单细胞基因组和转录组的共测定方法研究进展

单细胞测序提供了大量样品测序所不能提供的异质性等信息。然而由于细胞生长发育受多种因素调节,仅依靠基因型或者表型信息无法全面、准确地说明问题。因此,开发单细胞基因组转录组共测定技术为研究基因变异与表型变异间的关系提供了强有力的工具。目前,单细胞基因组与转录组共测定技术主要分为全细胞裂解法（如：G&T-Seq、DR-Seq）,细胞膜裂解法（如：SIDR、微流控芯片法）以及其他方法（如：Simul-Seq、Gel-Seq）。本文对这几类技术进行了简要介绍,并对其前景进行了展望。     

固体分散体中葛根素与磷脂的相互作用

目的　研究葛根素与磷脂在固体分散体中的作用。方法　溶剂挥发法制备固体分散体 ,通过紫外、红外、核磁共振光谱和薄层层析研究了葛根素与磷脂在固体分散体中的作用。结果　在氯仿中葛根素及其物理混合物的最大紫外吸收波长为 2 4 3nm ,但固体分散体为 2 5 0nm ,而在甲醇中都为 2 5 0nm。与物理混合物相比 ,固体分散体中葛根素苯环骨架的特征吸收峰和磷脂P =O伸缩振动峰明显改变 ,磷脂的C =C伸缩振动峰消失 ;在核磁共振光谱中固体分散体中葛根素苯环骨架的信号明显减弱或消失 ,而磷脂极性端和不饱和部分的信号明显变化。在以氯仿甲醇水 ( 6 5∶2 5∶5 )为展开剂的硅胶薄层板上葛根素与磷脂可完全分开。结论　在固体分散体中葛根素的苯环骨架与磷脂极性端和不饱和部分可能以氢键、静电引力或电荷迁移力以及分子间作用力相作用而固定 ,并被磷脂的脂肪链所包围     

溃结康对三硝基苯磺酸诱导大鼠炎症性肠病的作用研究

目的 观察溃结康经灌肠给药对三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)诱导的炎症性肠病动物模型的作用,以明确溃结康对炎症性肠病的治疗作用,为探索药物应用于克罗恩病治疗的可行性。方法 采用TNBS灌肠的方法诱导大鼠溃疡性结肠炎模型,观察溃结康灌肠给药对大鼠疾病活动指数(DAI)评分、血清干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-l(IL-1)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)和肠黏膜中谷氨酰胺(Glutamine,Gln)的含量的影响,并观察药物对大鼠结肠组织损伤评分以及病理学的影响。结果 TNBS诱导的结肠炎模型可引起动物体质量下降,肉眼血便或便潜血阳性,DAI评分增高,血清IFN-γ,IL-1升高,肠黏膜Gln降低,溃结康不同剂量组灌肠给药可改善TNBS引起的DAI评分增高以及降低血清IFN-γ、IL-1水平,升高肠黏膜Gln,缓解结肠炎组织学变化,其中尤以溃结康高剂量组作用更为明显。结论 溃结康灌肠给药对缓解TNBS诱导结肠炎模型有一定治疗作用。     

组蛋白修饰变化参与曲古抑菌素A缓解的烟草烟雾暴露所致小鼠子宫损伤过程

目的研究组蛋白修饰变化在曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)缓解烟草烟雾(cigarette smoke,CS)暴露所致的雌性小鼠子宫损伤过程中的作用。方法通过CS暴露30 d方法制备CS暴露小鼠子宫损伤模型,CS暴露的同时给予TSA进行治疗;HE染色观察各组小鼠子宫组织形态学变化;Western blot技术检测各组小鼠子宫组织H3K4me1、H3K4me2、H3K4me3、H3K9me1、H3K9me2、H3K9me3和H3K27me3总的修饰水平变化以及GLP(euchromatic histone lysine methyltransferase 1,H3K9甲基转移酶),G9ɑ(euchromatic histone lysine methyltransferase 2,H3K9甲基转移酶),EZH2(enhancer of zeste homolog 2,H3K27me3甲基转移酶)的表达水平。结果TSA缓解CS暴露所致的雌性小鼠子宫间质细胞和腺体数量减少等结构改变。TSA有效抑制了CS暴露激活的小鼠子宫组织H3K9me1的表达,但却进一步激活CS暴露诱导的总H3K27me3修饰水平。TSA可以抑制CS暴露激活的小鼠子宫组织GLP和G9ɑ的表达,进一步激活CS暴露诱导的EZH2表达水平。结论组蛋白修饰变化参与CS暴露所致的小鼠子宫损伤以及TSA的缓解损伤过程。     

复方中药对肝硬化大鼠内毒素血症治疗作用的实验研究

目的：观察复方中药对肝硬化大鼠内毒素血症的治疗作用。方法：采用小剂量内毒素对肝硬化大鼠尾静脉注射制成内毒素血症模型。以复方中药为治疗组,生理盐水为对照组,观察对肝硬化内毒素血症大鼠的肝功能、血氨（BA）、内毒素、肝组织病理炎症活动度等的影响。结果：复方中药组对大鼠的肝功能、血氨、内毒素、肝组织病理炎症活动度等改善优于对照组。结论：由虎杖、生山楂、酸枣仁、蒲公英、石菖蒲、茵陈等组成的复方中药对肝硬化大鼠内毒素血症有显著的治疗作用,可能通过改善肝功能情况、减轻肝脏炎症活动、抑制肠道对氨类物质的吸收,降低血氨水平以及降低机体对内毒素的敏感性等机制发挥作用。     

超微细粉小复方等对大鼠心肌缺血/再灌注损伤能量代谢的影响研究

目的:观察具有益气活血通痹作用的中药超微细粉小复方对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法:63只大鼠随机分假手术组(Sham)、模型组(Model)、中粉组(Z)、超微细粉组(X)、煎剂组(J)、麝香保心丸组(SX)等7组,灌胃14天,冠脉结扎60min联合Langendroff灌流120min复制心肌缺血/再灌注模型,采用生化方法检测各组大鼠心肌Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、FFA含量。结果:与模型组相比,益气活血通痹小复方各组均能降低心肌FFA含量(P<0.01),其中以中粉组、超微细粉组效果最佳。中粉组、超微细粉组能升高心肌Na+-K+-ATPase含量、Ca2+-Mg2+-ATPase含量(P<0.01),煎剂组能升高Ca2+-Mg2+-ATPase含量(P<0.05)。结论:益气活血通痹小复方可能通过改善心肌能量代谢减轻心肌缺血/再灌注损伤,以中粉组、超微细粉组效果最佳。     

中医不同证型乳腺增生患者血清蛋白质组的研究

目的：应用凝胶内差异显示电泳和质谱技术研究不同证型乳腺增生病患者血清蛋白质组。方法：收集正常人及不同证型乳腺增生病患者血清,去除高丰度蛋白质后分别用Cy3或Cy5标记,每一对Cy3和Cy5标记样品都与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder6.5软件进行分析,筛选表达量有显著差异的蛋白质进行质谱鉴定。结果：与正常人相比,在乳腺增生患者血清中抗凝血酶lii、富含亮氨酸的α-2糖蛋白、HCCR结合蛋白2、结合珠蛋白2和转甲状腺蛋白及其变异体表达量增加。而SP40,40、Ras association and pleckstrin homology domains 1 iso-form3表达量下降。在不同证型乳腺增生患者血清中,抗凝血酶lii和SP40,40在肝郁气滞型表达量最高,痰瘀互结型次之,而冲任失调型表达量少;HCCRBP2在痰瘀互结型中表达量最高,在肝郁气滞型中表达量最低;转甲状腺素蛋白变异体在肝郁气滞型、冲任失调型和痰瘀互结型中表达依次降低。结论：这些蛋白质可能与乳腺增生病不同证型相关,可以作为乳腺增生病临床中医辨证论治的候选客观指标。     

猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库的构建

目的:构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库.方法:15只成年家猫随机分为正常对照组、视神经压迫4周组和视神经压迫8周组(n=5),压迫4周组和压迫8周组猫利用球囊植入法建立慢性视神经损伤模型.取各组动物视神经,TRIzol法提取总RNA,SMART技术合成cDNA,随后利用抑制消减杂交方法分离受压4周和8周视神经中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行文库扩增和蓝白斑筛选,随机挑取300个白色克隆进行菌落PCR鉴定.结果:菌落PCR扩增显示每个文库80%的克隆中均有200～800 bp的插入片段.结论:成功构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆慢性视神经损伤相关差异表达基因奠定了基础.     

“一键启动”流程优化在缩短急性缺血性脑卒中患者静脉溶栓时间中的应用

目的 探讨“一键启动”流程优化在缩短急性缺血性脑卒中患者静脉溶栓时间中的应用效果。方法 选择2020年1-12月笔者所在医院收治的急性缺血性脑卒中静脉溶栓患者86例为研究对象,其中2020年1-6月入院进行静脉溶栓的41例为对照组,2020年7-12月入院进行静脉溶栓的45例为观察组。对照组采用常规抢救流程,观察组采用“一键启动”流程优化进行干预。比较2组入院至见到神经内科医生的时间（door to physician,DTP）、入院至实验室检查出报告时间（door to laboratory,DTL）、入院至溶栓用药时间（door to needle time,DNT）、入院至完成CT检查的时间（door to imaging,DTI）、美国国立卫生研究院卒中量表（national institute of health stroke scale,NIHSS）评分与改良RANKIN量表（modified Rankin scale,MRS）评分。结果 观察组DTP、DTL、DTI、DNT均明显短于对照组（Z=-8.506,P<0.001;Z=-6.750,P<0.001;Z...     

我院门诊非甾体抗炎药的合理使用情况调查

目的：通过调查我院门诊处方中非甾体抗炎药的使用情况,并对调查结果进行分析和讨论,促进我院非甾体抗炎药使用的合理化和规范化。方法：随机抽取2008年01月至2008年12月的21223张门诊处方中非甾体抗炎药的使用情况进行统计,按使用频率进行排序,取前5位药物,分析其在年龄、使用剂量的合理性和该药物所用的症状-9药物说明书的适应证的相符性方面的临床分布特点。结果：服用非甾体抗炎药患者1564例,占门诊处方总数21223例的7．37％。使用频率前5位的非甾体抗炎药分别为阿司匹林肠溶片、二氟尼柳片、美洛昔康片、复方氯唑沙宗片、双氯芬酸缓释片,统计药物的DUI值大多符合规定,其中使用频率前5位的药物为100％合理使用（DuI值等于或小于1）。使用频率前5位的非甾体抗炎药总相符率为75．7％。病种以损伤史最多,其次是关节炎、腰背痛,分别为：167例（10．78％）、160例（10．23％）、154例（9．85％）。结论：我院非甾体抗炎药的使用与说明书适应证的相符率较高,该类药物的使用基本合理。