Tet-on基因表达系统调控HIF-1α表达对肝癌细胞凋亡的影响

目的探讨HIF-1α表达在体外对肝癌细胞凋亡的影响。方法利用Tet—on基因表达系统调控HePG2细胞HIF-1α的表达，观察细胞凋亡。结果酶切和DNA测序证实Tet—on基因表达系统反应质粒P^tre-hif-1α构建成功。获得了受强力霉素调控、稳定表达HIF-1α的肝癌细胞。经阿霉素诱导凋亡后，强力霉素终浓度为0μg／ml、0．02μg／ml、0．2μg／ml、1μg／ml、2μg／ml、5μg／ml时的细胞凋亡率分别为59．6％、50．9％、38．1％、30．5％、23．9％、18．3％；强力霉素0．02μg／ml、0．2μg／ml、1μg／ml、2μg／ml、5μg／ml处理细胞后，Casepase-3活性分别降低了2．3、5．5、8．7、12．6、18．8倍。RT—PCR检测结果显示，随着强力霉素浓度的增加，HIF-1α表达水平增加，Survivin和Bcl-2基因表达强度逐渐增加，差异有统计学意义（P〈0．001）。结论HIF-1α基因在体外可以抑制肝癌细胞凋亡，而且随着HIF-1α表达水平的增加，对肝癌细胞的凋亡抑制作用进一步加强，可能与HIF-1α诱导survivin和Bcl-2的表达及抑制casepase-3的活性有关。     

神经源性膀胱的病因及X线表现(附3例报告)

神经源性膀胱是一种排尿功能障碍所引起的疾病,原因有多种,因其结果是导致膀胱纤维化、容量小、压力高,合并上尿路积水,继发尿毒症而威胁患者生命[1],所以应及早诊断和治疗.本病从X线诊断方面报道并不多见.现将我院遇到的3例结合文献复习报告如下.     

原子力显微镜在药学研究中的应用

 目的介绍原子力显微镜(AFM)在药学研究中的应用。方法参阅具有代表性的最新文献,分析和讨论原子力显微镜在药学各领域的应用。结果与结论原子力显微镜是近年来发展最快的成像技术之一,它在药学研究中具有广阔的发展前景。     

胸腰椎前路手术的新入路

目的：介绍一种胸腰椎前路手术的新入路。方法：通过横突前，沿横突、椎弓根和椎体腰部，严格的从骨膜下向前剥离，直达前纵韧带下方。结果：经155例临床应用，这种新入路，不需要结扎节段血管，切口短、出血少、缩短了手术时间。结论：手术方法简单、操作技术方便，比原来的腹膜后入路损伤小，也同样达到理想暴露的目的。     

补肾密骨片结合骨髓移植对桡骨延迟愈合的实验研究

[目的]观察补肾密骨片结合经皮自体骨髓移植对骨折延迟愈合治疗后的骨密度和生物力学性能影响。[方法]预制新西兰大耳白兔骨延迟愈合模型，将75只兔随机分为四组：A组20只，饲料中加入补肾密骨片，骨延迟愈合区注入自体红骨髓2ml；B组20只，饲料中加入补肾密骨片，骨延迟愈合区不注入自体红骨髓；C组20只，饲料中不加补肾密骨片，骨延迟愈合区注入自体红骨髓；D组15只，造成骨延迟愈合模型后，饲料中不加补肾密骨片，骨延迟愈合区不注人自体红骨髓。治疗后12周处死动物取材，行骨密度及生物力学测试。[结果]骨密度及生物力学测试均显示A组骨愈合优于B、C、D组。[结论]补肾密骨片结合经皮自体骨髓移植治疗骨折延迟愈合的骨组织的骨密度及生物力学强度优于单一骨髓移植或中药治疗。     

Cervifix颈椎后路杆固定系统垂直水平悬吊改良单开门椎管成形术

目的:评价Cervifix固定垂直水平悬吊改良单开门椎管成形术的疗效。方法:35例颈椎病患者,男23例,女12例;年龄47~68岁,平均56·4岁;34例为脊髓型颈椎病,1例为颈椎术后翻修;椎管矢状径4·6~9·3mm;椎管矢状面狭窄率达39%~84%,平均49·3%;减压节段C3-C59例,C3-C620例,C4-C76例。常规行后正中入路单开门椎管成形术,在所减压的节段侧块上Cervifix固定,采用Roy-Camille置入侧块螺钉。先用磨钻在所减压节段的棘突根部开预穿孔,开门后穿粗丝线于Cervifix的纵连杆拉紧并打结,行水平方向固定。垂直方向在开门侧的椎板上打预穿孔,用“斜拉桥”原理悬吊于临近未减压的棘突上加固。使椎板保持在开门状态。术后颈围领保护3个月。结果:35例平均随访15个月(7~18个月)。术前JOA评分平均8·0分,术后平均15·7分。术后3个月复查CT及X线片未见螺钉松动和再关门现象。仅有3例诉颈部有僵硬感,局部无疼痛。肌电图及体感诱发电位、感觉运动传导速度基本接近正常。6个月后僵硬感基本消失。结论:Cervifix固定垂直水平悬吊改良单开门椎管成形术操作简单、安全,维持开门效果好。术后患者颈部症状恢复快、效果满意,是治疗多节段颈椎病及颈椎管狭窄症的一种有效可行的方法。     

川芎嗪对预防犬急性脊髓损伤神经保护作用的实验研究

目的研究川芎嗪对犬急性脊髓损伤模型的神经保护作用。方法Allen’s法打击犬胸13节段脊髓制成急性脊髓损伤模型，所有动物均行介入下选择性动脉插管至伤椎水平肋下动脉，留置导管作为局部给药途径。实验动物随机分为正常对照组、脊髓损伤组、川芎嗪治疗组。术后采用胥少汀脊髓功能评分标准对脊髓神经功能进行评分、MRI检查、血清和脑脊液中髓鞘碱性蛋白(MBP)和S-100B蛋白的测定来衡量脊髓损伤程度和药物治疗效果。结果川芎嗪治疗组在各时间点的神经功能评分高于脊髓损伤组并且在1W有统计学意义。核磁共振检查发现川芎嗪治疗组的相对信号值低于脊髓损伤组，在72h、1W有统计学意义。川芎嗪治疗组血清和脑脊液中MBP低于脊髓损伤组，并且MBP在72h时差异有显著性。结论川芎嗪对于急性脊髓损伤具有神经保护作用。     

FK506-壳聚糖膜与体外培养雪旺细胞生物相容性的研究

目的 探讨FK506-壳聚糖膜片与培养的雪旺细胞生物相容性.方法 将生长状况和纯度较好的第3代雪旺细胞,分别传代接种于含有FK506-壳聚糖膜片、单纯壳聚糖膜片的培养皿中培养,以盖玻片作为对照组.计算3组雪旺细胞倍增时间、雪旺细胞纯度;用MTT法比较不同膜片上雪旺细胞的生长活力,绘制生长曲线;S-100免疫荧光染色.结果 雪旺细胞倍增时间对照组为5.9 d,单纯壳聚糖膜片及FK506-壳聚糖膜片组均为4.0 d;雪旺细胞纯度分别为80%、89%,93%;雪旺细胞增殖情况以FK506-壳聚糖组最佳,单纯壳聚糖组次之,对照组最差;各组雪旺细胞均呈S-100阳性,FK506-壳聚糖组与单纯壳聚糖组雪旺细胞排列呈典型的漩涡状或栅栏状.结论 FK506-壳聚糖膜片具有更显著的组织相容性与生物功能性,并保持了雪旺细胞的生物学特性.     

腰椎峡部裂并滑脱CT扫描技术与CT征象分析

1资料与方法本组共35例,男25例,女10例,年龄25~56岁。其中腰痛伴单或双侧下肢疼痛及麻木19例,单纯腰痛15例,骶尾部疼痛1例,均无急性外伤史。使用美国GE公司Pro-speedAI螺旋CT机,层厚3 mm,层距3 mm。20例采用常规扫描,即L3~S1三个椎间盘,对峡部裂椎体从椎体下缘向上按椎间盘扫描     

两法提取皮质骨Ⅰ型胶原的比较研究

[目的]通过对两种方法提取的骨胶原产量及特性的比较,推荐一种较为理想的提取皮质骨I型胶原的方法。[方法]以猪皮质骨为原料,去除软组织后劈成小骨块,经酒精梯度脱水、无水乙醚脱脂、盐酸脱钙、甲醇:氯仿(1:1,v/v)再脱脂处理后,骨块软化。然后将软化的骨块在高速粉碎机上粉碎成脱钙骨基质粉。分别采用传统的碱溶法和自建的增强酶解法对脱钙骨基质粉处理,经溶解、离心、透析、冻干等操作提取皮质骨胶原。最后对增强酶解法所得产物进行鉴定,并对两种提取方法的效率及得到的产物的外观、黏度、凝胶固化性进行比较。[结果]增强酶解法所得胶原的氨基酸组成、蛋白电泳、相对分子量大小、最大光吸收波长均符合I型胶原特征;和碱溶法比较,提取率由(57.8±4.96)%提高到(94.04±0.55)%;其相同浓度(0.03%,w/v)醋酸溶液黏度测定,增强酶解法为3.71,碱提法为2.81;在37.0℃,pH值7.35～7.45条件下行凝胶固化性检测,增强酶解法所提胶原凝胶液约10min可固化形成凝胶块,而碱提法所提胶原的溶液仍为黏性液体。[结论]增强酶解法提取的骨胶原是I型胶原;相对于碱提法,该法提取效率高,所得胶原纯度高、黏性好、固化性好,是一种较好的从猪皮质骨中制备I型胶原的方法。