神经脂肪纤维瘤的诊治方法.方法 2005年1月至2010年7月,收治周围神经脂肪纤维瘤患者5例,其中单纯正中神经瘤变3例、正中神经合并尺神经瘤变2例、合并巨指1例,采用周围神经松解、瘤段切除、周围神经束间瘤变组织显微切除等手术治疗.结果 术后随访7～24个月,行瘤段病变切除1例术后出现神经支配区感觉缺失;行周围神经松解2例,术后手指麻木症状消失;行周围神经束间显微切除2例,无明显神经支配区感觉缺失.结论 通过CT、MRI、手术观察以及术后肿瘤病理检查可明确诊断周围神经脂肪纤维瘤,但目前治疗手段有限,周围神经束间瘤变组织显微切除是一种在最大限度保存神经功能的前提下可切除较多瘤变组织的治疗方法.     

76例乳腺癌并发甲状腺功能亢进的围手术期治疗

目的 探讨并发甲状腺功能亢进(甲亢)的乳腺癌的围手术期处理,探讨甲亢和乳腺癌的关系.方法 对26年间76例并发甲亢的乳腺癌围手术期内甲亢的处理进行回顾性分析.结果 73例无甲亢相关并发症,3例出现甲状腺危象和甲状腺危象类似症状,全组无手术死亡.结论 并发甲亢的乳腺癌手术期前,若甲亢症状明显,应首先行甲亢手术,待基础代谢率正常后才行乳腺癌手术;若无甲亢症状,在控制心率的前提下可直接行乳腺癌手术.